Produtos padrãoÉ a principal substância de referência para análise quantitativa em laboratório e validação de métodos, e a especificação de sua formulação e diluição determina diretamente a precisão dos resultados de teste. Este artigo reúne um conjunto de precauções operacionais simples e acessíveis ​​para ajudar os experimentadores a evitar erros comuns e garantir a confiabilidade dos dados experimentais.

Precauções pré-preparação

Pré-tratamento de produtos padrão

Equilíbrio a temperatura ambiente: os produtos padrão retirados do ambiente refrigerado / congelado devem ser colocados a temperatura ambiente por 30 a 60 minutos para que sejam consistentes com a temperatura ambiente de laboratório e evitem erros de absorção de umidade ou volume durante a pesagem devido à diferença de temperatura.

Abertura e repartição: os produtos padrão abertos pela primeira vez devem ser repartidos de acordo com a quantidade mínima de uso para evitar repetidas congelações (especialmente produtos padrão biológicos); Utilize um tubo centrífugo descartável estéril e isento de enzimas para a partilha e rótulo (nome, concentração, data de partilha, prazo de validade).

Confirmação da pureza: verificar o certificado padrão antes do uso, confirmar a pureza, a umidade, o conteúdo de impurezas e outros indicadores, se for um produto padrão que contém água cristalina, a proporção de água cristalina deve ser contada no cálculo da concentração da formulação para evitar desvios de concentração.

Preparação e calibração do equipamento

Escolha do instrumento de medição: escolha o dispositivo de precisão apropriada de acordo com o volume de preparação, como a preparação de uma pistola de pipeta / tubo de pipeta com solução inferior a 10 mL (precisão de nível A), garrafas com capacidade superior a 100 mL; O cilindro comum é estritamente proibido para a configuração precisa.

Limpeza de equipamentos: todos os equipamentos em contato com os produtos padrão devem ser limpos com água ultrapura mais de 3 vezes, e os produtos padrão orgânicos também devem ser lubrificados com o solvente orgânico correspondente para evitar a poluição de impurezas residuais.

Verificação de calibração: calibre regularmente a pistola de pipeta, a garrafa de capacidade e outros dispositivos para garantir que seus erros estejam dentro do limite permitido e que os registros de calibração sejam mantidos para verificação.

Escolha e tratamento dos solventes

Características do produto padrão correspondente: o produto padrão solúvel em água é preferivelmente preparado com água ultrapura (resistência ≥ 18,2 MΩ · cm); Os padrões de solubilidade em gordura devem escolher o solvente orgânico correspondente (por exemplo, metanol, acetonitril, orthohexano) e o solvente deve ser cromatográfico ou analítico puro ou superior.

pré-tratamento do solvente: o solvente volátil deve ser operado no armário de ventilação para evitar que a volátilidade do solvente afete a concentração; Os solventes que contêm o sistema de tampão precisam ajustar o pH antecipadamente para o intervalo exigido e estão disponíveis para evitar falhas na capacidade de tampão.

Precauções de Pesagem e Capacitação

Enlace de pesagem

Escolha da balança: de acordo com a faixa de pesagem do produto padrão, escolha a balança de precisão correspondente, como a balança de análise de um milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo de milésimo.

Anti-sucção de umidade e anti-volátilidade: os produtos padrão de fácil sucção de umidade precisam ser pesados rapidamente no secador; Os líquidos padrão voláteis exigem que a garrafa seja selada com uma membrana para reduzir a perda de volátilidade.

Pesagem em paralelo: é recomendado realizar duas pesagens em paralelo e, se o desvio dos resultados for superior a 0,5%, é necessário re-pesar para garantir que os dados de pesagem sejam precisos.

Enlace de acomodação

Completamente dissolvido: depois de transferir o padrão pesado para a garrafa de capacidade, adicione uma pequena quantidade de solvente para vibrar completamente ou ultra-som para garantir que o padrão seja completamente dissolvido e sem partículas visíveis ao olho nu; Os padrões biológicos (por exemplo, proteínas, ácidos nucleicos) devem ser misturados suavemente e invertidos para evitar que vibrações fortes causem falhas de atividade.

Precisão de configuração: após a temperatura da solução é consistente com a temperatura ambiente, adicione lentamente o solvente à linha de escala da garrafa de capacidade, quando se aproxima da escala, adicione gota a gota com a cabeça de cola para garantir que a superfície concava e a linha de escala sejam planas; Inverter a garrafa de capacidade de 10 a 15 vezes após a configuração para que a solução seja completamente misturada.

Considerações principais no processo de diluição

Escolha do gradiente de diluição

O líquido de reserva padrão de alta concentração requer diluição gradual para evitar que a diluição direta cause erros de concentração, por exemplo, diluindo o líquido de reserva de 1000 μg/mL primeiro para 100 μg/mL de líquido intermediário e depois para 10 μg/mL de líquido de trabalho.

O múltiplo de diluição não deve ser muito grande, o múltiplo de diluição única não é recomendado para exceder 100 vezes, se for necessária uma concentração extremamente baixa de líquido padrão, pode ser diluído em múltiplos pequenos múltiplos.

Detalhes da operação de diluição

Ao remover o líquido de reserva, a cabeça da pistola de pipeta precisa ser lavada 2 a 3 vezes para reduzir a perda da parede; Depois da transferência, a parede interna do pipete deve ser lavada com um solvente para garantir a transferência total para o recipiente de diluição.

Durante o processo de diluição, é necessário misturar suavemente os lados do solvente, especialmente as soluções padrão viscosas ou facilmente estratificadas, para evitar concentrações locais desiguais.

Verificação de estabilidade após diluição

Alguns produtos padrão (por exemplo, vitaminas, produtos padrão de resíduos de pesticidas) têm uma estabilidade fraca do líquido de trabalho e precisam ser usados ​​atualmente; Para conservação de curto prazo, é necessário armazenar sob as condições especificadas pelo certificado e verificar a sua aparência (sem turbididade, precipitação, decoloração) antes de usar.

Precauções de armazenamento e registro após a preparação

Condições de armazenamento

Armazenamento de acordo com os requisitos do certificado padrão, como os produtos padrão biológicos - 20 ° C para conservação congelada, produtos padrão orgânicos podem ser refrigerados para conservação à luz; Os recipientes de armazenamento devem ser selados para evitar que o contato com materiais como tampões de borracha cause adsorção.

O líquido de trabalho é recomendado para ser dividido em doses de uso único para evitar que o descongelamento repetido ou abertura leve a alterações de contaminação e concentração.

Retenção de registros

Faça um registro da formulação, incluindo o nome do produto padrão, número de lote, número de certificado, massa/volume de pesagem, tipo de solvente, concentração da formulação, gradiente de diluição, data da formulação, operador, etc., para garantir a rastreabilidade dos dados.