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Preparação de amostras SEM: técnicas de processamento de amostras de metais a amostras biológicas
Datas:2025-12-12Leia:1
O microscópio eletrônico de varredura (SEM) faz imagens que interagem com amostras por meio de feixes de elétrons e exige elevados requisitos de condutividade elétrica, planejamento de superfície e limpeza da amostra. Os diferentes materiais precisam ser tratados de forma específica, e a seguir apresentamos dicas práticas em termos de amostras metálicas, não metálicas e biológicas.
Amostras de metal: condutividade e limpeza de superfície são fundamentais
As amostras de metal são bem condutivas, mas a oxidação ou a poluição da superfície podem interferir com a imagem. Passos de processamento:
Corte e mosaico: para grandes amostras de metal, corte com fio ou roda de moer em pequenos pedaços para fácil observação; Os metais frágeis, como os metálicos cerâmicos, precisam ser fixados a frio, como a resina epóxida.
Polimento mecânico: em seguida, com papel de lixa (400 # a 2000 #) grinding, em seguida, com óxido de alumínio ou pasta de polimento de diamante para o espelho para reduzir os arranhões na superfície.
Limpeza: limpar por ultra-som durante 5-10 minutos, remover os resíduos de polimento e desidratar com etanol ou acetona para evitar a oxidação.
Tratamento de condutividade (opcional): se a amostra for mal condutiva (como aço de alto carbono), reveste uma camada fina de ouro (5-10 nm) ou uma película de carbono para melhorar a recepção do sinal.
Amostras não metálicas: maior condutividade e estabilidade
Os não-metais (como cerâmica, polímeros) têm má condutividade elétrica e precisam se concentrar em resolver o efeito de carga elétrica. Habilidades de processamento:
Revestimento: A superfície é pulverizada com uma camada de ouro, platina ou carbono (espessura de 2-20nm) para formar uma via condutora.
Tratamento de secagem: As amostras de biopolímeros precisam ser desidratadas em gradiente (série de etanol ou acetona) e secadas em ponto crítico (secador supercrítico de CO2) para evitar deformações de contração.
Condutividade de superfície: para materiais porosos, como carvão ativo, é possível impregnar os poros com goma condutora ou pasta de prata.
Bioamostras: manter o equilíbrio entre estrutura e condutividade
As amostras biológicas (por exemplo, células, tecidos) precisam equilibrar a conservação morfológica e a condutividade elétrica. Passos principais:
Fixação: Fixe a estrutura celular com pentadio ou formaldeído para evitar deformações durante a observação.
Desidratação: Desidratação em gradiente de etanol ou acetona (30%-100%) por 10-15 minutos a cada passo.
Secação do ponto crítico: evitar o colapso estrutural causado pela tensão superficial e manter a morfologia tridimensional da célula.
Revestimento: pulverizar uma camada fina de ouro ou platina (2-5nm) para reduzir o efeito de carga, mantendo os detalhes da superfície.
Recomendação geral: todas as amostras devem ser secadas com nitrogênio de alta pureza após a preparação para evitar manchas de água; Certifique-se de que a superfície da amostra é limpa antes do revestimento, caso contrário o revestimento não uniforme afetará a qualidade da imagem. O processamento direcionado melhora significativamente a resolução da imagem SEM, fornecendo dados confiáveis ​​para análise de materiais e pesquisa biológica.