Métodos principais para evitar a reunião celular em culturas celulares de microgravidade

Otimizar a densidade de vacinação: controle a concentração inicial de células em 1 x 104 ~ 5 x 105 células / mL (ajustado de acordo com o tipo de célula), para evitar que a concentração excessiva leve à agregação natural.

Escolha o meio adaptado: adicione a quantidade apropriada de anti-aglomerante (por exemplo, 0,1% ~ 0,5% de metilcelulose, Pralando), ou use um meio de cultura de baixo soro / sem soro para reduzir a adesão mediada por proteínas.

Reforçar o equilíbrio dinâmico do sistema de cultura: aproveitando a função de controle de velocidade preciso do TDCCS-3D de Pequim, mantenha a rotação suave de 5 a 20 rpm e disperse as células através da força de corte do fluido; Substituir regularmente 1/3 do meio de cultura para remover resíduos metabólicos e fatores indutores de agregação.

4. pré-tratamento de células e recipientes: antes da vacinação, digerir suavemente os agrupamentos celulares com a panenzima para garantir o estado de suspensão de células únicas; Cultivar a parede interna da garrafa para tratamento hidrofílico ou revestimento (como polilisina), reduzindo a probabilidade de reunião da parede celular.

Regulação precisa do ambiente de cultura: manter o pH 7,2 ~ 7,4, temperatura 37 ° C ± 0,5 ° C, para evitar que as flutuações ambientais desencadeiem a acumulação de estresse celular; Algumas células podem adicionar EDTA (0,02%) para auxiliar a dispersão.