I. Introdução

O pólen é um equipamento-chave na biotecnologia vegetal que, através do controle preciso da temperatura, da velocidade de rotação e da luz, cria um ambiente estável e uniforme de cultivo em suspensão líquida para o pólen isolado, simulando e otimizando suas condições fisiológicas, induzindo-o a mudar a via normal de desenvolvimento do ligando para o desenvolvimento dos esporosomas e, finalmente, produzindo plantas monosómicas ou tecidos feridos.

Configuração comum:

• temperatura：25°do C-28°O C(intervalo central), precisão de controle de temperatura deve atingir ±0.5°O Cou superior para satisfazer o tratamento pré-excitação térmica (como33°O Cprocedimentos complexos.

• Velocidade:50 - 120 rpm(Zona de baixa velocidade), a operação deve ser extremamente suave para garantir uma mistura suave sem danificar as células de pólen frágeis.

• Intensidade da luz:Geralmente em condições escuras (com um sombreiro padrão ou colocado em uma sala escura), alguns estudos exigem luz/No período escuro, é necessário configurar um sistema de iluminação controlada.

III. Detalhes do programa

Cenas típicas:

O programa é amplamente utilizado na reprodução genética e na pesquisa fisiológica de culturas econômicas importantes como tabaco, arroz, pimenta, repolho e trigo. Seu objetivo principal é libertar pequenos esporos/Cultura de pólen, produção eficiente de duplos monopolios de fundo genético puro (Duplo haplóide, DHPlantas, reduzindo significativamente a idade de reprodução e acelerando a seleção puramente ligada e a pesquisa da função genética.

Parâmetros e princípios de configuração:

O sucesso da cultura de pólen depende fortemente da precisão e da estabilidade do ambiente físico-químico fornecido pelo termostático. Seu princípio central é que, através de um controle preciso da temperatura, uma oscilação suave e uma iluminação controlada, o pólen é conduzido conjuntamente da via de desenvolvimento do ligamento para a via de embriogenese.

• Temperatura:25°do C-28°O C(Área principal)

A temperatura é um dos parâmetros mais críticos e a desdiferenciação do pólen e a inicialização do embrião são extremamente sensíveis às flutuações de temperatura, por isso o dispositivo deve ser capaz de25°O Cpara28°O CManter-se estável a longo prazo dentro do intervalo do núcleo, geralmente exigindo um intervalo de flutuação inferior a ±0.5°O C. Além disso, como a estimulação térmica comumente usada na cultura de pimenta (como33°O CO pré-tratamento por força, como o processamento por horas, também exige a taxa de aquecimento do equipamento e a precisão da mudança de temperatura.

• Velocidade:50 - 120 rpm(zona de baixa velocidade)

O controle da velocidade de rotação está diretamente relacionado com a taxa de sobrevivência das células. Como o pólen é uma célula frágil que carece de proteção da parede celular, velocidades elevadas podem produzir forças de corte destrutivas. Portanto, a cama deve estar50-120 rpmOperando suavemente e uniformemente dentro da faixa de baixas velocidades, essa oscilação suave garante a troca uniforme de nutrientes e gases no líquido de cultura e evita eficazmente a reunião celular, evitando ao mesmo tempo a ruptura celular devido a agitações violentas.

• Intensidade da luz: geralmente em condições escuras

A gestão da luz geralmente escolhe as condições escuras no início da cultura, uma vez que a escuridão provou ser mais favorável à iniciação embrionária de pequenos esporos. Portanto, é comum escolher uma cama balançada com um design totalmente sombreado ou colocá-la em uma sala escura. Para alguns estudos que exigem estudar os efeitos do ciclo da luz no desenvolvimento do embrião, é necessário equipar o leito com um sistema de iluminação programável para um controle preciso do ciclo da luz e escuridão.

Por fim, o ambiente estéril é a garantia do sucesso dos experimentos. Adoção comum de camas de agitação304ou316O material de aço inoxidável, devido à sua resistência à corrosão, superfície lisa e fácil de limpar e desinfetar, pode prevenir eficazmente a poluição microbiana e garantir que o pólen cresça em um ambiente puro.

IV. Origem da literatura

• Touraev, A., Vicente, O., & Heberle-Bors, E. (1997). Iniciação da embriogênese de microesporos pelo estresse. Tendências em Ciência das Plantas, 2(8), 297-302.

  Esta é uma revisão fundamental que descreve sistematicamente que a embriogenese de pequenos esporos em várias plantas, incluindo tabaco, é induzida por forças adversas, como forças de temperatura, e discute detalhadamente os métodos de cultura em suspensão líquida relevantes, esclarecendo o papel central do termostático no sistema tecnológico.

• Gui, Y., et al. (2018). Melhoria da eficiência da cultura antra do arroz pelo estresse abiótico. Cultura de células, tecidos e órgãos vegetais (PCTOC), 135(2), 269-279.

  Este artigo de pesquisa fornece casos de prática mais recentes de cultivo de pólen de arroz. Para otimizar a eficiência do cultivo, o sistema de cultivo líquido é usado claramente e os parâmetros de cultivo realizados em um leito de agitação térmica estática (como velocidade de rotação, temperatura) são descritos especificamente na seção de materiais e métodos, refletindo a aplicação prática do dispositivo na tecnologia moderna de cultivo de culturas.

• Kim, M., et al. (2013). Produção de haplóides duplicados através da cultura de antros em Capsicum annuum L. Korean Journal of Horticultural Science & Technology, 31(3), 350-357.

  Esta literatura representa um exemplo típico da aplicação de técnicas de cultivo de pólen em culturas mais difíceis, como pimenta. A parte metodológica do artigo afirma claramente que "colocar a erva em um meio líquido em uma cama rotativa para80 rpmA velocidade, em25°O CCultivo em condições escuras ", fornecendo parâmetros específicos de uso de equipamento e suporte de protocolo para espécies únicas de culturas de horticultura, como pimenta.