O WesternBlottingSystem é uma ferramenta eficiente para detectar e quantificar proteínas específicas em amostras biológicas. O sistema combina várias tecnologias de automação para melhorar a repetitividade, a precisão e a eficiência dos experimentos. Abaixo estão detalhes técnicos do sistema totalmente automático de cruzamento de impressão imunológica de proteínas.
I. Composição do sistema
Unidade de preparação de amostras
Módulo de processamento de amostras: inclui a fissura, concentração e diluição de amostras, geralmente equipado com uma centrífuga e um triturador de ultra-som.
Módulo de Análise Quantitativa: Determinação da concentração de proteínas usando espectrofotômetros ou outros dispositivos de análise.
Unidade de eletroforese
Equipamento de eletróforese em gel: o sistema totalmente automático geralmente integra um eletróforese, capaz de carregar automaticamente amostras em gel de poliacrilamida e controlar as condições de eletróforese (corrente, tensão, tempo, etc.).
Unidade de transferência
Dispositivo de transferência de membrana: transfere a proteína após a eletroferese para a membrana de PVDF ou nitrato de celulose por transferência elétrica ou transferência úmida. O sistema totalmente automático controla com precisão o tempo e a tensão da transferência.
Unidades fechadas e incubadoras
Sistema de injeção de líquido fechado: para prevenir ligações não específicas, o líquido fechado é adicionado automaticamente e incubado.
Módulo de incubação de anticorpos: adição automática de I e II anticorpos para garantir a incubação uniforme.
Unidade de lavagem
Sistema de lavagem automática: várias lavagens automáticas da membrana são realizadas por bombeamento de tampão de lavagem para remover anticorpos não ligados.
Unidade de teste
Sistema de reação de colorização: geralmente integra módulos de detecção de luminiscência química ou colorimetria para adicionar automaticamente substâncias e monitorar a reação.
Sistema de imagem: câmeras de alta resolução são usadas para capturar imagens de faixas de proteínas e realizar análises posteriores.
Software de análise de dados
O software de análise conectado ao dispositivo automatiza o processamento de dados, incluindo quantificação de proteínas, análise de faixas e saída de resultados.
II. Princípio de funcionamento
O princípio de funcionamento do sistema totalmente automático de cruzamento de impressão imunológica de proteína pode ser dividido em várias etapas:
Preparação de amostras
Extrair proteínas de células ou tecidos e determinar sua concentração por métodos quantitativos.
Separação eletroforese
As amostras são submetidas a eletroferese SDS-PAGE em gel de poliacrilamida para separar diferentes proteínas de acordo com o tamanho da proteína.
Processo de transferência
As proteínas isoladas são transferidas para a membrana através de campos elétricos, formando uma impressão de proteína.
Fechamento e incubação
Utilize um líquido fechado para tratar a membrana para evitar ligações não específicas e, em seguida, incube a I e a II, em seguida.
Passos de lavagem
Lave a película várias vezes para remover anticorpos não ligados e reduzir o ruído de fundo.
Detecção e imagem
Adicione um substrato para uma reação de colorização, usando um sistema de imagem para capturar imagens de faixas de proteínas.
Tratamento de dados
Utilize o software de análise para processar imagens, quantificar níveis de expressão de proteínas e gerar relatórios.
Vantagens técnicas
Alto fluxo
Os sistemas automatizados podem processar várias amostras simultaneamente, aumentando a eficiência dos experimentos e tornando-os adequados para exames em grande escala.
Forte repetitividade
As operações automatizadas reduzem os erros humanos e aumentam a repetibilidade e a confiabilidade dos resultados experimentais.
Gestão de dados
O software de análise de dados automatiza o processamento e registro de dados para facilitar o arquivamento e a análise posterior dos dados.
Eficiência do tempo
Os processos automatizados abreviaram significativamente o tempo dos experimentos e permitiram que os pesquisadores obtivessem resultados mais rapidamente.
Controle preciso
Todos os parâmetros do sistema (temperatura, tempo, concentração, etc.) podem ser controlados com precisão para otimizar as condições experimentais.
Área de aplicação
Pesquisa básica: para estudos de função de proteínas, análise de vias de transmissão de sinal, etc.
Diagnóstico clínico: para a detecção e monitoramento de marcadores de doença.
Desenvolvimento de medicamentos: avaliar o efeito dos medicamentos na expressão de proteínas.
Pesquisa em plantas e animais geneticamente modificados: detecção de proteínas expressas geneticamente.
Resumo
O sistema totalmente automático de cruzamento de impressão imunológica de proteínas melhora significativamente a eficiência e a precisão da detecção de proteínas através da integração de várias tecnologias de automação. É amplamente utilizado em pesquisas em ciências da vida e diagnóstico clínico, tornando-se uma ferramenta importante para a bioanálise moderna. Através do desenvolvimento contínuo e da otimização, esses sistemas irão impulsionar ainda mais o avanço da pesquisa no campo biomédico.