Aqui está uma descrição detalhada da instalação da coluna de cromatografia líquida:

Preparação antecipada

- Verifique o estado do instrumento: abra o cromatográfico líquido para confirmar que o sistema não tem alerta e que todos os componentes estão funcionando corretamente. Uma atenção especial é dada à estabilidade da pressão da bomba e à estabilidade da linha de base do detector, que é uma pré-condição para a instalação e uso posteriores.

- Verifique a aparência da coluna de cromatografia: a nova coluna de cromatografia líquida geralmente vem com um relatório de inspeção de fábrica e um certificado de aprovação. Verifique se o corpo da coluna cromatográfica tem danos, rachaduras e outras situações, especialmente as partes de junção em ambas as extremidades da coluna, se o problema for encontrado, deve ser substituído oportunamente. Ao mesmo tempo, registrar o modelo da coluna cromatográfica, número de série e outras informações para consultas posteriores e uso de manutenção.

Passos de instalação

Fase de fluxo residual do sistema de esvaziamento: a fase de fluxo original dentro do instrumento é eliminada por meio de válvulas múltiplas, etc., para evitar a mistura com o solvente de conservação dentro da nova coluna cromatográfica para produzir precipitação ou interferência. A bomba pode ser acionada a uma velocidade de fluxo mais baixa por um período de tempo.

Conectar a coluna cromatográfica: determinar a direção de entrada e saída da fase de fluxo da boa coluna cromatográfica (os fabricantes gerais terão uma marca clara na coluna cromatográfica). Conecte cuidadosamente uma extremidade da coluna cromatográfica ao tubo posterior ao amostrador e a outra extremidade ao tubo diante do detector. Para garantir que a interface se encaixe bem, o método comum é primeiro apertar a porca de tomada com a mão e, em seguida, reforçar adequadamente com a chave, mas preste atenção à força moderada para evitar danos à junta da coluna cromatográfica.

3. Enxague inicial: após a instalação, selecione a coluna cromatográfica relativa de fluxo inicial adequada para o enxague. Para as colunas de cromatografia de fase inversa, uma alta proporção de solução misturada de solventes orgânicos é frequentemente escolhida como fase de fluxo inicial. Defina uma velocidade de fluxo mais baixa para permitir que a fase de fluxo flua lentamente através da coluna cromatográfica, com o objetivo de substituir os resíduos de solvente de conservação dentro da coluna, enquanto a superfície de preenchimento de fase fixa é úmida, excluindo bolhas].

Coluna de cromatografia de equilíbrio: após a lavagem inicial, mude para a fase de fluxo alvo para a operação de equilíbrio antes da análise. Mantenha a coluna cromatográfica estável nas condições da fase de fluxo alvo, observando as mudanças de pressão e a situação de base. Quando a pressão é estável e a linha de base tende a suavizar, a coluna cromatográfica está basicamente bem equilibrada e a análise da amostra pode ser realizada.

Atenção

- Evitar a introdução de bolhas: durante todo o processo de instalação, prestar especial atenção para evitar que o ar entre na coluna cromatográfica. Como as bolhas ocupam o espaço dentro da coluna, afetando o efeito de separação do solúvel, também pode causar danos locais à coluna cromatográfica por alta pressão. Portanto, no processo de conexão da tubulação e lavagem, é necessário prestar atenção ao caso de bolhas serem produzidas, se houver, para ser excluída a tempo.

- Controle da velocidade de fluxo e pressão: no início da lavagem e do equilíbrio, não é aconselhável usar velocidades de fluxo excessivamente altas para evitar que a camada da coluna cromatográfica seja solta ou deslocada devido a um impacto súbito de alta pressão. À medida que a coluna cromatográfica se adapta gradualmente ao ambiente de fase de fluxo, a velocidade de fluxo é ajustada para a faixa apropriada de acordo com a situação real.

As etapas e precauções de instalação especificadas acima garantem a instalação e uso corretos da coluna de cromatografia líquida, estabelecendo a base para obter resultados analíticos precisos e confiáveis.