As colunas cromatográficas, como um componente central da separação cromatográfica, determinam diretamente a precisão e a repetibilidade dos resultados da análise. A manutenção científica pode estender significativamente o efeito da coluna e reduzir a frequência de falhas, o seguinte é o principal ponto de manutenção do sistema de especificações de uso, manutenção limpa e gerenciamento de armazenamento:

Seguir estritamente as condições de utilização das fronteiras

Controle do pH

Os preenchimentos de matriz de silicone têm uma tolerância limitada (normalmente) à faixa de pH, e além dessa faixa pode levar à hidrolise da fase ligada. É necessário controlar rigorosamente o pH da fase de fluxo e, se necessário, escolher colunas específicas resistentes a álcalis (por exemplo, matrizes de polímeros).

Exemplo: A análise de compostos ácidos prefere o sistema de sal tampão de pH para evitar a amostragem direta de ácido puro.

Controle de pressão e velocidade

Evite operações de sobrepressão por muito tempo (≤ valor máximo de pressão), a alta pressão acelera o colapso do preenchimento; O uso inicial aumenta gradualmente a pressão para as condições de trabalho para evitar danos súbitos à estrutura do leito de coluna.

A configuração da velocidade de fluxo não deve exceder o valor recomendado (), e a alta velocidade de fluxo, embora reduza o tempo de análise, aumenta o desgaste do preenchimento e reduz o número de torres teóricas.

Gestão da temperatura

Altas temperaturas podem melhorar a separação de componentes complexos, mas altas temperaturas a longo prazo (> 60 ° C) podem acelerar a perda de líquidos fixos. Recomenda-se aumentar a temperatura da coluna somente se necessário, e não exceder 5°C/min por aquecimento.

Programas de Limpeza e Recuperação Periódica

Procedimento de lavagem regular

Após a análise diária, o contaminante hidrofóbico deve ser lavado com a baixa velocidade de fluxo inicial durante 30 minutos e depois com uma solução aquosa contendo 5% a 10% de nitrilo acetico.

As impurezas de lavagem difícil podem ser lavadas em gradiente: a transição gradual da fase alta aquática para a fase alta orgânica, usando a mudança polar do solvente para descascar os resíduos.

Tecnologia de Regeneração Profunda

Quando os poluentes solúveis em gordura são acumulados, a solução pode ser lavada a baixa velocidade com um surfactante não iónico (como Twain-20);

Contaminação com quelatos metálicos pode ser lavada online com solução EDTA 0,01 M (pH = 3);

Substâncias fortes de retenção podem ser tentadas com lavagem inversa em solventes misturados de metanol-acetonitril-diclorometano, mas a compatibilidade do enchimento deve ser confirmada.

Aviso contra operações

É proibido lavar diretamente as colunas cromatográficas não seladas com ácidos fortes como ácido clorhídrico / ácido fosfórico;

Evite a limpeza da coluna de preenchimento por vibração ultrasônica, que pode causar o preenchimento solto.

Normalizar o processo de armazenamento e habilitação

Arquivo de curto prazo (1 mês)

Substituir por líquido de conservação acetonitril / metanol (95: 5), inibindo o crescimento microbiano; Armazenamento em suspensão vertical para evitar a deposição desigual do preenchimento.

Reiniciar a etapa de ativação

Depois de descartar os resíduos frontais, equilibre a fase de fluxo inicial por 2 horas antes de submeter a amostra para verificar a recuperação do efeito da coluna. Se houver uma anormalidade no fator de atraso, o processo de regeneração deve ser repetido.

A vida útil da coluna cromatográfica pode ser prolongada através da criação de procedimentos operacionais padronizados (SOP) e avaliações regulares da eficácia da coluna, como o teste de número de placas teóricas USP. Quando o número de painéis teóricos cair para abaixo de 70% do valor inicial, os pilares antigos devem ser eliminados oportunamente para evitar afetar a confiabilidade dos dados. Os investimentos científicos em manutenção podem reduzir significativamente os custos de análise única e melhorar a eficiência geral do laboratório.