Compartilhei com vocês há algum tempo.O PCRControle do processo da reaçãoVamos falar hoje.O PCRmétodos operacionais. A prática pode ser todaO PCRUm dos aspectos mais fáceis de ignorar, mas essenciais, do processo experimental.

A seguir vamos compartilhar algumas de suas experiências, representando apenas opiniões pessoais.

Primeiro, a configuração do sistema (cada componente separado, não pré-misturado). Calcule os volumes necessários de cada componente antes da configuração e, após a configuração unificada, torne-o em partes. Alguns colegas de aula podem sentir dor de reagentes, modo de configuração de buraco únicoMas para os experimentos, obter resultados eficazes de uma só vez é a maior poupança. Ao configurar o sistema, observe a ordem em que os componentes são adicionados: primeiro adicione ddH₂O,Os restantes componentes são adicionados por volume. Quando drenar, a cabeça de aspiração é inserida na drenação abaixo da superfície do líquido,É estritamente proibido aspirar repetidamente a cabeça da pistola de lubrificação no local após a eliminação do líquido (precursores, enzimas, modelos precisam de especial atenção). A cabeça de aspiração tem uma certa adsorção, depois que o líquido é eliminado, como o componente de lubrificação no local será anti-aspirado de volta à cabeça de aspiração, após três ou cinco vezes de lubrificação pode fazer com que o componente alvo tenha uma perda grave. Se você quiser transferir completamente os componentes dentro da cabeça de aspiração, mude de posição para lubrificar a cabeça de aspiração. A mistura do sistema também precisa ser prestada atenção, pode ser soprada lentamente com o pipete da quantidade adequada5-10Em segundo lugar, também pode ser lentamente misturado para cima e para baixo; Se for necessário misturar com um oscilador turbulento, controle a velocidade600rpmAbaixo, o dano à enzima é maior se a velocidade de rotação é rápida demais, e a diferença de salto da curva do modelo de baixa cópia será mais evidente. O sistema é dividido empCRQuando o tubo de reação, o pipete é mantidoA operação de "chupar uma dúzia de um", não é fácil gerar bolhas.

Mais sobre o ambiente experimental. É comum configurar o sistema de reação na mesa de trabalho ultra-limpa e adicionar modelos no armário de biossegurança. Dentro da mesa ultra-neta, de acordo com a operação de rotina não haverá muitos problemas; O gabinete de biossegurança é uma área de grave poluição por aerossóis. Aerossóis dentro do gabinete de segurança biológica são principalmente provenientes da cabeça de aspiração após amostragem, o gabinete de segurança biológica é dominado pelo vento circular, o modelo residual dentro da cabeça de aspiração é fácil espalhar todo o ambiente interno do gabinete de segurança com o vento circular, por isso cada experimento precisa ser empacotado a tempo para remover o gabinete de segurança. Especialmente se o meio-dia não terminar todo o experimento à tarde e continuar a explosão do fígado, certifique-se de limpar a cabeça da arma descartada no lixo, se ninguém o usar, limpe-a após a irradiação ultravioleta. A limpeza da mesa após o fim do experimento e a eliminação ultravioleta são maneiras básicas, mas precisam ser implementadas no local.

Por fim, compartilhe como a operação de um experimento de poro composto pode melhorar a constrância da curva. Quando se configura um furo de reação composto, o modelo e o sistema de todos os furos de reação podem ser misturados e divididos furo por furo de acordo com a operação do sistema de configuração unificado. Isso pode efetivamente reduzir o risco de salto. Se for baixa ampliação de cópia (O CtValores33Depois do salto da curva), o modelo não é recomendado para o sistema de reação de mistura e repartição, neste momento, o modelo de adição de orifício por orifício é mais seguro (o impacto da distribuição de Poisson é óbvio).

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