-
E-mail
ftfdssale@163.com
-
Telefone
15397032468
-
Endereço
Edifício 4, No. 1-1, Huai Road, Jinxing Industrial Park, Distrito de Yuhang, Hangzhou, província de Zhejiang
Hangzhou Furuijie Technology Co., Ltd
Aplicações de concentradores centrífugos a vácuo no pré-tratamento de cromatografia líquida
Datas:2025-12-19Leia:0
Os concentradores centrífugos desempenham um papel central no pré-tratamento de amostras por cromatografia líquida (LC, especialmente HPLC e LC-MS) como ferramentas para melhorar a sensibilidade analítica e a compatibilidade metodológica.
Efeito de concentração centrífuga
O uso de concentradores centrífugos antes da análise LC é principalmente para resolver os seguintes três problemas-chave:
Aplicações principais
1, enriquecimento de concentração, melhorar a sensibilidade: concentrar o alvo traço em amostras de grande volume em pequenos volumes, para que sua concentração chegue acima do limite de detecção de LC ou LC-MS. Isto éFrequentementever a aplicação.
Substituição de solventes para melhorar a compatibilidade: transferir o alvo de um solvente incompatível com a fase de fluxo LC (por exemplo, fase orgânica de alta concentração, reagente para íons, solvente volátil) para um solvente compatível com a fase de fluxo.
Remoção de interferência, purificação da amostra: através de evaporação leve, remover a substância interferente volátil ou sal tampão da matriz da amostra para reduzir o efeito da matriz e a poluição do instrumento.
Processos e cenários de aplicação
Enriquecimento concentrado para amostras de baixa concentração
Análise de amostras de água ambiental: 1 litro de resíduos de pesticidas, antibióticos, etc., após a extração de fase sólida, o volume de líquido de lavagem ainda pode ser de 5-10mL. A concentração é aumentada de 10 a 20 vezes por centrifugação para ser detectada por LC-MS.
Análise de amostras biológicas: concentrações extremamente baixas de metabólitos de medicamentos no plasma e na urina. Depois da precipitação de proteínas ou extração líquida, o volume da fase orgânica é maior e precisa ser concentrado em um volume seco ou pequeno, e então dissolvido na amostra.
Triagem de produtos naturais: o volume do material bruto vegetal é grande e a concentração do ingrediente ativo alvo é baixa. A análise do mapa de impressão digital LC pode ser realizada após a concentração.
Substituição de solventes para solventes incompatíveis
Após um pré-tratamento complexo, o ambiente solvente da amostra pode não ser adequado para amostragem direta:
Amostras após cromatografia de pares iónicos: Se a análise posterior é feita por LC-MS, os reagentes de pares iónicos (como TFA, ácido septofluorbutico) devem ser removidos, caso contrário, o sinal de ionização será severamente inibido. O método é: secar a amostra e, em seguida, dissolver com um solvente adequado para MS. A amostra após a extração de fase ortogonal: a solução de lavagem coletada é um solvente não polar, como o hexano ortogonal e o cloroformo, que não é solúvel com o fluxo de LC de fase inversa. Depois de secar com sopro, dissolva com metanol / acetonitril / água. Amostras de alta fase orgânica: a depuração extraída em fase sólida é muitas vezes alta proporção de nitril acetico ou metanol. Se a análise de compostos de retenção fraca for necessária, a amostragem direta pode levar a uma forma de pico ruim. Depois de secar parcialmente, dissolva-se com o fluxo inicial.
Pontos operacionais e estratégias de otimização (para LC)
Configuração da temperatura
Princípio: ser o mais eficiente possível, garantindo a estabilidade do alvo.
Solvente orgânico volátil: como acetonitril, metanol, acetona, temperatura ambiente ou 30-40 ° C, ponto de ebulição a vácuo é muito baixo. Solução em água: Temperaturas mais elevadas, 45-60 ° C, são necessárias para fornecer energia de evaporação suficiente. Substâncias sensíveis ao calor: tais como proteínas, péptidos, certos antibióticos, devem ser usados a baixa temperatura de ≤ 35 ° C, mesmo que apenas a concentração a vácuo.Julgamento final e prevenção de "excesso de seco"
Indicações para aplicação LC-MS: Secar excessivamente a amostra. Alguns objetos alvo (especialmente certos compostos polares ou proteínas) são irreversivelmente absorvidos na parede do tubo após secagem, resultando em uma taxa extremamente baixa de recuperação de resólvida.
Prática: Pare imediatamente quando a concentração estiver seca ou quando restar uma pequena quantidade de filme líquido. Para pessoas com menos experiência, a verificação cronometrada pode ser configurada ou os pontos finais podem ser julgados automaticamente usando modelos com sensores ópticos.
Técnicas de dissolução
Escolha do solvente: o solvente complexo deve estar o mais próximo possível da composição inicial da fase de fluxo do LC. Por exemplo, se o seu método LC começar com 5% de acetonitril / 95% de água, então é melhor resolvê-lo com uma solução de acetonitril aquosa de 5% do que com acetonitril puro para evitar distorções de pico causadas pelo efeito do solvente.
Operação: após a adição de um solvente múltiplo, é necessário oscilar em um vortex e dissolver por ultra-som por alguns minutos para garantir que o alvo se dissolva sem perda na parede do tubo.
Prevenção de poluição cruzada e resíduos
Após a concentração de amostras de alta concentração, as armadilhas frias e as cavidades podem ter resíduos. Limpe regularmente o compartimento de amostras e a armadilha fria.
Para amostras em lotes diferentes, especialmente com grandes diferenças de concentração, é recomendado operar separadamente ou usar rotores independentes.
Na análise cromatográfica líquida, o concentrador centrífugo não é um equipamento indispensável. É uma ponte essencial entre a amostra grosseira e a solução de amostragem. Através da concentração precisa e da substituição do solvente, ele pode transformar "não medido" em "medido" e "não pode ser mostrado diretamente" em "compatível".
