I. Especificações de operação diária

Preparação e inspeção de reagentes

Certifique-se de que as garrafas de reagentes (por exemplo, acetonitril, ativantes, oxidantes) são bem seladas, mantendo a pressão do argão estável e evitando a entrada de ar externo que afete o efeito da síntese.

Verifique o margem de reagente antes da síntese, substitua a garrafa vazia oportunamente para evitar a interrupção da síntese devido à falta de reagentes.

Configurações de entrada de sequência e parâmetros

Introduza a sequência de DNA alvo através de um software de design assistido por computador, considerando a preferência de códigons, a estrutura secundária e os locais enzimáticos restritos.

Verifique se as etapas de síntese (por exemplo, desproteção, acoplamento, fechamento, oxidação) estão corretas e escolha o método final (por exemplo, TritylOnAuto mantém o grupo 5'-DMT para purificação posterior).

Monitoramento do processo de síntese

Execute a etapa StartColumn antes de iniciar e verifique se a coluna de síntese está localizada corretamente.

A quantidade de liberação de catiões DMT é monitorada pela piscina de fluxo condutor durante a síntese para determinar o progresso da reação.

Verifique regularmente se a temperatura, a pressão e outros parâmetros estão dentro da faixa normal.

Tratamento do produto

Após a conclusão da síntese, o produto é cortado do veículo de fase sólida para remover os fragmentos curtos e íons salinos com purificação OPC, PAGE ou HPLC.

Depois da purificação, o produto é mantido em partes para evitar o congelamento repetido.

Pontos de manutenção diária

Anel em forma de garrafa "O"

Verifique uma vez por mês e substitua pelo menos uma vez por ano. Se houver precipitação branca, limpe com uma barra de algodão acetonitril.

Pegue o anel antigo com uma pinça antihemorrágica durante a substituição, certifique-se de que o novo anel é instalado após a inserção sem partículas e faça um teste de pressão.

Garrafas e Tubos de Armazenamento

Mantenha a garrafa limpa e verifique regularmente a pressão do argão e a densidade do tubo.

Limpe a tubulação com um novo reagente antes da síntese para evitar que resíduos de reagentes antigos interferam com a reação.

Válvula de redução de fluxo

Limpe uma vez por mês, primeiro fervendo na água por 15 minutos e depois com ultra-som de metanol para evitar obstruções.

Limpeza de instrumentos e à prova de poeira

Limpe a carcaça com um pano úmido semanalmente, evitando as aberturas de ventilação; Após o experimento de alta sensibilidade, esterilize o compartimento de reação com luz ultravioleta durante 15 minutos.

Quando não é usado por muito tempo, ligue 1-2 vezes por semana, cada vez por cerca de meia hora, para evitar que a peça se molhe.

Resolução de problemas comuns

Baixa produtividade sintética

Causas: falha do reagente, vazamento de tubulação, desvio de posição da coluna sintética.

Solução: substituir o reagente, verificar a densidade do tubo e recalibrar a posição da coluna sintética.

Pureza insuficiente do produto

Causa: método de purificação inadequado, passos de síntese errados.

Solução: otimize as condições de purificação (por exemplo, aumentando as etapas de purificação HPLC) e verifique se os parâmetros de síntese estão corretos.

Alarme ou interrupção do instrumento

Causa: garrafas de resíduos cheias demais, flutuações de energia, temperatura anormal.

Solução: Esvazie a garrafa de resíduos, use uma fonte de alimentação reguladora para verificar se o sensor de temperatura está falhado.

Anomalias nos dados (por exemplo, flutuações nos valores de condutividade elétrica)

Causa: Poluição da piscina condutora, impurezas misturadas com reagentes.

Solução: Limpe o tanque condutor, substitua o novo reagente e recalibre.

IV. Precauções operacionais

Ambiente estéril: a síntese do precursor é sensível à poluição e é necessário usar luvas durante a operação para evitar a poluição de DNA ou enzimas externas.

Conservação do reagente: os solventes como o acetonitril devem ser mantidos à luz, e os ativantes e oxidantes devem ser selados para evitar a umidade.

Registro de dados: registro detalhado da sequência de síntese de cada lote, número de lote de reagente, mapa de inspeção de qualidade para facilitar o rastreamento de problemas.