Os modelos orgânicos estão se tornando cada vez mais populares em pesquisa biológica e triagem devido à sua capacidade de reproduzir a complexidade de tecidos reais. Para simular órgãos pulmonares humanos no corpo, cultivamos células epiteliais pulmonares humanas primitivas em condições que contribuíram para a formação de estruturas 3D, reproduzindo as características morfológicas e funcionais das vias respiratórias pulmonares. Em culturas de órgãos pulmonares, células estaminais epiteliais e células progenitoras são cultivadas em ECM com a adição de uma série de fatores de crescimento. Os organoides posteriormente cresceram em estruturas complexas que mantiveram múltiplos agrupamentos de células epiteliais. Essas propriedades tornam a cultura orgânica um meio promissor que pode ser amplamente utilizado em métodos fundamentais e transformativos, como triagem de medicamentos e modelagem de doenças.
Aqui descrevemos um método de imagem de alto conteúdo para monitorar e visualizar o crescimento e diferenciação de órgãos pulmonares, reconstrução de estruturas 3D, análise complexa de estruturas orgânicas, morfologia e vitalidade celular e expressão de diferentes marcadores celulares. Órgãos pulmonares 3D implantados em Matrigel domes. Os organoides em desenvolvimento incluem objetos esféricos com formas complexas, incluindo cavidades e estruturas da bexiga. Ao longo de oito semanas de crescimento, observamos um aumento no tamanho e na complexidade. Monitore os organoides com luz transmissível e, em seguida, digitalize a imagem de organoides manchados através de gel de matriz com um múltiplo de objetivo de 10 a 40x com o eixo Z de 20 a 30 camadas. Use ImageXpress ® Confocal HT.ai com alto foco inteligente
A nova fonte de luz laser do sistema de análise de imagem aumenta significativamente a intensidade da iluminação, aumentando significativamente o brilho, a sensibilidade de detecção e a velocidade de imagem.