Desde o estudo de doenças até a avaliação de respostas tóxicas induzidas por medicamentos e compostos ambientais, a determinação baseada em células geralmente se concentra nas mitocondrias e visa monitorar a saúde celular. A função mitocondrial é um indicador-chave da saúde celular como um todo, e a disfunção mitocondrial está estreitamente relacionada com várias doenças (incluindo doença de Parkinson, doença de Alzheimer, insuficiência cardíaca, doença isquémica local e câncer). Além disso, o mecanismo de patologia de doenças raras pode ser impulsionado por genes que codificam proteínas mitocondriais ou mutações no DNA mitocondrial. A avaliação da função mitocondrial é fundamental durante todo o desenvolvimento e teste de medicamentos. O desenvolvimento de terapias para restaurar a função mitocondrial e o desenvolvimento de medicamentos quimioterapêuticos que visam a disfunção mitocondrial do câncer são exemplos. Além disso, a avaliação da função mitocondrial é um passo crucial na avaliação pré-clínica da segurança do medicamento, uma vez que a disfunção mitocondrial pode ser desencadeada pelo medicamento e, por sua vez, afetar negativamente a saúde das células e tecidos. A medição do potencial da membrana mitocondrial (MMP) para monitorar mudanças na atividade metabólica mitocondrial é um método sensível e eficaz para avaliar a função mitocondrial. O potencial da membrana mitocondrial é uma ferramenta importante para detectar a despolarização mitocondrial durante a apoptose, detectar células resistentes a múltiplos medicamentos e avaliar a função mitocondrial em uma variedade de triagens de toxicidade. A avaliação de 1-2 MMP é geralmente realizada usando corantes fluorescentes catiônicos lipófilos. Dependendo do estado do potencial da membrana mitocondrial, a fluorescência do corante de potencial da membrana MITO-ID varia. Especificamente, está presente na citoplasma como um monómero, emitindo fluorescência verde (FITC, 530 nM); Em mitocondrias ativas, ela se agrupa na matriz mitocondrial para emitir fluorescência laranja (TRITC, 570 nM). Quando o MMP é destruído, o corante MITO-ID se retira para polarizar a mitocondria, enquanto está presente na forma monomérica, a fluorescência laranja pode ser observada diminuindo para desaparecer.