Método Experimental de Escurecimento de Rato
Preparação experimental
Familiarização com o ambiente: os dois primeiros ratos anjos do experimento estão familiarizados com o ambiente de laboratório, alimentação livre e ingestão de água.
Projeto de grupos: projetado em grupos aleatórios hierárquicos para que os grupos de animais sejam semelhantes em proporções médias de peso corporal e sexo. Os ratos experimentais foram divididos em 3 grupos de adaptação única ao choque elétrico (MOS), adaptação única ao treinamento em tempo limitado (MOL) e treinamento múltiplo à adaptação em tempo limitado (MUL), cada grupo dividido em dois subgrupos de controle (C) e modelo (M) de acordo com a administração, para um total de 6 grupos (n = 9 por grupo).
Configuração do instrumento: o evasor de escuridão é dividido em duas câmaras claras e escuras, com um buraco redondo de diâmetro de 3 cm e uma grade de cobre na parte inferior de ambas as câmaras. A grade de cobre inferior da câmara escura pode ser alimentada, a tensão é ajustada pelo botão, geralmente 40V, 50Hz.
Métodos de treinamento
Método MOS: O treinamento é concluído em um dia, primeiro coloque o rato no protetor de escuridão para se adaptar ao ambiente por 3min, durante o treinamento, coloque o rato de costas para o buraco em uma sala clara, que entra na sala escura por choque elétrico.
Método MOL: o treinamento é concluído em um dia, os ratos se adaptam ao ambiente em 3min, treinamento em 3min.
Método MUL: colocar o rato no protetor de escuridão ao mesmo tempo durante 3 dias consecutivos para se adaptar por 3 minutos, começar o treinamento após a conclusão da adaptação no terceiro dia e retirar após 3 minutos. Os ratos que se adaptam ao ambiente e treinam circulam livremente entre a câmara clara e a câmara escura e são descartados quando entram no período de incubação superior a 3 minutos.
Método de teste
Indicadores de registro: O rato foi colocado novamente na câmara clara 24 horas após a conclusão do treinamento para registrar o tempo necessário para sua primeira entrada na câmara escura, ou seja, o período de incubação (STL) e o número de entradas na câmara escura dentro de 5 minutos, ou seja, o número de erros (ETs). Se os camundongos não entrarem na sala escura dentro de 5 minutos, o STL é notado como 300s e o ET como 0.
Precauções
Ambiente experimental
Limpeza ambiental: antes e depois do experimento, preste atenção à limpeza dos excrementos de animais da cerca, os excrementos afetarão a transmissibilidade elétrica. Limpar e secar com álcool para remover o cheiro do último animal, o equipamento deve ter um sistema de ventilação.
Redução de interferência: todos os procedimentos experimentais devem ser mantidos consistentes durante o experimento, como bloqueio de ruído, redução da estimulação do odor, regulação da luz, etc., o ambiente experimental deve ser silencioso, escuro e tentar pegar os animais de forma leve e reduzir a estimulação dos animais. Seja gentil ao fechar a porta no meio das caixas e não faça excesso de ruído externo que afete o comportamento dos animais.
Operação experimental
Adaptação animal: 3-7 dias antes do início do experimento, agarrar e acariciar os animais todos os dias, para que eles se adaptem à captura do experimentador, para evitar que o animal esteja em um estado de estresse durante o processo experimental devido à captura do experimentador, causando problemas com os resultados do experimento não confiáveis.
Parâmetros de choque elétrico: corrente de ratos de 0,65-1,8mA (recomendado 0,8mA), ou tensão de 65-70V; corrente de ratos de 0,15-0,6mA (recomendado 0,25mA), ou tensão de 30-36V, frequência de corrente de 5-15Hz.
Manutenção do equipamento: a grade de cobre na parte inferior do instrumento experimental é facilmente enferrujada, o que leva ao aumento da resistência, antes de cada experimento, deve ser polido com papel liso.