Células-tronco metabólicas do cordão umbilical(hUC-MSCs) são células-tronco extraídas do cordão umbilical de um recém-nascido com capacidade de diferenciação multipotencial. As células-tronco mesoclimais de origem do cordão umbilical não apenas mantêm as propriedades biológicas das células-tronco mesoclimais (marcadores de antígeno de superfície, com a capacidade de se diferenciar em ossóforos, cartilagos e células de gordura, etc.), mas também são mais seguras, mais primitivas e têm maior capacidade de proliferação, diferenciação e imunomodulação das células em comparação com outras fontes.
Além disso, as células-tronco de alta qualidade do cordão umbilical também têm as características de fácil separação, baixa imunogenicidade, sem restrições éticas, grande número de células disponíveis e produção padronizada em massa, com amplas perspectivas de aplicação clínica. Este produto passa por um rigoroso controle de qualidade e testes para garantir sua segurança e eficácia.
(1) Quando a densidade celular chega a 80% -90% pode ser transmitida (note que as células não podem ser muito densas, caso contrário são facilmente diferenciadas), descartar a cultura e limpar as células com DPBS sem íons de cálcio e magnésio 1-2 vezes;
(2) Adicione 1 mL de pansina recombinante em uma garrafa de cultura para que o líquido digestivo penetre todas as células, coloque-o em uma caixa de cultura de 37 ° C para digerir 1-3 min e observe-o sob um microscópio até que a maioria das células se arredonde e caia (dependendo da situação celular).
(3) adicionar e carregar em um tubo de centrifugação estéril, 1000rpm centrifugar 5min, descartar 3ml de meio de cultura MSC para terminar a digestão. Bata suavemente para o líquido, adicionando 1-2ml de meio de cultura MSC e soprando bem.
(4) Transferir em uma proporção de 1: 3 ou 1: 4, ou depois da contagem celular, vacinar em uma nova garrafa em concentração de 5-8 x 103 células / cm2, depois de complementar o volume correspondente do meio de cultura MSC, colocado em uma caixa de cultura de 5% de CO2 a 37 ° C.
(5) Mude o líquido a cada 2-3 dias, cultive até 2-4 dias até que a densidade de crescimento celular chegue a cerca de 80%, para a transmissão subsequente ou operação de congelamento.
Tempo de digestão: a digestão pancreatica deve ser controlada em cerca de 1 minuto para evitar que a digestão excessiva cause danos celulares.
Densidade de vacinação: transmitir em proporção de 1: 3 a 1: 4 na área inferior para evitar densidade excessiva ou diluição excessiva.
Selecção geracional: recomenda-se o uso de subcélulas de baixa geração (por exemplo, geração P2) para garantir resultados experimentais.
Mídios especializados: o uso de meios especializados contendo fatores de crescimento para promover a proliferação e diferenciação celular.