A limpeza das colunas de extração de fase sólida é um elemento fundamental para garantir a precisão dos experimentos e prolongar a vida útil dos materiais de consumo. Os seguintes sistemas descrevem o processo de limpeza profissional em quatro áreas: pré-tratamento, limpeza profunda, tratamento de materiais especiais e manutenção de armazenamento:

Processo básico de limpeza

1. Método de lavagem positiva

- Lógica de seleção de solventes: siga o princípio de gradiente polar "alto → médio → baixo". O agente de lavagem forte (metanol / acetonitril) elimina os resíduos obstinados e, em seguida, muda para um solvente polar médio (diclorometano / éster de acetato etílico) para remover o produto intermediário, eliminando as impurezas solúveis em água com água pura. A dose de cada solvente é recomendada para atingir 5 a 10 vezes o volume da coluna para garantir a penetração completa.

- Pontos principais de controle da velocidade de fluxo: Adote o modo lento de baixa pressão (≤2mL / min), para evitar lavagens fortes que levem a mudanças na densidade do preenchimento. A velocidade de controle precisa pode ser alcançada com uma bomba de fluxo constante, observando que o fluxo de saída é esclarecido pela turbidez como um sinal de alcance do padrão.

Estratégia de impacto inverso: para colunas cromatográficas com obstrução evidente, conecte-as inversamente ao dispositivo de extração de fase sólida para fornecer um fluxo de ar pulsado (0,4 MPa) usando um cilindro de nitrogênio de alta pressão. Este efeito mecânico elimina eficazmente os sedimentos gelatinosos ligados à superfície da tela e, em seguida, realiza imediatamente uma lavagem positiva para evitar a deposição secundária.

Programas direcionados de eliminação de poluentes

Resíduos de amostras biológicas: a precipitação de degeneração da proteína pode ser usada por um punho combinado de tampão de fosfato de pH = 7,4 + 0,1% Tween-20, o primeiro mantém o ponto isoelétrico para impedir a deformação dramática da configuração da proteína, o último desintegra a camada adesiva reduzindo a tensão superficial. Se necessário, introduzir a protease K para digestão durante a noite.

Invasão de misturas lipídicas: ativa o sistema sinergético acetona-ortohexano (1: 1), o primeiro dissolve a camada bimolecular de fosfolípidos e o último destrói o domínio cristalino do colesterol. O efeito de lavagem circular é melhor em condições de banho de água de 60 ℃.

Tecnologia de reciclagem de embalagens especiais

Resuscitação de coluna de troca iônica: quando a resina catiônica sofre poluição por quelatos metálicos, injete solução de HCl de 3 mol / L (liberando o estado de ligação Ca² + / Mg² +), água deionizada até neutral e, finalmente, use tampão Tris contendo 0,1 mol / LEDTA (pH = 8,0). A coluna de íons deve ser substituída por NaOH em vez de HCl para uma operação semelhante.

Conservação de meios compostos de grafeno: este novo tipo de adsorente é estritamente proibido de ultra-som! É recomendado o uso de lavagem contínua de baixa potência etanol-água (7:3), complementada por agitador magnético de baixa velocidade (<200 rpm). Depois de secar ao ar natural, é selado a vácuo para evitar a degradação oxidativa.

Verificação de desempenho e controle de qualidade

Verificação da curva padrão: solução padrão para a formulação de concentrações de série (abrangendo o limite inferior ao limite superior da faixa linear), após o tratamento de colunas limpas para determinar a taxa de recuperação. Se a taxa de recuperação do alvo cair entre 85% e 115% e o RSD for inferior a 5%, o processo de limpeza é confiável.

Experimento de controle em vazio: colunas vazias são extraídas aleatoriamente para operações de simulação de processo completo, e a detecção GC-MS / HPLC não deve detectar os compostos emblemáticos usados ​​anteriormente. Preste especial atenção aos vestígios residuais de voláteis difíceis.