Esta apresentação da aplicação descreve a desalinização e caracterização de anticorpos monoclonais (mAb) usando colunas de desalinização em segunda dimensão e usando configurações 2D-LC/MS. Na separação dimensional, troca iónica (IEX) e cromatografia de afinidade (principalmente em condições de lavagem baseadas em sal) foram usados. Na segunda dimensão, a desalinização do destilado com coluna inversa de desalinização Agilent AdvanceBio foi realizada antes da análise espectrôlica de massa. Os resultados mostram que as pequenas colunas de desalinização têm um excelente desempenho para fornecer dados de espectro de massa de alta qualidade.

Os medicamentos terapêuticos com anticorpos monoclonais (mAb) são um campo em constante evolução na indústria farmacêutica. As propriedades dessas moléculas são complexas e sofrem alterações enzimáticas ou químicas durante o desenvolvimento e ao longo do ciclo de vida. Essas modificações podem causar heterogeneidades, incluindo fissão, modificação pós-tradução (PTM), degradação, agrupamento e variações de sequência. Portanto, é necessário garantir a segurança, a qualidade e a eficácia dos produtos através de uma caracterização física e química abrangente. A combinação de cromatografia líquida multidimensional (2D-LC) e espectroscopia de massa (MS) é uma boa técnica analítica para caracterizar diferentes isômeros de mAb. Tecnologias como afinidade, troca iónica (IEX) e cromatografia de bloqueio de volume (SEC) são frequentemente usadas para separação dimensional. A fase de fluxo típica utilizada nestas técnicas de cromatografia líquida é aquática e contém sales não voláteis incompatíveis com a espectroscopia de massa. Para identificar esses picos cromatográficos que foram separados por espectroscopia de massa, o método de desalinização on-line foi usado na segunda dimensão.

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