Resumo

Este artigo examinou o conjugado anticorpo-droga ligado à cisteína (ADC) para separar as cadeias leves, pesadas e ligadas correspondentes de drogas reduzidas pelo sistema de cromatografia líquida Agilent 1290 Infinity II ligado a colunas de cromatografia líquida de fase inversa PLRP-S e identificar os picos cromatográficos individuais através do sistema de ligação líquida de tempo de voo quadrupolar (Q-TOF) de alta resolução Agilent 6530. Calcule a média ponderada da relação droga/anticorpo (DAR) do ADC, combinando o número de drogas acopladas em cada pico, processando integralmente as porcentagens da área de pico de cada cadeia leve e pesada no mapa de absorção UV. O cálculo do valor DAR dos resultados da convolução da espectrologia de massa foi realizado com a Agilent DAR Calculator, com os mesmos resultados do cálculo do mapa de absorção UV

Introdução O ibutuximab é um conjugado anticorpo-droga ligado à cisteína (ADC), que converte o ligamento disulfo intercadenário em resíduos de cisteína livres através da redução parcial, que se ligam à droga de pequenas moléculas para formar uma mistura de 0-8 anticorpos farmacêuticos, como mostrado na Figura 1 [1]. A relação fármaco/anticorpo (Drug to Antibody Ratio, DAR), que é a média do número de fármacos ligados a anticorpos, pode afetar significativamente o efeito do ADC e é um atributo-chave para medir a qualidade do ADC. Baixos valores de DAR podem levar a uma redução da eficácia, enquanto valores mais altos de DAR podem afetar a segurança do ADC, por isso é essencial para a detecção de DAR do ADC. Este artigo foi estudado com ibutuximab, usando cromatografia líquida de fase inversa e o sistema de associação de espectroscopia de massa de tempo de voo quadrupolar para a separação cromatográfica de vários componentes do ADC reduzido, detecção de detectores de matriz de diodos e espectroscopia de massa, e o cálculo do DAR do ADC por meio dos resultados do mapa de absorção ultravioleta e dos resultados da deconvolção da espectroscopia de massa, respectivamente.

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