Os diferentes tipos de células têm requisitos diferentes para as condições de cultura, portanto, é necessário escolher o tubo de cultura celular 87050 adequado. Por exemplo, as células adesivas precisam escolher uma boa respirabilidade, enquanto as células em suspensão podem escolher uma melhor vedação; As diferentes necessidades experimentais têm requisitos diferentes para suas especificações, materiais, tipos de tampas, etc. Portanto, é necessário levar em consideração as necessidades experimentais na escolha.
As etapas de determinação do tubo de cultura celular 87050 incluem principalmente os seguintes aspectos:
1. Fase de preparação
Escolha o tubo de cultura adequado: escolha o tamanho e o tipo de tubo de cultura celular adequado de acordo com as necessidades experimentais, como tubos centrífugos comuns, garrafas de cultura celular, etc.
- Limpeza e esterilização: assegure que o tubo de cultivo seja limpo e livre de poluição, pode ser sterilizado a alta temperatura e alta pressão ou sterilizado a calor seco.
Preparação de reagentes: incluindo o meio de cultura celular (que precisa ser pré-aquecido até a temperatura apropriada, geralmente selecionado para pré-aquecer parte do meio de cultura para economizar tempo e evitar a degradação das proteínas), panenzimas (para digerir as células), soros (fornecer nutrientes necessários para o crescimento celular), etc.
2. Vacinação de células
Contagem de células: se for necessário controlar com precisão a quantidade de vacinação celular, a contagem de células deve ser realizada primeiro, usando uma placa de contagem de células ou um contador automático de células para determinar a densidade da suspensão celular.
Vacinação de células: transferir uma quantidade moderada de suspensão celular para o tubo de cultura e agitar suavemente para que as células sejam distribuídas uniformemente.
3. Processo de formação
Coloque o tubo de cultura das células boas vacinadas no recipiente de cultura celular, definindo a temperatura apropriada (geralmente 37 ° C), a umidade (geralmente 40-60) e a concentração de CO (geralmente 5).
Observação regular: observar regularmente o estado de crescimento celular todos os dias, incluindo a morfologia celular, a situação de adesão à parede, se há poluição, etc. Um exame mais detalhado pode ser realizado a olho nu ou usando um microscópio.
Tratamento e coleta de células
- Troca de líquido: substituir regularmente o meio fresco de acordo com o crescimento celular e as necessidades experimentais para fornecer nutrientes suficientes e remover metabólicos e células mortas.
Transição: Quando as células crescem até uma certa densidade (geralmente 70-80 graus de fusão), a transmissão é necessária. Use a pansina para digerir as células, deixá-las cair do fundo do tubo de cultura e, em seguida, adicionar um meio fresco para terminar a digestão e soprar em uma suspensão de célula única depois de dividir em um novo tubo para continuar a cultura.
- Coleta de células: para análises ou experimentos adicionais das células, você pode usar uma centrífuga para precipitar as células e descartar o líquido superior para recolher o precipitado celular.