O núcleo de manutenção do tanque de fermentação de células de plantas e animais éLimpeza e esterilização, manutenção de componentes, calibração de parâmetrosÉ necessário combinar a especificidade da cultura celular (sem parede celular, sensível à força de corte, fácil de poluir), o processo de manutenção específico e os pontos principais são os seguintes:
Esvaziamento residual e lavagem inicial
Após a fermentação, esvazie primeiro o líquido residual, o meio de cultura e os resíduos celulares do tanque,Água deionizada ou purificadaLave repetidamente a parede interna do tanque, a paleta de agitação, a barra, a abertura de amostragem e outras partes para remover os resíduos visíveis a olho nu.
Para os tanques de fermentação elevados a gás dedicados a células animais (sem paleta de agitação e baixa força de corte), é necessário lavar os microporos do distribuidor de gás e líquido para evitar obstruções.
Limpeza química para remover manchas persistentes
Preparação para resíduos difíceis de solução, como proteínas e poliaçúcaresLimpador alcalino(por exemplo, solução de NaOH de 0,5%-1%), injete no recipiente até mergulhar em todos os pontos de contacto,Limpeza cíclica 30-60minSe houver mais resíduos, pode ser aquecido adequadamente a 40-50 ° C (para evitar danos à vedação por alta temperatura).
Se houver precipitação de cálcio ou magnésio ou resíduos de substâncias inorgânicas, use primeiroLimpador ácido(por exemplo, ácido nítrico diluído de 0,1%-0,5%) é lavado de forma circular por 20-30 min, depois lavado até neutro (pH 6,5-7,5) com uma grande quantidade de água purificada para evitar que os resíduos ácidos e alcalinos danifiquem as células.
Nota: Tanques de fermentação de células de plantas e animaisTubo de silicone, almofada de vedação de borrachaOutros componentes, não podem entrar em contato com ácidos fortes e álcalis fortes por um longo período de tempo, após a limpeza, devem ser removidos prontamente e tratados separadamente.
Esterilização, eliminação da proliferação gerótica
Sterilização no local (SIP)A esterilização a vapor a alta temperatura é preferida, os parâmetros são121 ℃, 0,1 MPa, 20-30 minutosCobre todos os componentes que entram em contato com o meio de cultivo, como tanques, tubulações, válvulas e sondas de sensores; Para componentes que não são resistentes a altas temperaturas (por exemplo, eletrodos de pH, eletrodos de oxigênio dissolvido), é necessário desmontar75% imersão em etanol ou exposição UVEsterilização.
Tratamento pós-esterilizaçãoApós a terminação da esterilização, mantenha o tanque seco para evitar que a água condensada reproduza gerígenas; Se não for usado por muito tempo, pode entrar no tanque de secagem com ar estéril.
Manutenção de vedações e conexões
Tanques de fermentaçãoAnéis de vedação da tampa do tanque, juntas de silicone para tubos, almofadas de vedação da válvulaÉ uma peça desgastável, que precisa ser verificada uma vez por mês, se houver envelhecimento, deformação, rachadura, substituída imediatamente para evitar vazamentos de gás e poluição.
Seleção recomendada de vedação para tanques de fermentação de células animaisSilicone ou borracha fluorada de qualidade médicaDesinfecte regularmente com álcool médico para evitar que o material dissolvido afete o crescimento celular.
Manutenção do sistema de agitação e ventilação
Tanque de fermentação mecânico: verificar trimestralmente os rolamentos e motores de redução da paleta de agitação, adicionando lubrificante especial; Verifique se a conexão da paleta de agitação com o eixo está solta para evitar que a força de corte danifique as células durante a operação.
Sistema de ventilaçãoDeslavar o filtro de ar regularmente (o material do filtro é principalmente tetrafluoroetileno ou celulose), se o filtro for bloqueado ou esterilizado demais vezes, substitua-o oportunamente; Os microporos da cabeça de ventilação do tanque de fermentação elevado a gás devem ser limpos por ultra-som para garantir a ventilação uniforme.
Calibração de sensores e medidores
Elétrodo de pH, Elétrodo de oxigênio dissolvidoCalibração mensal: o eletrodo de pH é calibrado com tampão padrão (pH 4,0, 7,0, 10,0) e o eletrodo de oxigênio dissolvido é calibrado com solução saturada de sulfato de sódio (ponto zero de oxigênio) e ar (ponto 100% de oxigênio dissolvido); É necessário mergulhar com líquido protetor antes e depois do uso para evitar que o eletrodo seco falhe.
Sensores de temperatura, sensores de pressãoCalibrar uma vez por trimestre para garantir que a precisão do controle de temperatura esteja dentro de ± 0,5 ° C e a exibição de pressão seja precisa.
Se o tanque estiver desativado por muito tempo (mais de um mês), deve ser concluído.Limpeza - Esterilização - SecaçãoProcesso:
Peças metálicas como paredes internas do tanque, palhas de agitação e outras, aplique uma camadaÓleo anti-ferrugem de qualidade alimentarpara prevenir a ferrugem;
Após a limpeza e esterilização de componentes removíveis (como eletrodos, aneis de vedação, filtros), a vedação é armazenada em um ambiente seco e livre de poeira.
Desmantele a fonte de energia e gás do tanque de fermento, feche todas as válvulas e proteja a cobertura contra poeira; Funcionar regularmente (mensalmente) de 10 a 15 minutos para verificar se o motor e o sistema de controle estão funcionando corretamente.
Necessidades de manutenção de tanques de fermentação de células de plantas e animaisDistinção de materiaisTanques de vidro para evitar colisões e mudanças abruptas de temperatura; Os tanques de aço inoxidável não podem ser lavados com esferas de fio de aço para evitar que os arranhões na parede interna produzam gerígenas.
Evitar durante a limpeza e esterilizaçãoReagentes corrosivosSensores de contato e componentes elétricos; Os tanques de fermentação de células animais são estritamente proibidos de usar desinfetantes contendo cloro para evitar que os resíduos de cloro envenenam as células.
Crie um registro de manutenção que registre o tempo de cada limpeza, esterilização, substituição de peças e calibração para fácil rastreamento.