O fluxo de trabalho é o seguinte:

Foco a laser: um feixe de laser monocromático é focado no plano focal específico da amostra, estimulando a sonda fluorescente a produzir fluorescência.

Triagem do buraco de agulha: Somente o sinal fluorescente no plano focal pode passar pelo buraco de agulha na frente do detector, e a luz dispersa do plano não focal é bloqueada pelo buraco de agulha para obter um maior contraste de imagem.

Imagem de varredura: o raio laser varredura todo o plano focal ponto a ponto, linha a linha, o computador coleta sinais e reconstrui imagens bidimensionais. Ao mover a amostra ao longo do eixo Z, obtém uma série de fatias de diferentes profundidades e, em seguida, reconstrui uma imagem tridimensional estéreo da amostra.

Microscópio co-focal a laserCaracterísticas principais:

Alta resolução e contraste: elimina eficazmente a interferência no plano não focal, a resolução horizontal pode chegar a cerca de 120-200 nm e a qualidade de imagem é muito superior ao microscópio fluorescente de campo amplo convencional.

Imagem estéreo tridimensional: a amostra pode ser “cortada ópticamente” sem cortes físicos e a estrutura tridimensional pode ser reconstruída por meio de software para mostrar claramente a forma espacial da amostra.

Imagem de fluorescência multicolorida: pode ser equipado com lasers de vários comprimentos de onda enquanto excita diferentes sondas de fluorescência na amostra para distinguir diferentes estruturas alvo na mesma imagem.

Observação dinâmica de células vivas: danos na amostra são pequenos e podem acompanhar os processos fisiológicos dinâmicos dentro das células vivas em tempo real por longo tempo em ambientes como temperatura e umidade.

Forte capacidade analítica: o software de suporte oferece uma ampla gama de processamento de dados como melhoria de imagem, contagem de células, quantificação de intensidade de fluorescência e análise de co-localização.