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Shanghai Siyi Biochemical Technology Co., Ltd
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Conselhos e Guia de Resolução de Problemas para a Operação do Cromatográfico Liquido da Agilent
Datas:2025-09-22Leia:0

I. Habilidades operacionais

Inicialização e inicialização
Alimentação e auto-inspeção: abra o computador e os módulos de alimentação do cromatográfico, em seguida, e aguarde a conclusão da auto-inspeção do sistema. Para usar software como o LabSolutions, clique duas vezes no ícone para entrar no sistema e conectar o dispositivo.
Tratamento de bolhas de escape: operação de escape no módulo de bomba de quatro elementos para garantir o fluxo sem bolhas. Se o instrumento tiver função de enchimento de garrafas, o volume de fase de fluxo deve ser ajustado com antecedência para evitar que o esgotamento do solvente cause paradas automáticas.
Substituição de fase de fluxo: substitua a fase de fluxo de acordo com as necessidades experimentais e enxague completamente o sistema.
Editar métodos e configurar parâmetros
Parâmetros da bomba: Defina a velocidade de fluxo em "Flow", define o tempo de funcionamento em "Stop time" e edite o programa de limpeza de gradiente em "Timetable".
Parâmetros do amostrador: Defina o volume de amostragem em "Injecção" e selecione o método de lavagem da agulha.
Parâmetros do caixa de temperatura da coluna: Defina o modo de controle de temperatura e digite a temperatura alvo para garantir a estabilidade da coluna cromatográfica.
Parâmetros do detector: selecione o comprimento de onda de detecção de acordo com as características da amostra e defina o tempo de resposta.
Editar e executar sequências
Criação de sequências: edita sequências no software, incluindo o nome da amostra, a localização, o número de amostragens e o método de chamada.
Configuração de desligamento automático: Configure o modo de desligamento nos parâmetros da sequência para garantir que o instrumento desligue automaticamente após a conclusão da sequência, evitando longos períodos de espera.
Processamento de dados e geração de relatórios
Criação de curvas padrão: se a curva já existe, salve o método e selecione o módulo de método principal; Para criar uma nova curva, clique em Correção - Nova Tabela de Correção e insira o tempo de retenção e a concentração correspondente.
Saída do relatório: selecione os dados a imprimir, envie-os com o botão direito do mouse para o layout do relatório e selecione o modelo para a saída do resultado.
II. Resolução de problemas
Pressão anormal da coluna
Alta pressão da coluna:
Causa: depósito salino do tampão ou contaminação da amostra.
Solução: lavar a coluna com água pura de 40-50 ° C a baixa velocidade, esperar que a pressão da coluna caia para aumentar a velocidade de fluxo, e depois lavar com água pura a temperatura normal e metanol. Se a amostra estiver contaminada, enxague a coluna com metanol, metanol + isopropanol, metanol e água pura.
Pressão baixa ou sem pressão:
Causa: Operação incorreta, vazamento de líquido ou bomba sem infusão.
Solução: Verifique o estado da bomba e da válvula de evacuação; Determinar a localização do vazamento com papel de filtro, apertar a interface ou substituir o anel de vedação; Se a cabeça de filtro da entrada do solvente estiver bloqueada, limpe ou substitua com ultra-som.
Alterações no tempo de retenção
Causas: Alterações na composição da fase de fluxo, envelhecimento da coluna cromatográfica, flutuação da temperatura da coluna ou velocidade de fluxo anormal.
Resolução: revisar as configurações do sistema e reconfigurar a fase de fluxo; substituição de colunas cromatográficas de envelhecimento; Temperatura estável usando caixa de temperatura de coluna; Verifique o anel de vedação da bomba e a válvula unidirecional e substitua se necessário.
Anormalidade do pico
Forco de pico:
Causa: Contaminação da coluna cromatográfica ou colapso do enchimento da cabeça da coluna.
Solução: após lavagem inversa da coluna, lavar com metanol, metanol + isopropanol, metanol e água pura; Se o preenchimento cair, torne a cabeça do cilindro para limpar a parte de ligação rígida, preencha novamente e aperte.
Fronteira ou Inversão:
Causa do pico frontal: sobrecarga da amostra ou escolha inadequada do solvente.
Solução: diluir a amostra ou substituir o solvente; Se a coluna cromatográfica estiver danificada, substitua uma nova coluna.
Causa do pico inverso: a taxa de refração da amostra é inferior à fase de fluxo.
Solução: Use o mesmo solvente que o fluxo para dissolver a amostra e equilibrar a piscina de referência antes da amostra.
Drift de linha de base ou ruído
Causa: flutuação da temperatura da coluna, fase de fluxo desigual ou poluição da piscina de circulação.
Solução: Controle a temperatura usando o caixa de temperatura de coluna; Verificar o fluxo correspondente e a desgasificação; Lave a piscina de circulação com metanol ou ácido nitrico 1N.
Sem fluxo ou anormalidades de fluxo
Causa: bloqueio do sistema, entrada de ar ou desgaste da vedação da bomba.
Resolução: segmentação das partes bloqueadas, limpeza por ultra-som ou substituição; Pumpar ar na saída da bomba com uma agulha de vidro; Substituir vedações desgastadas.