Os sistemas experimentais de hipooxigênio em animais são uma ferramenta importante para estudar os mecanismos fisiopatológicos em ambientes hipooxigênicos, cujo uso regulamentar afeta diretamente a confiabilidade dos dados experimentais e o bem-estar dos animais. Os principais pontos de utilização abaixo são analisados em quatro áreas: preparação do equipamento, controle de parâmetros, gerenciamento de processos e segurança.

Preparação e adaptação antes do experimento

1. Verificação da vedação do compartimento

Teste de pressão negativa antes da utilização: a bomba de vácuo é iniciada após o fechamento de todos os canais e a pressão interna da cabine deve cair abaixo de -50kPa durante 3 minutos e permanecer estável, indicando que não há ponto de vazamento.

- Verifique se o anel de vedação da janela de observação e da válvula de entrada e saída de gás está envelhecendo e, se necessário, substitua a vedação de borracha fluorada.

Domicilação adaptativa dos animais

Os novos animais devem se adaptar ao ar normal durante pelo menos 48 horas e beber água livremente.

- Ajustar o tamanho da mesa de transporte de acordo com as características da espécie (por exemplo, uma gaiola de ratos não excede 5 por gaiola, ratos independentemente ventilados);

- As linhas especiais precisam de confirmação pré-experimental da taxa metabólica básica, para evitar que a reação ao estresse esconda o efeito real de hipooxigênio.

3. Proporção de gás pré-definida

- Usando o medidor de fluxo de massa para controlar com precisão a proporção de mistura N₂ / O₂, o gradiente comum é definido como oxigênio normal (21% O₂), deficiência de oxigênio moderada (10% -15%), deficiência de oxigênio grave (<6%);

- Equipado com absorvente de CO2 (Soda Lime) e dispositivo de adsorção de gás amônico para manter a concentração de gases perigosos no compartimento < 0,01%.

Gestão de processos e coleta de dados

Observação Sincronizada Comportamental

- Instalação de câmeras de alta definição em combinação com o sistema de reconhecimento de IA para contar automaticamente a atividade, a frequência respiratória e outros indicadores;

- Registre as mudanças de peso diariamente quando a caixa é trocada, o tempo de operação é controlado em 5 minutos.

2. Captura de sinais fisiológicos

- O chip de telemetria implantado pode obter dados de frequência cardíaca e saturação de oxigênio no sangue em tempo real;

- A coleta de sangue nas veias da cauda deve seguir rigorosamente o "princípio de três homogeneidades": o mesmo momento, os mesmos membros laterais, o mesmo operador.

3. Planejamento de emergência

- Reserva de garrafas portáteis de oxigênio (fluxo ajustável a 0,5 L / min), medicamentos de primeiros socorros colocados ao alcance da cabine;

- Defina o limiar de alarme duplo: a porta é aberta automaticamente quando o O₂ é < 8% ou a pressão na cabine muda > 5kPa/min.

Ética e controle de qualidade

Aplicação do Princípio 3R

- Determinação do volume mínimo de amostra eficaz por meio de pré-experimento, usando agrupamento aleatório em camadas;

- Desenvolver um programa de redução progressiva (redução diária de 2%-3% de O₂) para reduzir a resposta ao estresse agudo;

Estabelecer um critério final humano: interromper o experimento imediatamente em caso de convulsões contínuas e desaparecimento do reflexo da córnea.

2. Especificações de configuração de controle

Além do grupo de controle de oxigênio normal, adicione o grupo de deficiência de oxigênio intermitente (por exemplo, 4 horas de oxigênio baixo + 20 horas de reaoxigênio por dia);

O grupo de controle e o grupo experimental tiveram origem animal no mesmo período e o ambiente de criação foi consistente.

3. Ciclo de manutenção do equipamento

Calibração mensal dos sensores de oxigênio (usando calibração de gás padrão);

- Limpar a poeira interna do compartimento trimestralmente e substituir o filtro de entrada;

- A revisão anual concentra-se na inspeção do tempo de resposta da válvula eletromagnética e da estrutura mecânica da porta de vedação.