Os detalhes determinam o sucesso e o fracasso, o mesmo para os pesquisadores de laboratório. Existem muitos detalhes operacionais no experimento da caixa de ELISA, como o uso mínimo de uma pistola, troca de cabeça e adição de baixas concentrações para altas concentrações durante a amostragem, porque isso pode reduzir a probabilidade de saltos. E a chave após o experimento inteiro é o tratamento dos resultados, então no artigo técnico de hoje, nossa divisão trouxe-lhe o método de análise dos resultados do teste de kits Elisa.
①: As amostras do experimento ELISA devem ser compostas ou três buracos, em seguida, o cálculo do valor OD médio de cada padrão de concentração, o fator de variação do buraco composto deve ser inferior a 20%.
Valor médio de OD menos o valor de OD do buraco em branco.
• Criação de curvas padrão.
Sobretomando o valor OD do eixo X, a concentração do produto padrão é o eixo Y, o uso do software de desenho para obter um método de cálculo adequado. Recomenda-se o uso de um software adequado para fazer gráficos, como o CurveExpert 1.4. Este software é capaz de dar uma variedade de métodos (por exemplo, linha reta, semi-logaritmo, logaritmo, equação de quatro parâmetros, etc.) e escolher uma equação adequada para zui. Para verificar se uma curva coincide com os dados da tabela, você pode considerar a concentração do produto padrão como desconhecida, trazer o valor OD correspondente para a equação e calcular a concentração do produto padrão, o resultado deve ser muito próximo da concentração real (+/-10%). Escolha a curva com maior ajuste zui.
Se a curva padrão aparecer com má linearidade ou má paralelidade (OD do orificio de controle duplo) O valor é muito diferente), ou o fenômeno de salto de buraco, pode ser causado pela poluição mútua entre os buracos da placa de marcação enzimática, a placa de lavagem não conseguiu realizar a próxima operação o mais rápido possível, adicionar amostras ou outros reagentes quando o método de operação é errado, a posição de incubação é mal protegida da luz ou a membrana da tampa não está selada para que a água evapore, o buraco da placa de marcação enzimática pergunta a quantidade de reagente adicionada é diferente, a solução correspondente é a amostragem, por favor, tenha cuidado para não pulverizar o líquido em outro buraco, a placa de lavagem artificial também tem cuidado, não pulverizar o líquido de lavagem em outro micro-buraco, após a placa de lavagem a próxima operação oportuna, adicionar o reagente, por favor, deixe a suspensão, lembre-se de não entrar em contato com a cabeça da pistola no buraco da placa, extrair o líquido em diferentes garrafas de reagentes, substituir a cabeça de arma uma vez, confirme que o ambiente de incubação não é permeável, a membrana da tampa sela a placa Se adicionar uma gota de líquido na cabeça da pistola quando adicionar o líquido, então o líquido deixado na cabeça da pistola também será goteado para garantir a consistência do volume de líquido adicionado.