Como instrumento de análise de precisão, a sua estabilidade de desempenho e vida útil dependem fortemente da conservação científica. Os pontos de manutenção da HPLC são descritos abaixo em termos de especificações operacionais, manutenção de componentes, controle ambiental e tratamento de falhas, para ajudar os usuários a evitar problemas comuns e prolongar a vida útil do instrumento.
Manutenção diária: a operação preventiva é fundamental
1. Manutenção do sistema de infusão
Gestão de Fase de Fluxo:
① A configuração do fluxo requer o uso de água ultrapura (resistência ≥ 18,2 MΩ · cm) ou solvente cromatográfico puro, filtrado por uma membrana de filtro de 0,45 μm e desgasificado por ultra-som por 15 minutos para evitar bolhas ou sistemas de bloqueio de partículas.
Enxague a tubulação com isopropanol ou metanol antes do teste diário, substitua o solvente residual para evitar a precipitação de sal ou a proliferação de micróbios.
Manutenção da bomba:
① Limpe a cabeça da bomba em tempo útil após a execução e desative o solvente corrosivo (como ácido sulfúrico concentrado). As bombas mecânicas devem verificar regularmente os anéis de vedação para detectar vazamentos que são substituídos imediatamente.
Evite a aspiração seca (sem líquido quando a bomba funciona), o que pode causar desgaste da cabeça da bomba ou danos na cavidade.
2. Limpeza do sistema de amostragem
- Automático de amostragem:
① Depois de cada teste, enxague a agulha com metanol-água (50:50) e limpe os resíduos fora da agulha com papel de limpeza.
② Semanalmente desmontar a válvula de amostra, mergulhar em solução de ácido nítrico de 10% para limpeza por ultra-som, remover o cristal de sal tampão.
- Modelagem manual:
Certifique-se de injetar a amostra para evitar a poluição residual do anel de quantificação. As amostras de alta viscosidade precisam ser diluídas.
3. Proteção da coluna cromatográfica
- Especificações operacionais:
① É estritamente proibido entrar diretamente em amostras não filtradas, recomenda-se a pré-instalação de filtros on-line de 0,22 μm.
Evite operações de sobrepressão (geralmente não mais de 80% da pressão nominal da coluna), e a alta pressão repentina pode levar ao colapso do leito da coluna.
- 保存方法:
A coluna de fase inversa (C18) deve ser mantida em metanol-água (1: 1), a coluna de fase ortogonal (coluna de silicone) é selada com hexano, e a coluna bioquímica (como coluna de proteína) precisa ser adicionada com conservantes (como sódio nitrogenado de 0,05%).
4. Manutenção do detector
- Detector UV:
① limpe regularmente a janela da piscina de circulação com etanol para evitar que o resíduo da amostra cause uma diminuição da transmissibilidade da luz.
A vida útil da lâmpada de deutério é de cerca de 2.000 horas, e a energia deve ser substituída quando diminuir para 70% do valor inicial.
Detectores de fluorescência:
Lave a piscina de circulação com água limpa após cada teste para evitar que resíduos de substâncias fluorescentes interferam com a detecção posterior.
Manutenção Profunda Periódica: Garantir a Estabilidade a Longo Plaço
1. Limpeza e calibração do sistema
Manutenção trimestral:
① Use uma solução de ácido nítrico de 5% para lavar os tubos metálicos e remover os sedimentos oxidantes; O sistema de fase inversa pode ser limpo com ácido fosfórico de 0,1%.
Precisão da velocidade de fluxo de calibração: medir o fluxo real e o desvio do valor definido pelo contador de segundos deve ser < 5%.
Manutenção Anual:
① substituir os tubos envelhecidos (por exemplo, tubos PEEK se tornam frágeis ou mudam de cor).
② Verifique a precisão do comprimento de onda do detector (calibre o comprimento de onda ultravioleta usando o filtro de vidro Helmium).
2. Regeneração e avaliação da coluna cromatográfica
- Recuperação de coluna:
A coluna de fase inversa pode ser lavada de forma inversa com uma solução para remover a substância adsorente forte; As colunas de troca iônica precisam ser regeneradas com uma solução salina de alta concentração.
- Avaliação de desempenho:
Teste semestral do efeito da coluna (por exemplo, número teórico de placas de pico de uretrina ≥ 80%), desvio de tempo de retenção (< 15%) e fator de atraso (≤ 2,0%).
Tratamento de desativação a longo prazo: evitar danos aos componentes
Descanso de curto prazo (< 1 semana):
- Desligue o sistema de lavagem com metanol e mantenha a coluna cromatográfica cheia de solvente.
Tempo de inatividade prolongado (> 1 semana):
- Desmontar coluna cromatográfica para conservar, cabeça de bomba para injetar óleo de silício anti-ferrugem, seleção após secagem da piscina de circulação do detector. Coloque toda a máquina em uma caixa à prova de umidade (umidade < 40%).
Controle Ambiental e Especificações de Operação
Gestão de temperatura e umidade: a temperatura do laboratório deve ser controlada entre 20 e 25 ° C, umidade < 60%, para evitar a corrosão da água condensada dos componentes ópticos.
Medidas à prova de poeira: o instrumento é coberto com uma tampa à prova de poeira e o sistema de purificação de ar mantém PM10 < 50 μg / m³.
Contra-tabu de operação: é estritamente proibido carregar o plug de conexão elétrica, desligar a fonte de energia do anfitrião antes de uma interrupção súbita.
Registro de dados e gerenciamento de peças de reposição
1. Registo de manutenção: registra o conteúdo de cada manutenção, número de lote de peças de substituição e estado do instrumento para fácil rastreamento.
2. Reserva de peças de reposição: válvula de amostragem de reposição convencional, almofada de vedação, lâmpada de deutério, coluna cromatográfica (recomenda-se 2 cópias de segurança do mesmo modelo).