A cromatografia contra-corrente de alta velocidade (HSCCC) é uma nova técnica de cromatografia de distribuição líquida contínua desenvolvida em 1982 pelo Dr. Ito do Instituto Nacional de Saúde dos Estados Unidos, que, ao contrário de outras técnicas cromatográficas, não requer nenhum veículo em estado sólido e, portanto, evita efeitos adversos como poluição, desativação, deformação e adsorção irreversível da superfície do veículo em fase sólida com a amostra. Ao mesmo tempo, ele também tem uma ampla gama de aplicações, rápido, grande volume de amostragem, baixo custo e alta taxa de recuperação. Portanto, tem sido amplamente utilizado em áreas como biologia, medicina, alimentos, materiais, cosméticos e proteção ambiental, especialmente na purificação separada de ingredientes ativos de produtos naturais.

A cromatografia de fluxo inverso de alta velocidade é um método de separação cromatográfica de fluxo inverso baseado em um sistema de equilíbrio de potência de fluidos unidirecional, que foi descoberto por acaso ao estudar o equilíbrio de potência de fluidos em tubos rotativos. Quando o tubo espiral gira lentamente, ambas as fases do tubo espiral se distribuem de uma extremidade para a outra. Quando uma fase é movida de uma extremidade para a outra, a outra fase é retida em cerca de 50% no tubo espiral, mas essa retenção diminui à medida que a velocidade de fluxo da fase de movimento aumenta, reduzindo a eficiência da separação. Mas quando a velocidade de rotação do tubo espiral é acelerada, a distribuição das duas fases muda. Quando a velocidade de rotação atinge a faixa crítica, as duas fases se separam ao longo do comprimento do tubo espiral *, uma das quais ocupa todo o segmento da extremidade, chamamos esta fase de fase inicial e a outra ocupa todo o segmento da extremidade, chamada fase final. A cromatografia de fluxo inverso de alta velocidade é exatamente aproveitando esta característica de distribuição unidirecional de duas fases, na alta velocidade de rotação do tubo de espiral, se for enviado da extremidade da cauda para a fase inicial, ele se moverá através da fase inicial para a extremidade da cauda, da mesma forma, se for enviado da fase inicial para a fase inicial, ele se moverá através da fase inicial para a extremidade da cauda do tubo de espiral. Ao separar, primeiro injete uma fase (fase fixa) no tubo em espiral e, em seguida, bombe a fase móvel da extremidade apropriada para que ela carregue a amostra para distribuição infinita no tubo em espiral. Quanto mais rápida a velocidade de rotação do instrumento, mais retenção de fase fixa, melhor o efeito de separação, e melhora significativamente a velocidade de separação, por isso chamada cromatografia de alta velocidade de fluxo inverso.

Resumo das vantagens do cromatografo de alta velocidade:

Como a composição e a proporção do sistema de solventes podem ser infinitas, em teoria podem ser aplicadas à separação de amostras dentro de qualquer faixa polar, com suas características únicas na separação de compostos naturais. Como o líquido de fase fixa em tubos de PTFE não requer um veículo de fase sólida, a perda de adsorção na cromatografia líquida-sólida devido ao uso de veículos de fase sólida pode ser eliminada, especialmente para a separação de substâncias polares.

2, fácil de operar, fácil de dominar: a operação do cromatômetro de fluxo inverso de alta velocidade é simples, os requisitos de pré-tratamento da amostra são baixos, o material bruto geral pode ser preparado para separação ou análise.

Alta taxa de recuperação: não é necessário um veículo de fase sólida, eliminando a perda causada pela adsorção e degradação irreversíveis da amostra no veículo de fase sólida, a taxa de recuperação da amostra pode ser alcançada em teoria. Enquanto as condições de separação são ajustadas em experimentos, geralmente há uma alta taxa de recuperação.

4, boa reprodutividade: se a amostra não tiver um forte efeito de atividade superficial, ácido-alcalino também não é forte, mesmo que várias amostras, o processo de separação permanece estável, e a reprodutividade é bastante boa.