Em combinação com a tecnologia de pré-processamento de amostras, a alta resolução e a alta sensibilidade alcançadas pela HPLC permitem a separação e simultaneamente a determinação de substâncias de propriedades muito semelhantes, capazes de separar microcomponentes em fases complexas. À medida que a fase fixa se desenvolve, é possível concluir sua separação sob condições de manutenção adequada da atividade da substância bioquímica.

Os sistemas dos fabricantes de cromatografia de fase líquida são compostos por armazenadores, bombas, amostradores, colunas cromatográficas, detectores, gravadores e outras partes. A fase de fluxo no depósito é introduzida no sistema pela bomba de alta pressão, a solução da amostra entra na fase de fluxo através do receptor de amostra e é carregada na fase de fluxo na coluna cromática (fase fixa), devido a que cada componente da solução da amostra tem um coeficiente de distribuição diferente em duas fases, quando se faz movimento relativo em duas fases, após vários processos de distribuição repetidos de adsorção e desabsorção, cada componente produz uma grande diferença na velocidade de movimento, é separado em componentes individuais que fluem da coluna, quando passa pelo detector, a concentração da amostra é convertida em sinal elétrico para o gravador, os dados são impressos em forma de mapa.

Compreensão dos fabricantes de cromatografia líquida

Os coeficientes de distribuição estão relacionados às propriedades termodinâmicas dos componentes, da fase de fluxo e da fase fixa, bem como à temperatura e à pressão. Em diferentes mecanismos de separação cromatográfica, K tem conceitos diferentes: a cromatografia de adsorção é o coeficiente de adsorção, a cromatografia de troca iónica é o coeficiente seletivo (ou coeficiente de troca) e a cromatografia em gel é o parâmetro de penetração. No entanto, as circunstâncias gerais podem ser representadas por fatores de distribuição.

Quando as condições (fase de fluxo, fase fixa, temperatura e pressão, etc.) são certas e a concentração da amostra é baixa (Cs, Cm são pequenos), K depende apenas da propriedade do componente e não da concentração. É apenas em condições cromatográficas ideais, em que o pico cromatográfico obtido é o pico normal; Em muitos casos, K diminui à medida que a concentração aumenta, quando o pico cromatográfico é o pico de atraso; Às vezes, à medida que a concentração de solúvel aumenta, K também aumenta, quando o pico cromatográfico é o pico pré-prolongado. Portanto, picos normais só podem ser obtidos se o volume de amostragem for reduzido ao mínimo possível, permitindo que a concentração do componente seja reduzida dentro da coluna, com K constante.