No primeiro dia de junho de 2025, na conferência ASMS 2025 em Baltimore, a SymerFly lançou sua nova linha de produtos deste ano, a Thermo Scientific. ™ Orbitrap ™ Excedion ™ O espectrômetro de massa de alta resolução 2 em 1 da próxima geração da Symer Fly, chamado Pro, tornou-se o sucessor da linha de produção da Symer Fly de quinze anos, e é o produto estrela da terceira geração da família "Ex", após o Q Exactive (série QE) e o Orbitrap Exploris (série OE), esperamos que ele herde o estilo da família "Ex" "workhorse" e ofereça aos usuários uma experiência "Exceed".

Então, neste artigo, vamos seguir o vento de Baltimore para experimentar a nova Thermo Scientific ™ Orbitrap ™ Excedion ™ Pro então

Na parte frontal do instrumento, para obter uma maior eficiência de transmissão e um melhor desempenho para compostos instáveis, Orbitrap ™ Excedion ™ O front-end do Pro substitui a fonte de íons OptaMax Plus com a Stellar, um produto de gama alta com a nova geração da linha de produtos quantitativos da Symer Fly lançada no ano passado. ™ Espectrómetro de massa equipado com a fonte de íons liberados (também deixa-nos pequenos para esperar Orbitrap ™ Excedion ™ O Pro, que será apresentado no futuro no campo quantitativo, oferece uma maior estabilidade de pulverização em intervalos de temperaturas mais elevados. Também é equipado com uma nova geração de funis de íons elétricos semelhantes ao Orbitrap Ascend, projetados especialmente para compostos instáveis ​​ou segmentos peptídicos modificados que são susceptíveis de mudança, para fornecer uma transmissão frontal mais suave e reduzir as perdas dentro da fonte. As duas espadas se juntam e se complementam.

Além disso, para os usuários de proteômica, lançaremos este ano uma nova fonte de nano-iões, OptiSpray, que oferecerá aos usuários um desempenho superior e uma experiência de uso mais fácil e estável. E a nova área de nanoascensão pode suportar diretamente vários padrões como correção e amostragem direta.

Orbitrap ™ Excedion ™ O Pro traz a inovadora tecnologia eDR (Enhanced Dynamic Range), em termos simples, dividimos uma varredura Full MS original em duas sub-varreduras, permitindo uma melhor transmissão e acumulação de íons e alcançando um efeito equivalente à separação horizontal de fase gaseosa, e, finalmente, as duas sub-varreduras serão saídas automaticamente por meio do software. A tecnologia eDR melhorará significativamente a relação sinal-ruído de íons de baixa abundância, trazendo uma maior confiança dos resultados e melhorando o desempenho dos LOQs/LODs do instrumento. Tal amplificação de sinal do espectro de nível 1 também aumenta a sensibilidade dos íons maternos de nível 1 da proteômica e melhora a interferência na identificação causada pela alta abundância de proteínas.

Para melhorar ainda mais o desempenho qualitativo e quantitativo da proteômica, esperamos fornecer aos usuários simultaneamente capacidade quantitativa para o polipéptido alvo, chamando-o de tecnologia Hybrid-DIA, e combinando a tecnologia Adaptive RT, como mostrado no experimento abaixo, a quantificação de 450 polipéptidos alvo em um tempo de gradiente de 30 minutos, sem sacrificar o desempenho do DIA, com um intervalo linear quantitativo de 62,5 amol a 1000 fmol.

No novo Orbitrap ™ Excedion ™ No Pro, nosso detector Orbitrap evoluiu ainda mais, combinado com a tecnologia de pré-acumulação Bent Trap, dando um tempo de injeção de íons mais longo e eficaz. Ao mesmo tempo, a velocidade de varredura do Orbitrap chegou a 70Hz, o que fez com que o Orbitrap ™ Excedion ™ O Pro tem um melhor desempenho em gradientes curtos e pequenos volumes de amostragem. Como mostrado no gráfico, em um gradiente ultracurto de 9min, de 6ng a 200ng, a tecnologia de pré-acumulação do Bent Trap pode trazer um aumento correspondente, e o aumento do volume de amostra mais baixo é mais significativo.

Além disso, para as amostras TMT-32plex e TMT-35plex, o novo Orbitrap ™ Excedion ™ O algoritmo Phi-SDM no Pro também trará os algoritmos do TurboTMT 45k e do TurboTMT 60k para garantir a separação de linha de base dos íons relatórios quantitativos do usuário.

As diferentes formas de fragmentação desempenham um papel crucial na aplicação prática. Nas duas primeiras gerações de instrumentos tradicionais, a linha de produtos 2-em-1 oferece apenas o modo de fragmentação HCD (e CID em fonte), enquanto no novo Orbitrap ™ Excedion ™ No Pro, ofereceremos o modo de fragmentação EASY-Electron Transfer Dissociation (ETD) e o modo EThcD. Em resumo, no novo Orbitrap ™ Excedion ™ No Pro, os íons maternos são capturados em IRM e, aqui, reagem com o fluorodeficiente, e os fragmentos de ETD resultantes são retornados para o C-Trap, neste momento, podemos optar por continuar a acelerar a entrada em IRM para EThcD ou diretamente para Orbitrap para a detecção.

Em aplicações práticas, no campo biofarmacêutico e na proteômica, os modelos ETD e EThcD têm uma ampla gama de cenários de aplicação. Quando precisamos de uma caracterização mais detalhada da sequência de proteínas ou modificações de péptidos, temos necessidades mais rigorosas de cobertura de sequências e informações de validação de locais de modificação, e os padrões ETD e EThcD podem ser nossos poderosos auxiliares.

Em primeiro lugar, diante da identificação de modificação, como um peptídeo completo, o padrão de fraturação do EThcD pode desfraturar os ligamentos peptídicos ao mesmo tempo em que nos mantém a ligação entre a cadeia de açúcar e os aminoácidos, fornecendo informações sobre o local da modificação e informações sobre a sequência do peptídeo.

Outro caso vem de experimentos Top-down ou Middle-down, em comparação com um único padrão de HCD, a adição de vários padrões de fragmentação, como ETD e EThcD, nos dará uma maior cobertura de sequência, favorecendo nossa caracterização fina das sequências de proteínas. Como podemos ver no gráfico abaixo, especialmente no modelo EThcD, obtemos uma cobertura de sequência maior do que o modelo ETD simples (53% vs 40%). O novo Orbitrap ™ Excedion ™ A gama de massa do Pro pode ser expandida até 12.000 m/z, o que torna a detecção de proteínas completas ou Top-down benéfica.

Em termos de cobertura, além de experimentos de cobertura de sequências de proteínas como Top-down ou Middle-down, a identificação de níveis de polipéptidos como imunopeptidómica também pode se beneficiar.

Além da ajuda para a cobertura da sequência, em experimentos como o denovo ou o mapeamento peptídico, muitas vezes precisamos confirmar certas sequências de aminoácidos, como a resolução de I e L e a resolução de D e isoD, que podem ser confirmadas pelo padrão de fragmentação do ETD.

O novo Orbitrap deste ano ™ Excedion ™ O espectrómetro de massa Pro, que nos oferece velocidades de digitalização mais rápidas, maior sensibilidade, novas tecnologias eDR e Hybrid-DIA, melhorias como ETD, EThcD Fragment Mode e expansão de gama m/z, e estamos ansiosos para o novo Orbitrap ™ Excedion ™ O espectrômetro de massa Pro nos oferece quantificações qualitativas de proteínas mais eficientes, rápidas e precisas, bem como resultados experimentais mais excelentes para experiências macromoleculares como caracterização biofarmacêutica e Top-down.