Genética humana(Ub) Kit de Reação

Este kit é usado apenas para estudos in vitro e não para diagnóstico clínico.

Este kit é usado para a quantificação in vitro de anthropogenina em soro, plasma, homologação de tecidos e amostras líquidas relacionadas.Conteúdo (UB).

Período de validade:6 meses

Condições de conservação:2-8℃

Composição do kit:

Observações:

(96T / 48T) depois de abrir a embalagem, verifique prontamente se todos os itens estão completos.

As concentrações padrão são: 800, 400, 200, 100, 50, 25 pg/mL

Após um grande número de testes de amostras normais, os valores de concentração normal da amostra estão dentro da faixa de teste fornecida pela caixa de ensaio, e a amostra de 50 μL pode ser tomada diretamente durante o processo experimental. Quando um valor parcial da amostra exceder a concentração padrão, a amostra deve ser diluída adequadamente com uma diluição de amostra disponível e posteriormente testada.

Preparação antes do teste:

Por favor, retire o kit do frigorífico com 20 minutos de antecedência para equilibrar a temperatura ambiente.

O líquido de lavagem concentrado retirado do frigorífico pode ter cristalização, pertencente a um fenômeno normal; Coloque a temperatura ambiente, agite suavemente e uniformemente até que a cristalização se dissolva. 20 ml de líquido de lavagem concentrado pode ser diluído com água destilada ou água deionizada para configurar a concentração de trabalho de 400 ml de líquido de lavagem, não usado de volta a 4 ° C

3.20 x diluição do tampão de lavagem: a água destilada é diluída em 1: 20, ou seja, 1 porção de tampão de lavagem 20 x mais 19 porções de água destilada.

Genética humana(Ub) Kit de Reação

Princípio experimental:

Kit de teste de imunosorbenção ligada a biopsia de um passo com anticorpos duplos (ELISA）。 Para os anticorpos capturados pré-embalados por Ub (Ub), os anticorpos de detecção de amostras, produtos padrão e marcadores HRP são adicionados em microporos, após a criação térmica e lavagem. Colorado com o substrato TMB, o TMB é convertido em azul sob a catálise da peroxidase e em amarelo sob a ação do ácido. A clareza da cor foi positivamente correlacionada com a anthropogenina (Ub) na amostra. Calcule a concentração da amostra medindo a absorção (OD) a um comprimento de onda de 450 nm com um calibrador enzimático.

Equipamento de teste necessário para a experiência:

Calibrador enzimático (450 nm)

Amostrador de alta precisão e cabeça: 0,5-10uL, 2-20uL, 20-200uL, 200-1000uL

3.37 ℃ caixa de termostato

Água destilada ou água deionizada

Processamento de amostras e requisitos:

Sério: as amostras de sangue inteiro coletadas no tubo de separação de soro são colocadas a temperatura ambiente durante 2 horas ou 4 ° C durante a noite, em seguida, 1000 x g é centrifugado por 20 minutos para remover a limpeza ou manter a limpeza superior a -20 ° C ou -80 ° C, mas deve ser evitado congelamento repetido.

Plasma: coleta a amostra com EDTA ou heparina como anticoagulante e centrifuge a amostra em 2-8 ° C 1000 x g por 15 minutos dentro de 30 minutos após a coleta, a limpeza pode ser detectada ou a limpeza superior pode ser mantida a -20 ° C ou -80 ° C, mas deve ser evitado congelamento repetido.

3. homologação de tecidos: lavar o tecido com PBS pré-refrigerado (0,01 M, pH = 7,4), remover o sangue residual (os glóbulos vermelhos fissados na homologação podem afetar o resultado da medição), depois de pesar o tecido cortado. O tecido cortado com o volume correspondente de PBS (geralmente em uma relação de peso a volume de 1: 9, por exemplo, 1 g de amostra de tecido corresponde a 9 ml de PBS, o volume específico pode ser ajustado adequadamente de acordo com as necessidades experimentais e registrado. Recomenda-se a adição de inibidores de protease em PBS) para adicionar ao amortiguador de vidro e moer completamente no gelo. Para separar ainda mais as células do tecido, o molho homogêneo pode ser quebrado por ultra-som ou congelado repetidamente. Será homogeneizada em 5000 x g por centrifugação de 5 a 10 minutos, removendo o teste de limpeza.

4. limpeza de cultura celular: por favor, centrifuge 1000 x g por 20 minutos, remover a limpeza pode ser detectada, ou manter a limpeza superior a -20 ° C ou -80 ° C, mas deve ser evitado congelamento repetido.

Outras amostras biológicas: centrífuga 1000 x g por 20 minutos para ser detectada imediatamente.

Aparência da amostra: a amostra deve ser clara e transparente e a suspensão deve ser removida por centrifugação.

Conservação da amostra: se a amostra é coletada dentro de uma semana para o teste pode ser mantida em 4 ° C, se não puder ser detectada a tempo, por favor, por uma única quantidade de uso, congelado em -20 ° C (detecção dentro de 1 mês), ou -80 ° C (detecção dentro de 6 meses), para evitar o congelamento repetido, a hematologia da amostra afetará o resultado do teste, portanto, a hematologia da amostra não é aconselhável fazer este teste.

Atenção:

1. Criação térmica de acordo com o tempo e a temperatura especificados para garantir resultados precisos. Todos os reagentes devem atingir a temperatura ambiente de 20-25 ° C antes de serem usados. Mantenha o reagente refrigerado imediatamente após a utilização.

Lavar a placa incorretamente pode levar a resultados imprecisos. Assegure-se de absorver o máximo líquido dentro do orifício antes de adicionar o substrato. Não deixe os microporos secar durante o processo de aquecimento.

Eliminar líquidos e impressões digitais residuais no fundo da placa, caso contrário, afetar o valor de OD.

O líquido de coloração de substância deve ter uma cor incolor ou muito clara, o líquido de substância que se tornou azul não pode ser usado.

Evite a contaminação cruzada de reagentes e amostras para evitar resultados errados.

Evite a exposição direta à luz intensa durante o armazenamento e a criação térmica.

7. Equilibrar até a temperatura ambiente e abrir o saco de vedação para que as gotas de água não se condensem na barra de placa fria.

Nenhum reagente de reação pode entrar em contato com o solvente de branqueamento ou os gases fortes emitidos pelo solvente de branqueamento. Qualquer componente de branqueamento pode interromper a atividade biológica do reagente de reação no kit.

Não é possível usar produtos expirados.

Se a transmissão da doença for possível, todas as amostras devem ser bem administradas e as amostras e os dispositivos de teste devem ser tratados de acordo com os procedimentos prescritos.

Passos operacionais:

Remova a placa necessária do saco de folha de alumínio após o equilíbrio de temperatura ambiente de 60 minutos, e a placa restante é selada de volta a 4 ° C com um saco autofechado.

Estabeleça um orifício padrão e um orifício de amostra, cada orifício padrão adiciona uma concentração diferente de 50 μL de produto padrão.

Adicione 50 μL de amostra a ser testada no orifício da amostra; Nenhum buraco em branco.

Além dos buracos em branco, os buracos padrão e os buracos da amostra adicionam 100 μL de anticorpos de detecção marcados com a peroxidase de raiz (HRP) a cada buraco, selando o buraco de reação com uma membrana de vedação, a caldeira de banho de água a 37 ° C ou a temperatura do termostato para 60 minutos.

5, descartar o líquido, absorver água no papel e secar, cada buraco preencher o líquido de lavagem (350 μL), deixar 1 min, descartar o líquido de lavagem, absorver água no papel e secar, assim repetir a placa 5 vezes (também pode ser lavada com uma máquina de lavar placas).

Adicione 50 μL de substância A e B a cada poço e incube a luz a 37 ° C por 15 minutos.

Adicione 50 μL de líquido final a cada orifício e, dentro de 15 minutos, determine o valor de OD de cada orifício a um comprimento de onda de 450 nm.

Resultados do cálculo experimental:

Desenha curvas padrão: emNa folha de cálculo do Excel, a concentração do produto padrão como coordenadas transversais, o valor do OD correspondente como coordenadas longitudinais, desenhe a curva de regressão linear do produto padrão e calcule os valores de concentração da amostra de acordo com a equação da curva.

(Esta imagem é apenas para referência)

Genética humana(Ub) Kit de Reação

Desempenho:

Alcance de detecção: 25 pg/mL - 800 pg/mL.

Sensibilidade: concentração de detecção inferior a 1,0 pg/mL.

Especificação: não reagir cruzadamente com outros análogos estruturais solúveis.

Repetibilidade: o fator de variação dentro da placa é menor de 10% e o fator de variação entre placas é menor de 15%.

Dicas técnicas:

Quando misturado ou com soluções de proteína pesada, tente evitar espuma.

A fim de evitar a infecção cruzada, a configuração de diferentes concentrações padrões, amostras e diferentes reagentes precisam ser substituídos. Outros reagentes diferentes, por favor, use diferentes vasos de pipeta.

Cada vez que incubar, por favor, use corretamente a cola de vedação para garantir a precisão dos resultados.

4. o substrato colorido após a mistura deve ser incolor antes da placa superior, por favor, evite a luz; Se a placa de microporos for seguida, a cor será transformada em azul de diferentes profundidades.

A ordem da placa superior do líquido de terminação deve ser consistente com a ordem da placa superior do substrato colorido; Após a adição do líquido terminante, a cor do buraco passa de azul a amarelo; Se houver verde no buraco, indica que o líquido no buraco não está misturado; Por favor misture completamente.

Descrição:

Como as condições existentes e o nível científico e técnico ainda não podem ser identificados e analisados de forma abrangente todas as matérias-primas fornecidas por todos os fornecedores, este produto pode apresentar certos riscos técnicos de qualidade.

Os resultados experimentais estão intimamente relacionados com a eficácia do reagente, a operação relevante do experimentador e o ambiente experimental no momento, certifique-se de preparar cópias de segurança adequadas da amostra.

Diferentes lotes do mesmo produto podem ter pequenas diferenças, tais como: limite de detecção, sensibilidade e tempo de exibição de cor, por favor, de acordo com as instruções da caixa para operações experimentais, a versão eletrônica das instruções do site é apenas para referência.

Somente o uso completo deste kit de reagentes de apoio pode garantir o efeito do teste, não pode ser misturado com produtos de outros fabricantes. Os resultados do teste só serão obtidos se as instruções experimentais deste kit forem rigorosamente seguidas.