I. Requisitos regulamentares

Os métodos de teste GMP na indústria farmacêutica requerem referência aos métodos de teste ISO, enquanto a regulamentação de controle de poluição microbiana ISO 14698-1 menciona que a monitorização microbiana requer avaliar a eficiência de coleta, e métodos de amostragem e equipamentos de amostragem com alta eficiência podem obter dados mais representativos. Para ambientes com baixa carga biológica, como os ambientes de grau A e B, a amostragem ativa de planctone deve ser mais usada do que o método de amostragem passiva de sedimentação.

Orientações para a avaliação da eficiência da coleta de amostradores microbianos foram apresentadas. AtuaisA versão de 2003 da ISO 14698 divide a eficiência de coleta em eficiência de coleta física e eficiência de coleta biológica, onde a eficiência de coleta física se preocupa mais com se o método de amostragem tem a capacidade de coletar partículas portadoras de bactérios no ar e a eficiência de coleta biológica se o amostrador ou o método de amostragem pode garantir a sobrevivência das partículas portadoras de bactérios ao coletar.

Eficiência da amostragem de bactérias depositadas

O método de amostragem passiva baseado na gravidade da Terra pode obterA eficiência de coleta de partículas ativas de tamanho de partículas de 12 micrômetros é de 0,106 CFU / h em uma placa de amostragem de 9 cm e de 0,256 CFU / h em uma placa de amostragem de 14 cm. Para partículas ativas com tamanho de partícula de 1 micrão que se depositam em um prato plano de amostragem de 9 cm, a eficiência de coleta é de 0,008 CFU / h. Se o limite de concentração de zona zui é de 1CFU / m3, então um prato plano de 9cm precisa ser exposto à amostragem de zona por 1250 horas (equivalente a 52 dias) para detectar um dado significativo (um CFU) em um ambiente de baixa carga de poluição biológica.

Portanto: bactérias depositadas"É um método de amostragem muito pouco sensível" e "as bactérias sedimentadas refletem melhor o efeito da deposição de partículas portadoras de bactérias, sendo mais sensíveis apenas em amostragens de placas planas maiores (como 14 cm) ou coletas de placas planas múltiplas". Para o método de amostragem ativa, a coleta de partículas de 1 micrão é 2250 vezes mais eficiente do que a coleta passiva de 9 cm do método de sedimentação. Para a amostragem de microorganismos em ambientes de fluxo regional, recomenda-se a utilização de métodos de amostragem mais sensíveis.

Métodos de amostragem como bactérias depositadas para processos não estériles com cargas relativamente elevadas de micróbiosC, ambiente de grau D, pode ser usado como um complemento para amostragem microbiana, combinado com o método de amostragem de planctone pode ser usado em conjunto. Para ambientes de grau A e B, o método de amostragem de plancton é mais adequado como um método de amostragem mais eficiente.

Riscos no monitoramento diário

Como todos sabem, a União EuropeiaO projeto do Anexo I para a produção estéril GMP foi lançado em 24 de dezembro de 2017, com mudanças muito importantes:

a) Duplicação das referências a micróbios e associados (23 referências ao apêndice original e 68 referências ao novo esboço)

b) Quase quadruplicou a referência ao risco (o apêndice anterior mencionava isso 20 vezes e o novo projeto 92 vezes).

Assim, é possível entender a importância sem precedentes que as autoridades reguladoras atribuem aos requisitos de microorganismos e riscos. Para o monitoramento diário, o novo apêndiceOs locais de monitoramento de partículas ativas (microorganismos) mencionados no artigo 9.7 devem ser os locais de risco de contaminação de produção estéril, como a superfície estéril, a tampa do recipiente aberta, etc. No artigo 9.29, o método de amostragem de partículas ativas (microorganismos) não deve apresentar qualquer risco de contaminação para a produção farmacêutica (Referência 2). Assim, podemos ver a ideia do regulador, que acredita que a monitorização microbiana é importante e que a adoção de métodos de amostragem inadequados pode ter um impacto negativo no ambiente de produção.

É um dilema para a nossa indústria. Anteriormente, muitas empresas decidiram não realizar monitoramento ativo de micróbios (plancton) devido à incapacidade de encontrar um método microbiano adequado e à preocupação de que a substituição frequente de placas planas do método de amostragem de plancton traria poluição ao ambiente farmacêutico. À medida que a indústria farmacêutica moderna se desenvolve, reconhecemos a necessidade de melhorar nossa avaliação e identificação de riscos para métodos de amostragem microbiana.

Os métodos de sedimentação podem causar poluição ao meio ambiente, e sabemos que a superfície dos sedimentos contém uma grande quantidade de água nutritiva.Entre 10 microns e 20 microns, quando as bactérias depositadas são expostas em ambientes críticos de produção, é provável que essas nutrientes sejam soprados para superfícies estériles, recipientes de garrafas e líquidos, causando poluição e contaminação cruzada.

A amostragem de plancton devido ao meio de cultura é relativamente fácil de secar, a velocidade de fluxo de amostragem moderna é projetada para amostragem de baixa velocidade de fluxo, pode prolongar o tempo de produção de cobertura de amostragem de plancton, não faça a introdução de substituição de prato plano com frequência. Geralmente é levado em consideraçãoPara a proteção do fluxo de ar no ambiente stratificado, nós também realizamos um projeto de amostragem dinâmica para a amostragem de plancton, para garantir que o ar acima do amostrador mostre a mesma velocidade e não cause poluição no local.

O método convencional de amostragem microbiana consiste em colocar todo o amostradorOs métodos modernos de controle de processo estéril exigem que qualquer material que entra no equipamento seja totalmente esterilizado. Os métodos tradicionais colocam o amostrador, devido à esterilização dos componentes elétricos da placa de circuito no interior do amostrador, geralmente a amostragem da empresa VHP ou a esterilização do álcool na superfície do amostrador, o efeito da esterilização não pode ser alcançado. Os requisitos de controle de processo estéril da OMS recomendam que as empresas farmacêuticas tomem amostras por meio de métodos de amostragem microbiana divididos, ou seja, separando a cabeça de amostragem do amostrador, colocando a cabeça de amostragem e podendo ser esterilizada a alta temperatura ou químicamente com antecedência, enquanto o amostrador é colocado em um ambiente de fundo de nível B para operar. Desta forma, o efeito da incapacidade do amostrador de esterilizar pode ser evitado.

conclusão

Em resumo, os métodos de amostragem de planctone comprovados são mais eficientes do que os métodos de amostragem de bactérias sedimentares e adequados para ambientes críticos de produção estéril com baixa carga biológica. O método de amostragem de bactérias sedimentares pode ser usado como um método complementar para amostragem de plancton no processo de produção e pode ser usado em ambientes não estériles relativamente pouco críticos e com alta carga biológica, quando usado para evitar o risco de poluição causado por posições inadequadas ou erros operacionais. Independentemente do método utilizado, a localização, a frequência de amostragem, o tempo de cobertura da amostragem e a velocidade de fluxo de amostragem devem ser determinados com base na avaliação de risco do processo de produção.