garrafa base de cultivoA abertura é a primeira etapa de experimentos microbianos e culturas celulares, cuja normativa operacional determina diretamente a taxa de sucesso dos experimentos posteriores - a manipulação inadequada pode levar à poluição do meio de cultura, falhas de ingredientes e até mesmo desencadear riscos de segurança do pessoal experimental. Os princípios fundamentais são “controle estéril” e “segurança operacional”, estabelecendo um processo padronizado completo desde a preparação até a conclusão.

A preparação antecipada é a base da garantia estéril. Confirme o ambiente experimental antes da operação: o armário de biossegurança ou a mesa de trabalho ultra-limpa deve ser aberta com antecedência para a desinfecção ultravioleta por 30 minutos, ventilação por 20 minutos após a operação; Os experimentadores devem usar luvas estériles, roupas de experimento e, se envolver uma cultura microbiana intensa, também devem usar máscaras e óculos de proteção. Ao mesmo tempo, verifique o estado da garrafa de base de cultura: observe se o corpo da garrafa está danificado, se a película de vedação está intacta, se a etiqueta claramente indica o tipo de meio de cultura, a data de esterilização e o período de validade, se exceder o período de validade ou aparecer turbidez do meio de cultura, precipitação anormal, etc., o descarte direto não precisa ser aberto.

A operação de abertura é executada com precisão em três etapas. O primeiro passo é a desinfecção da superfície, colocar a garrafa de base no centro da mesa de trabalho, usar um pano estéril mergulhado em 75% de álcool médico, limpar a superfície do corpo da garrafa e a tampa em espiral centrada na abertura da garrafa, concentrar-se na desinfecção da tampa e da conexão do corpo da garrafa para evitar a poeira ou os micróbios com a operação. Depois da desinfecção, espere que o álcool seja totalmente volátil, evitando que resíduos de álcool misturados no meio afetem o crescimento celular ou microbiano.

O segundo passo é abrir a tampa da garrafa e manter a posição de "boca inclinada para baixo" durante todo o processo para evitar que os poluentes caiam no ar quando a boca da garrafa está voltada para cima. Uma mão segura a parte inferior do corpo da garrafa, a outra mão segura a borda da tampa com o polegar e o dedo indicador, gira lentamente ao longo da direção antihorária, gira até que a tampa seja solta, não retire tudo, mantenha o estado de conexão de rosca de 1-2 círculos, liberte lentamente a pressão possível na garrafa - preste especial atenção à garrafa de base de cultura após a esterilização de alta pressão, a esterilização a alta temperatura pode formar pressão negativa no interior, abre-se de repente e leve à rápida infiltração de ar externo.

O terceiro passo é a segunda desinfecção da abertura da garrafa e a ligação de operação, depois de remover toda a tampa da garrafa, imediatamente pegue uma pinça estéril para mergulhar em álcool com uma nova faixa estéril, limpe rapidamente o lado interno da abertura da garrafa e a rosca, em seguida, coloque a tampa invertida na área de operação estéril (dentro da tampa virada para cima, para evitar o contato com a poluição). A garrafa de meio de cultura após a abertura deve ser partilhada ou vacinada o mais rápido possível, se não for usada temporariamente, a boca da garrafa deve ser envolvida com uma membrana de vedação estéril, colocada em um frigorífico de 4 ° C para refrigeração, o tempo de refrigeração não deve exceder 24 horas, antes de usar novamente, você deve repetir as etapas de desinfecção da boca da garrafa.

A conclusão da operação é tão crítica quanto o tratamento de anomalias. Após a utilizaçãogarrafa base de cultivoSe o meio de cultura restante for contido, deve ser adicionado desinfetante clorado e depois descartado; Se a garrafa de base não aberta for virada durante a operação, cobra a área contaminada com algodão desinfetado e deixe em reposo por 30 minutos depois de pulverizar o desinfetante. Ao mesmo tempo, constrói um registro de operação, marcando a hora de abertura, o usuário e o estado do meio, fornecendo uma base retrospectiva para o experimento.

A "abertura correta" da garrafa de base de cultivo não é uma simples abertura física, mas uma operação concreta da filosofia estéril. Desde a desinfecção ambiental até a proteção da boca da garrafa, cada detalhe é uma linha de defesa importante para garantir a precisão e a segurança dos experimentos, especialmente nas áreas de alta precisão como a terapia celular e a farmacêutica microbiana, o processo de abertura padronizado é uma premissa fundamental para a confiabilidade dos resultados experimentais.