O meio de cultura ADF é composto principalmente por fosfato, glicose, ácido glicoso, ácido cítrico, etc., e contém muitos oligoelementos, como manganês, cobre, ferro, zinco e outros íons metálicos, após tratamento estéril, o reagente contém ACC (também conhecido como 1-aminoacetil-1-ciclopropanocarboxílico).
Mídio de cultivo ADFPrincipalmente composto por fosfato, ácido cítrico, glicose, ácido glicose, etc., e contém muitos oligoelementos, tais como manganês, zinco, cobre, ferro e outros íons metálicos, etc., após tratamento estéril. O reagente contém ACC (1-aminoacetil-1-ciclopropanocarboxílico). Base de cultura DF eMídio de cultivo ADFUsado em conjunto para analisar as propriedades da desaminase ACC das bactérias, as cepas são colocadas emMídio de cultivo ADFO crescimento no meio é melhor do que no DF, o que indica que a cepa é capaz de crescer com a fonte de nitrogênio ACC, ou seja, que a cepa é capaz de produzir desaminase ACC.
Materiais próprios:
1, DF meio de cultura, NDF meio de cultura (selecionado)
2 - Cama de agitação
3, copo de cor
4, espectrofotômetro
5, tubos centrífugos estériles ou vasos de cultura
6 Anéis de vacinação
Passos operacionais (somente para referência):
1, extrair um tubo centrífugo estéril ou vaso de cultivo, adicionar 3mlMídio de cultivo ADF、 DF meio (escolhido), NDF meio (escolhido).
Vacinar as cepas purificadas simultaneamente com as acimaMídio de cultivo ADF、 DF meio (escolhido), NDF meio (escolhido), colocado no agitador 150r/min agitação cultura 72h.
Observar o crescimento da mesma cepa em três diferentes meios de cultura ADF, DF (selecionado) e NDF (selecionado).
Determine o valor de OD de cada líquido de cultura com um espectrofotômetro a 600 nm para determinar o crescimento da cepa.
Resultado:
Quando a bactéria é colocadaMídio de cultivo ADFO crescimento no meio é significativamente melhor do que no DF, indicando que a cepa é capaz de crescer com ACC como fonte de nitrogênio, ou seja, que a cepa é capaz de produzir desaminase ACC.
Atenção:
Colocar no meio de cultura DF, a cultura no meio de cultura NDF é uma etapa opcional, não uma etapa necessária.
Para sua segurança e saúde, por favor, use roupa experimental e use luvas descartáveis para operação. Cuidado com a operação estéril para evitar a contaminação microbiana.
Se não houver espectrofotômetro, também pode ser usado para medição de calibradores enzimáticos comuns.