C57BL/6 Mídio específico para células

C57BL/6 Mídio específico para células

O C57BL/6O meio de cultura celular foi cuidadosamente otimizado pela equipe e, após testes a longo prazo, este produto pode manterO C57BL/6Excelente crescimento das células.

Este produto já está incluídoO C57BL/6Vários ingredientes necessários para o crescimento celular, sem a necessidade de adicionar qualquer ingrediente, podem ser usados ​​diretamenteO C57BL/6cultivo celular.

Principais ingredientes do produto:

DMEMBase de cultivo 400 ml

Soro de vaca de pneu especial 75 mL

GlutaMAX-1 de 5 ml

MEM NEAAAminoácidos não essenciais de 5 ml

Piruvato de sódioAcetonato de sódio de 5 ml

P/S de 5 ml

β-Ethanol 0,5 ml（1000X)

LIF 5μg（10ng / ml）

Transporte e conservação

Transporte: Transporte a baixa temperatura em caixas isolantes contendo sacos de gelo biológico

保存方法： 2℃～8℃， 保存2meses;

1(Recuperação)O C57BL/6Células: incluirá1mlTubo de congelamento da suspensão celular 37℃ banho de água agitar rapidamente para descongelar, adicionar4 mlO meio de cultura é misturado uniformemente. Em1000 RPMCentrifugação sob condições 4 minutos, remover o líquido, adicionar1-2mlSopre bem depois do meio de cultura. Em seguida, adicionar toda a suspensão celular na garrafa para a cultura durante a noite (ou adicionar a suspensão celular10 centímetrosNo prato, adicione aproximadamente8 mlcultivo durante a noite). No dia seguinte trocar e verificar.O C57BL/6Célulasdensidade.

2Transmissão celular: seO C57BL/6CélulasDensidade até80%-90%É possível fazer uma cultura de transmissão.

1. Eliminar a limpeza de cultivo, usando a que não contém íons de cálcio e magnésioPBSlavagemO C57BL/6Células1-2Segunda vez.

2. e1mllíquido digestivo (0,25% tripsina-0,53 mM EDTAem uma garrafa de cultivo, colocado em 37Digestão em caixa de cultivo1-2minutos e, em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, seO C57BL/6CélulasA maioria arredondar e descartar, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura depois de adicionar uma pequena quantidade de meio de cultura para terminar a digestão.

3. Pressione6-8 ml/diagarrafa suplementar o meio de cultura, suavemente bater bem depois de aspirar, em1000 RPMCentrifugação sob condições 4 minutos, descartar o líquido e adicionar1-2mlSopre bem após a cultura.

4. Pressione a suspensão celular. 1：2 Proporção para o novo conteúdo8 mlO meio de cultura em um novo prato ou garrafa.

3Congelação celular: esperaO C57BL/6CélulasQuando o crescimento é bom, as células podem ser congeladas. Por baixo.T25garrafas da categoria;

1. Quando as células congelam, depois de descartar o meio de cultura,PBSLimpar novamente e adicionar1mlAs células se arredondam, se retiram, se juntam.1mlO meio que contém soro termina a digestão e pode ser contado usando uma placa de contagem de células sanguíneas.

2. 4 minutos 1000rpmRemova a centrifugação. e1mlResuspender as células do soro, de acordo com o número de células Adicionar soro eDMSOmisturado suavemente,DMSOA concentração final é10%Densidade celular não inferior a1x106 / mlCada tubo de congelamento é congelado.1mlSuspensão celular, atenção ao congelamento do tubo para marcação.

3. Coloque o tubo de congelamento na caixa de refrigeração do programa e coloque-80 geladeira,2 Depois de uma hora, transferir para o armazenamento de nitrogênio líquido. Registre a localização do tubo de congelamento para a próxima coleta.

1.usarO C57BL/6CélulasDeve prestar atenção à operação estéril para evitar a poluição.

2.Este produto contém soro e antibióticos, se não houver necessidade especial de adicionar soro e antibióticos adicionais, pode ser usado diretamente.

3.Para manter o presenteO C57BL/6CélulasO excelente efeito de uso, não é aconselhável colocá-lo por muito tempo em temperatura ambiente ou ambiente de alta temperatura.

4.Todos os produtos devem ser usados durante o prazo de validade, além do prazo de validade, devem ser abandonados.

5.Este produto é somente para uso científico adicional e não pode ser usado em outros aspectos, tais como clínica.

6.Após o congelamento do meio de cultura, pode haver uma pequena quantidade de flocos, sem afetarO C57BL/6CélulasUtilização normal.