C8166-CD4 + LUC Linfocitos T Humanos Células de Leucemia + LUC

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Propriedades celulares

Espécie:recursos humanos (Homo sapiens）

Fontes organizacionais:Sangue (Sangue）

Doenças:Desconhecido (Desconhecido）

idade:Desconhecido (Desconhecido）

Sexo:Desconhecido (Desconhecido）

Tipo de célula:linfocitos (Linfoblastos）

Características de crescimento:Crescimento suspenso (Suspensão）

Conteúdo:>1x10^6Número de células

Especificações:T25garrafas ou1mlEmbalagem de tubo de congelamento

Uso: somente para uso científico.

Transporte e conservação

Transporte de gelo seco e recuperação de células sobreviventes

（1）1mlEmbalagem tubo congelador transporte de gelo seco, após recepção-80Depois de transferir o frigorífico para o nitrogênio líquido ou recuperação direta, se o gelo seco for descoberto volátil e limpo, a tampa da garrafa de congelamento cair, quebrar e as células estão contaminadas, entre em contato conosco imediatamente.

（2）T25As garrafas de recuperação de células sobreviventes são enviadas a temperatura normal e operadas de acordo com o tratamento após recepção das células.

Tratamento após a recepção das células

1Depois de receber as células,75%Desinfectar a parede da garrafa com álcoolT25A garrafa é colocada37℃ Posicionamento da caixa de cultivo2-3hSe a garrafa de cultura for danificada, derramamento de líquido e poluição celular, entre em contato conosco imediatamente após tirar uma foto.

2(Por favor, aqui4ou5XConfirmar o estado da célula sob o microscópio e tirar uma foto da célula recém-recebida (10×，20x) cada um2-3Uma fotografia da aparência da garrafa de cultivo é mantida como base para o estado da célula no momento da recepção pós-venda.

3Células: Células em37℃ colocado na caixa de cultivo2-3hObservando o crescimento e a adesão das células sob o microscópio, algumas células adesivas podem cair devido à vibração durante o transporte rápido e se agrupar após a queda. Observando a densidade de crescimento das células60%Abaixo, o meio de irrigação pode ser removido da garrafa (se as células não pegadas precisarem de reciclagem centrífuga, ressuspenda na garrafa original),Adicionar meios dedicados para a nova formulação6-8 mlColoque em uma caixa de cultura celular para continuar a cultivar. Se a densidade das células crescer70%-80%Além disso, as células podem ser processadas. Durante a transmissão, as células que caíram devido à vibração de transporte precisam ser recuperadas por centrifugação.

4Nota: o meio de cultura para transporte (meio de irrigação) não pode mais ser usado para cultivar células, por favor, substitua-o por uma nova formulação de acordo com as condições de cultura celular do manualUm meio dedicado para a cultura de células. Primeira sugestão de transmissão após recepção das célulasT25Cultivar garrafas1：2transmissão.

Preparação de meios de cultivo e condições de congelamento:

1）1640Meio de Cultura+10% FBSSoro bovino de alta qualidade+1% P/SDupla resistência+1%Acetonato de sódio+1%L-Glutamina

2） Condições de cultivo: fase gás: ar,95%o dióxido de carbono,5%Temperatura:37graus Celsius, a umidade do compartimento é70%-80%。

3） Liquido congelado:90%O soro,10% de DMSODisponível atualmente.

Segundo. Tratamento celular:

1） Recuperação de células congeladas:

Vai conter1mlTubo de congelamento da suspensão celular37℃ banho de água agitar rapidamente para descongelar, adicionar a conter4-6 mlO meio dedicado é misturado uniformemente em um tubo centrífugo. Em1000 RPMCentrifugação sob condições3-5 minutosElimina o líquido,O meio de cultura dedicado ressuspende as células. Em seguida, adicionar a suspensão celular6-8 mlMédio dedicado em garrafas (ou pratos)37Cultivo durante a noite. No dia seguinte, o crescimento celular e a densidade celular foram observados sob o microscópio.

2） Transmissão celular: se a densidade celular80%-90%É possível fazer uma cultura de transmissão.

Para a transmissão de células adherentes podem ser consultados os seguintes métodos:

1. Eliminar a limpeza de cultivo, usando a que não contém íons de cálcio e magnésioPBSLavar as células1-2Segunda vez.

2. Inscrever0.25％（W / V(Panprotease)EDTA de 0,53 mMem garrafas (T25garrafas1-2ml，T75garrafas2-3 ml(colocado em37Digestão em caixa de cultivo1-2minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e cair, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura depois de adicionar3-4 mlcontém10% FBSO meio de cultivo para terminar a digestão.

3. Depois de bater suavemente, em1000 RPMCentrifugação sob condições3-5 minutosEliminar o líquido, adicionar1-2mlSopre bem após a cultura. Pressione a suspensão celular.1：2proporção ao novoT25Na garrafa, adicione6-8 mlNovo configurado de acordo com as instruçõesMédio dedicado para manter a vitalidade do crescimento das células, transmissão posterior de acordo com a situação real1:2~1:5proporção realizada.

3Congelação das células:Recomendação após a recepção das células antes da cultura3Congelar um lote de sementes celulares para uso experimental posterior.

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