Analisador de Interações Biomoleculares Calypso

Analisador de Interações Biomoleculares CalypsoÉ um sistema de análise de interações biomacoléculares baseado em dispersão de luz de múltiplos ângulos de componente-gradiente (CG-MALLS), que caracteriza interações biomacoléculares de forma rápida, automática, não destrutiva e quantitativa, com muitas vantagens como alta repetitividade, alta sensibilidade e necessidade de modificação de amostras. O sistema pode analisar interações específicas e não específicas entre moléculas, a dinâmica da agregação ou dissolução, etc. Para interações específicas entre moléculas, o Calypso pode medir a sua auto-polimerização e a isomerização entre moléculas de amostras diferentes, obtendo uma constante de dissolução equilibrada Kd e quantidades químicas da reação. Para interações não específicas, seu coeficiente de força de manutenção pode ser medido e a força e intensidade das moléculas podem ser avaliadas. Além disso, o Calypso pode medir informações moleculares importantes como a dinâmica da reação, o peso molecular médio pesado da amostra e o raio médio da raiz quadrada.

O sistema de análise Calypso não requer modificações na amostra (marcação fluorescente, fixação, etc.) e é medido em um ambiente de solução, o que garante em grande medida o estado natural da amostra, obtendo resultados difíceis de obter com outras técnicas, caracterizando verdadeiramente as interações entre biomecromoléculas e facilitando a recuperação da amostra.

Como funciona o sistema analítico Calypso: Componente-Gradiente Multi-Angular Light Scattering (CG-MALS) é uma das novas técnicas analíticas que utilizam mudanças no peso molecular para medir as interações entre moléculas. A intensidade da luz dispersa das macromoléculas na solução depende da concentração da substância C e do peso molecular médio em peso Mw, com a composição intermolecular ocorrendo e Mw aumentando. Por exemplo, se todas as moléculas de proteínas aparecerem na forma de dímeros, a intensidade da luz dispersa também se duplicará. Para a agregação reversível, a proporção de proteína a composto de proteína monomérica atinge um valor de equilíbrio que depende da concentração inicial de cada proteína e das condições do tampão. Diferentes composições e concentrações podem resultar em MW diferentes. Ao analisar uma série de resultados de dispersão de luz de diferentes composições e concentrações, é possível determinar a forma de agrupação que ocorreu, a respectiva afinidade de ligação Ka e as constantes de equilíbrio de ligação e desligação. As proporções e medições de preparação manual são um trabalho oneroso, demorado e propenso a erros operacionais. O sistema Calypso superou as dificuldades de operação manual do CG-MALS através de um processo automatizado que combina a preparação, a entrega e a coleta e análise de dados de amostras, garantindo perfeitamente a repetitividade dos experimentos e resolvendo o problema da introdução de erros operacionais durante a preparação artificial de amostras.

Vantagens técnicas
1. amostragem inteligente, eliminando o problema de erro durante a amostragem manual;
Teste direto da amostra, sem marcação ou fixação, garante em grande medida o estado natural da amostra;
Tempo de medição rápido, resultados experimentais podem ser medidos em meia hora;
Aplicável à determinação de vários tipos de sistemas de reações biológicas;
Análise de auto-agregação e isoagregação molecular de diferentes amostras no sistema;
Pontos de medição química, análise de constantes de equilíbrio, faixa de constantes de equilíbrio: pM - mM;
Análise da dinâmica das reações;
8. combinado com o detector de laser, o detector de concentração, para medir rapidamente o Mw, Rg, A2, A3 da substância; Obter o mapa Zimm;

Analisador de Interações Biomoleculares CalypsoÁreas de aplicação:
Sistema de reação enzimática: interação enzimática com inibidores, dinâmica enzimática, etc.
Exploração de drogas: efeitos das drogas nas interações entre proteínas, etc.
Investigação imunológica: interação antígeno / anticorpo, etc.
Melhoria do método: determinar e ajustar o coeficiente de força de segunda dimensão para ajudar a purificar anticorpos, determinar a composição dos poliméricos, determinar as condições de solução óptimas da amostra, etc.
Especificação da ligação: ponto de medição química, constante de equilíbrio, intensidade iónica, pH ou efeito dos auxiliares na ligação de polímeros ou proteínas, etc.
Análise estrutural de complexos multimoleculares: caracterizar a força de ligação entre as moléculas durante a agregação macromolecular sob uma série de soluções tampão, mudanças de tempo e temperatura, e determinar sua relação quimiométrica, julgando sua configuração espacial por meio de Mw e Rg.