Kit de teste do vírus da peritonite infecciosa para gatos

Kit de teste de ácido nucleico de vírus intestinal (tipo genérico)

Especificações da embalagem 25T/caixa & 50T/caixa

[Princípio de teste]

Este kit é projetado para o genoma específico do precursor e da sonda molecular beacon e contém oDNANo caso,PCRA reação foi realizada e o sinal fluorescente foi liberado. Utilização do instrumentoPCROs sinais fluorescentes correspondentes são monitorados e saídos em tempo real durante o processo para realizar uma análise qualitativa dos resultados da detecção.

[Condições de armazenamento e prazo de validade]Proteção da luz-20℃A seguir conservar para evitar o congelamento repetido, prazo de validade12Um mês.

[Instrumentos aplicáveis]ABIsérie,Bio-Radsérie,Agilent Stratagene MXsérie,Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-GeneQuantificação de fluorescência em tempo real de múltiplos canaisPCRInstrumentação.

[Requisitos de amostra]

1. Usando uma amostra original para o teste. As amostras (líquido cerebrospinal, sangue venoso, líquido articular do paciente; sangue venoso de animais doentes, leite; colônias, fungos, etc.) devem ser recolhidas e usadas ​​como amostras originais em suspensão de água esterilizada dupla ou salina fisiológica para esterilização.

2. Se necessário após a sterilizaçãoPCRPara a detecção, a amostra original deve ser sterilizada usando um esterilizador seletivo.

3. Se a amostra não for detectada imediatamente após a coleta, pode ser colocada em2～8℃refrigeração durante a noite; Para conservação a longo prazo, os espécimes devem ser congelados.-20℃～-80℃。

[Método de teste]

1. Preparação do Reagente (Área de Preparação do Reagente)

（1Retire a caixa do frigorífico,Retire o reagente necessário para o experimento da caixa, derreta completamente e centrifuge instantaneamente para remover o líquido ligado à parede do tubo.

（2contabilização do número de reações necessárias para o experimento)ne calcular as várias doses necessárias para o experimento de acordo com o sistema de reação mostrado na tabela abaixo.

n =Número de controle negativo (1T）+Número de controle positivo (1T）+Reserva de erros (1T）+Número de amostras

（3Adicione o reagente acima em um tubo de centrifugação estéril e centrifuge instantaneamente depois de misturar completamente. Seguindo20 μL/O tubo divide o reagente paraPCRtubo de reação.

（4(Cobertura apertada)PCRDepois da tampa de reaçãoPCRO tubo de reação é transferido para a área de tratamento da amostra. Reagentes restantes devolvidos-20℃Conservar no frigorífico abaixo.

2.Preparação da amostra (área de processamento da amostra)

usarADN/ARNExtração do kit de reação para extrair ácido nucleico, operação específica de acordo com as instruções do kit de reação

3.Adicionando

Preparados acimaPCRAdicionar amostras tratadas separadamente ao tubo de amostra de reaçãoDNAcada5 μlO volume final25 microlitros/Tubo, tapa-o.PCRInstantânea baixa velocidade de centrifugação após a mistura da tampa de reação, transferir paraPCRno instrumento. Controle negativo e controle positivo5 μLControle negativo ou positivo fornecido com a caixa, com volume final de25 microlitros/Tubo, tapa-o.PCRInstantânea baixa velocidade de centrifugação após a mistura da tampa de reação, transferir paraPCRno instrumento.

4. PCR（PCRÁrea ampliada)

（1Preparação da área de processamento da amostraPCRTubo de reação, colocado em quantificação de fluorescência em tempo realPCRColoque a amostra no lugar correspondente e registre a ordem de colocação.

（2Ajuste os parâmetros relacionados à amplificação do ácido nucleico do instrumento na tabela abaixoPCRAmpliação.

Nota:ABISérie de fluorescênciaPCRNão selecionado durante a configuraçãoROXCorreção, configurar a seleção do grupo de extinçãoNenhum。

[Valor de referência (âmbito de referência)]

1.Determinação da eficácia do kit:

（1Controle positivo: típicoScurva de expansão ouCtValores≤35。

（2Controle negativo:CtValor >38Ou nenhumaCtValores, em linha reta ou ligeiramente inclinada, sem período de crescimento exponencial.

2.Os resultados da amostra determinam:

（1Positivo: resultados da amostraCtValores≤35Ou um período de crescimento exponencial.

（2Duvidoso: resultados do teste da amostraCtValor em35～38dentro do âmbito. A amostra deve ser testada repetidamente, por exemplo, repetindo os resultados do experimento.CtO valor ainda está35～38No intervalo, há um período de crescimento exponencial evidente, que é considerado positivo ou negativo.

（3Negativo: resultados da amostraCtValor >38Ou nenhumaCtValor.

[Explicação dos resultados do teste]

[Limitações do método de teste]

1. Os resultados falsos negativos podem ocorrer quando as concentrações de ácido nucleico em amostras de teste são inferiores às do kit.

As amostras inspecionadas podem ser manipuladas de forma inadequada durante a coleta, o transporte, o armazenamento e o processamento.DNAA degradação produz resultados falsos negativos.

A contaminação cruzada das amostras durante a coleta, o transporte, o armazenamento e o processamento pode resultar em resultados falsamente positivos.

[Indicadores de desempenho do produto] Detecção de produtos limitada a10³Cópias/mlProdutosCVValores≤3%。

[Atenção]

1. Os laboratórios que utilizam este kit devem ser administrados de acordo com as normas de gestão de laboratórios de teste de amplificação genética relevantes promulgadas pelas partes relevantes do Estado;

2. Para evitarRNAdegradação, o processamento da amostra deve ser0-4℃operar sob condições e testar imediatamente após a conclusão do experimento; Os materiais consumíveis dos aparelhos utilizados durante o processamento das amostras devem ser tratados sem nuclease;

Os artigos regionais são exclusivos e não podem ser usados ​​cruzadamente para evitar a poluição; Após o teste, a mesa de trabalho deve ser limpa imediatamente;

Quando o líquido de reação é absorvido, deve-se tentar evitar a produção de bolhas; cimaPCR Antes do instrumento, deve prestar atenção para verificar se os tubos de reação estão fechados para evitar que a evaporação do líquido cause resultados imprecisos;

Todos os reagentes do kit devem ser completamente fundidos e misturados a temperatura normal antes de serem usados e devem ser instantaneamente centrifugados;

Todos os controles negativos e positivos incluídos no kit devem ser transferidos para a área de preparação da amostra e armazenados separadamente antes da primeira utilização;

Para evitar interferências fluorescentes, o contato direto com as mãos nuas deve ser evitado.PCRtubo de reação e deve ser evitado emPCRQualquer marcação realizada no tubo de reação;

8. O suctor usado durante o processo de teste deve ser atingido diretamente10%Dentro do tanque de resíduos de ácido hipoclorado, o teste terminouPCR tubo de reação, tabu aberto e descartado após a esterilização junto com outros resíduos; Mesas de trabalho e vários equipamentos experimentais devem ser usados ​​regularmente 10%Ácido hipoclorado,75%álcool ou luz ultravioleta para desinfecção;

Os parâmetros relacionados à amplificação do instrumento devem ser definidos de acordo com os requisitos relevantes desta instrução; Reagentes diferentes não podem ser misturados; e utilização durante o período de validade.Produtos destinados apenas à pesquisa científica。