Calibração de instrumentos de microesferas fluorescentes de controle de qualidade diário CytoFLEX pronta para uso

A citologia de fluxo é uma técnica importante de análise celular que pode ser usada para contagem celular, análise de fenótipos celulares e classificação celular. Antes de realizar a citologia de fluxo, o controle de qualidade é muito importante para garantir a precisão e confiabilidade dos experimentos. Este artigo detalhará os métodos de controle de qualidade para a citologia de fluxo.

1. Calibração do sistema de fluidos

Os sistemas de fluidos incluem medidores de fluxo e sensores de pressão. Primeiro, o medidor de fluxo e o sensor de pressão são calibrados medindo a velocidade e a pressão reais. O fluido padrão é injetado no medidor de fluxo para medir a velocidade do fluxo e calibrar. A pressão padrão é injetada no sensor de pressão e o valor de saída é medido e, em seguida, calibrado.

Calibração do sistema laser

O sistema de laser de calibração foi projetado para determinar a localização do feixe de laser para obter leituras ópticas corretas no recipiente de amostra. Fixe a esfera de calibração em um tubo de amostra de citométria de fluxo, use o laser para irradiar a esfera de calibração e determinar a posição do feixe de laser.

Calibração do sistema óptico

A calibração do sistema óptico é fundamental para garantir a precisão das leituras ópticas durante a análise da amostra. O sistema óptico de calibração inclui detectores e sincronizadores. O detector é responsável por medir o número e o tamanho das partículas imunocorrentes na amostra. O sincronizador é responsável por garantir que o detector mede a amostra com a frequência correta.

4. Calibração de partículas padrão

O último passo na calibração de citométria de fluxo é a padronização da amostra usando um calibrador de partículas padrão. Teste partículas padrão em diferentes concentrações com tubos de amostra espaçosos. Após a calibração da curva padrão, o citométrio de fluxo pode calcular com precisão o número e as características de partículas imunocorentes específicas na amostra.

Calibração de citometria de fluxo

Limpe a sala de amostra do citometro de fluxo e verifique se o laser e o sistema de circuito óptico estão funcionando corretamente.

Verifique a precisão dos parâmetros de dispersão, fluorescência e tempo do citométrio usando substâncias padrão de partículas.

Limpeza e calibração do sistema líquido do citometro de fluxo para garantir o controle preciso da velocidade de fluxo e do volume da amostra.

Controle de qualidade do desempenho da citometria de fluxo

Verifique regularmente os parâmetros de desempenho do citométrio de fluxo, incluindo a sensibilidade à dispersão, a sensibilidade à detecção de fluorescência e a resolução temporal.

b. Verificar a precisão e a consistência da velocidade de fluxo usando partículas calibradas,

c. De acordo com as necessidades experimentais, usar partículas adequadas de inspeção de qualidade para ajustar a resolução e a intensidade

Preparação da amostra

Suspendência uniforme das amostras celulares para evitar a reunião celular e a deposição. Isso pode ser feito por meio da centrifugação e da ressuspensão da amostra.

Usar métodos de coloração celular de qualidade confiável para garantir a precisão e consistência da coloração.

Ajuste a concentração da amostra para evitar excesso de foco e perda de sinal de células muito diluídas.

Controle de qualidade da pureza da amostra

Usar o controle negativo e o controle positivo adequados para avaliar a pureza da coloração. Por exemplo, usar células não manchadas como controle negativo e células marcadas positivamente como controle positivo.

Verifique regularmente a consistência dos resultados de coloração para garantir que as células de controle negativo não tenham marcadores positivos

Calibração de instrumentos de microesferas fluorescentes de controle de qualidade diário CytoFLEX pronta para usoIntrodução em Chinês

A microesfera fluorescente QC diária CytoFLEX pronta para uso é uma suspensão de microesferas fluorescentes de 3 μm que pode ser usada para alinhamento óptico de citometria de fluxo e validação diária de sistemas de fluxo de líquidos. O produto está disponível em uma forma pré-diluída pronta para uso, com comprimentos de onda de emissão fluorescente entre 355nm e 800nm quando excitados nos seguintes comprimentos de onda: 355nm, 375nm, 405nm, 488nm, 561nm e 638nm. A mistura é suspensa em meio aquático contendo surfactantes e estabilizantes. O C65719 substitui a esfera fluorescente QC diária CytoFLEX B53230 para a plataforma de citometria CytoFLEX.

Calibração de instrumentos de microesferas fluorescentes de controle de qualidade diário CytoFLEX pronta para usoIntrodução em Inglês

CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres é uma suspensão de microesferas fluorescentes de 3 µm, que podem ser usadas para a verificação diária do alinhamento óptico do citometro de fluxo e do sistema de fluidica. Este produto é fornecido em um formato pré-diluído, pronto para uso, com uma emissão de fluorescência entre 355 nm e 800 nm quando excitado em: 355 nm, 375 nm, 405 nm, 488 nm, 561 nm e 638 nm. A mistura é suspensa em um meio aquoso contendo tensioativos e estabilizadores. Clique aqui para CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres Instruções de Uso. Este produto substitui o CytoFLEX Daily QC Fluorospheres, B53230, e deve ser usado com a plataforma de citometro CytoFLEX.

Calibração de instrumentos de microesferas fluorescentes de controle de qualidade diário CytoFLEX pronta para usoProcesso operacional

1Use o conjunto de filtros recomendado pelo fabricante para detectar os parâmetros de fluorescência apropriados (consulte a Plataforma CytoFLEX IFU).

2Certifique-se de que o arquivo de valor alvo para o lote específico de CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres tenha sido carregado no software do citometro de fluxo. Consulte o seu IFU da Plataforma CytoFLEX para obter instruções sobre a importação do seu arquivo de valor alvo específico do lote.

3Misture vigorosamente o frasco para injetáveis CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres usando um misturador vortex por 2-3 segundos.

4Adicionar:

4. 10 gotas de fluorosferas para um tubo se usar o modo de injeção de amostra semiautomático (tubo).

b. 3-4 gotas de fluorosferas em um poço para placa padrão de 96 poços ou placa de poço profundo para o modo de injeção do carregador de placas.

5Execute o protocolo de Controle de Qualidade (QC) de acordo com as instruções na sua Plataforma CytoFLEX (IFU).

Calibração de instrumentos de microesferas fluorescentes de controle de qualidade diário CytoFLEX pronta para usoPrecauções

Os produtos são produtos prontos para uso, sem necessidade de formulação adicional, uso direto.

2. Se partilhado, bem selado e usado dentro de 5 dias.

Microesferas fluorescentes permanecem em posição por um longo período de tempo e se depositam naturalmente. Assegure-se de que a esfera de fluorescência seja balanceada adequadamente antes de ser usada.

Não use esferas fluorescentes que excedam o prazo de validade na etiqueta da garrafa da amostra.

Os produtos não devem ser congelados.

Use boas práticas de laboratório (GLP) ao lidar com este reagente.

Este reagente contém conservante, se ocorrer contato com a pele ou os olhos, por favor, limpe profundamente com água em tempo útil.

O objetivo do relatório de calibração de citométria de fluxo é registrar todos os detalhes do processo de calibração de citométria de fluxo. O relatório deve incluir as seguintes informações:

1. Data e hora

2. Dados de calibração do sistema de fluidos

Dados de calibração do sistema laser

4. Dados de calibração do sistema óptico

5. Dados padrão de calibração de partículas

6. Dados de calibração de esferas de calibração

Qualquer problema ou anomalia detectada durante a calibração

Nome e assinatura do técnico que realiza a calibração