Indução do modelo de pancreatite aguda com Ceruletide

Rano de chuva（CeruletidaModelo de doença animal que induz pancreatite aguda

Introdução:

Pancreatite aguda(Pancreatite aguda, AP)É uma doença abdominal acuta clinicamente comum, causas complexas, taxa de mortalidade até5%~10%Doença grave.APMortalidade elevada20%~30%O mecanismo da doença ainda não é descrito e não há tratamento específico. atualmente vivo.APOs métodos mais comuns para a produção de modelos animais são, aproximadamente, a ligação pancástica, o fechamento duodecimal, a perfuração pancástica, a injeção submembranária pancástica, a injeção pancástica combinada com a infusão intravenosa, a injeção intra-abdominal com lipopropolissacar combinada com o frog peel, etc.

Rano de chuva(Caeruleina)É uma função e composição semelhante à cistrina biliar(colecistocinina，CCK)Moléculas reguladoras do estômago que estimulam a excessiva secreção de células pancreáticas, tornando a separação intracelular de panprotease e hidrolisase lisosomal perturbado, histoproteinaseBAtivada de forma dependente, a atividade da pansina pode, por sua vez, levar à ativação do enzigênio, causando danos celulares causados ​​por uma série de atividades da protease. As respostas inflamatórias causadas pela autodigestão do tecido pancreático levantam células inflamatórias, liberando fatores inflamatórios, causando ainda mais respostas inflamatórias graves, locais ou até globais.

Processo operacional:

1. Selecionar6Masculino de idade semanalO C57BL/6ratos, criados emSPFambiente, manutenção12Ciclo de luz e escuridão por hora, temperatura 20℃Umidade40%-60%Livre para comer e beber água.

2. Implementação de Modelagem

1）pré-tratamento animal

Antes da modelagem8Os ratos foram tratados com jejum por horas (sem água), reduzindo a interferência do conteúdo gastrointestinal na detecção do pâncreas.

2）Preparação de frogs

Use água salina fisiológica para diluir a rainfroin até a concentração de trabalho.

3injeção abdominal

Pressione100ug / kgDose de peso corporal para cada1Horas de injeção abdominal para ratos1Sub-frog, injeção contínua8Segundas (várias injeções de baixas doses simulam o processo progressivo de pancreatite aguda humana e evitam a morte aguda causada por uma única dose alta).

4)Comparação em branco

Os ratos do grupo de controle foram injetados com uma quantidade equivalente de água salina fisiológica ao mesmo tempo, excluindo o efeito de estresse da própria operação da injeção.

5Observação após modelagem e coleta de amostras

Após a modelagem, o estado mental, a atividade, o consumo de água e as características das fezes dos camundongos foram observados de perto para avaliar a resposta geral ao estresse. Injetação de frogo de chuva24Horas depois, execute os ratos e colete amostras críticas:

a.Tecido pancreático

Rapidamente separar o pâncreas, pesando a parte posterior fixada em10%Formalina neutra (para cortes patológicos), parcialmente congelada em nitrogênio líquido (para detecção molecular).

b.Amostras de sangue

Sério separado por centrifugação após extração de sangue da órbita ocular para a detecção de amilasas, lipases e fatores inflamatórios.

c.Outras amostras

De acordo com as necessidades da pesquisa, amostras de cólon, fezes e outros podem ser coletadas para análise de associação.

3.Verificação do modelo:

1)Lesões histopatológicas pancreáticas

a.AtravésEleA coloração observa mudanças morfológicas no pâncreas, e o grupo modelo observa distúrbios da estrutura celular do folículo pancreático, edema, necrosis e infiltração de células inflamatórias em grande número.

b.Grupo modelo pancreático/Aumento da proporção de peso, indicando danos ao inchaço do pâncreas.

2)Aumento dos níveis séricos de enzimas digestivas

A atividade da amilase sérica e lipase no grupo modelo foi significativamente maior do que no grupo de controle em branco, e as diferenças foram estatisticamente significativas.p<0.0001Verificou-se que a danificação das células pancreáticas levou à liberação de enzimas digestivas no sangue.

3)Liberação de fatores inflamatórios séricos

Grupo de modelos de fatores inflamatórios séricosIL-6、TNFAs concentrações de alfa aumentaram significativamente, indicando que a rainfrog induziu com sucesso a propagação total da inflamação do pâncreas.

Informação do produto:

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