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Endereço
Xangai Pu Dongchuan Sha Town Chuansha Road 6619 Xangai partir do reagente experimental Co., Ltd.
Reagentes experimentais de partida de Xangai Co., Ltd.
Xangai Pu Dongchuan Sha Town Chuansha Road 6619 Xangai partir do reagente experimental Co., Ltd.
Empresa KlenTaq-SA enzima de sequenciamento é uma proteína recombinante preparada por expressão recombinante e purificação em várias etapas.
Definição de AtividadeA unidade ativa é 72℃Baixa. Buffer de PCR 1×AM1,30 minGeneral Interior 10 nmole dNTPEnzimas necessárias para a mistura de substâncias insolúveis em ácidos.Características
1) Particularmente adequado ddNTP Reações de incorporação de nucleótidos modificados
Comparação com o comprimento total Taq DNA Polimerase. Esta enzima tem baixa atividade.
Âmbito de aplicação
ddNTP Lei de rescisãoDNA Sequência (Sequência de geração)
Método de extensão da reação de pirofosforólise SNP Análise
Controle de Qualidade
Após rigorosos testes de controle de qualidade, o produto tem a maior atividade e pureza.
Tampon de armazenamento enzimático
Tris-HCl 20 mM (pH 8,0), KCl 100 mM, DTT 1 mM, EDTA 0,1 mM, Nonidet P40 0,5%, Tween20 0,5% e glicerol 50%.
Exemplos de aplicação
Os seguintes exemplos de reação são 50 μlpadrão PCRsistema, apenas para referência. real PCRAs condições devem ser otimizadas de acordo com o modelo, o desenho e o tamanho do segmento de destino para determinar as melhores condições de resposta.
1)Prepare o sistema de reação na tabela abaixo
Componente |
Volumepor μl |
Concentração final |
Buffer PCR de 10×AM 1 |
5 |
1× |
dNTPs(2,0 milímetros) |
5 |
0,2 milímetros |
Primário F(10 μM) |
1.5 |
0,3 μM |
PrimárioR(10 μM) |
1.5 |
0,3 μM |
Modelo |
Varável* |
/ |
KlenTaq-Senzimas de sequenciamento (5U / μl) |
0.5 |
2.5U |
ddH2O |
variável |
/ |
Volume total |
50 |
/ |
Parâmetros de dosagem de DNA do modelo (sistema de reação de 50 μl):
Genoma humanoDNA100-1000 ng ; DNA genômico microbiano 10-100ng;PCR produz kanyam caracteristicamente irritado; 1 ng-10% de; DNA plasmídico 5-30 ng; ADNc da reação RT 1-5 μl.
2)Reagir nas seguintes condições,
95℃ |
2-5 minutos |
|
95℃ |
15 segundos |
25-35 ciclos |
55~72℃ |
20 segundos |
|
72℃ |
1kb / min |
|
72℃ |
5 minutos |
3)Detecção de eletróforese em gel de aglutinaPCR produtos ou operações posteriores para fins experimentais.
Precauções1. PCR Condições e tipos selvagens Taq DNA Polimerase semelhante, para específicos DNA A reação de sequência pode precisar de otimização.Capacidade de amplificação da enzima mais selvagem TAq DNA A polimerase diminuiu.PCR Produção reduzida, não recomendado para uso convencional PCR。3. Não disponível Taqman Método de sonda q-PCR。