Atividade da Deshidrogenase Láctica (Método WST-8)

Deshidrogenase láctica (LDHPrincípios de Determinação de Traceabilidade AtivaÉ através do teste.LDHCatalisar o processo de redução do ácido acetónico em ácido lácticoNADHA quantidade de produção é medida indiretamente.LDHatividade.

O processo específico é o seguinte:

Princípio da Reação:EmLDHSob o papel,NAD+Restaurado geradoNADH。NADHeO WST-8A interação produz a cor, o que resulta na comparação de cores (λ).máximo=450 nm).

Condições de Reação:LDHSeráNADRestaurar paraNADH，NADHeO WST-8A interação produz cores. Esta reação é realizada no gelo e os componentes (comotampão ensaio、Lactato、NAD、O WST-8、MelhoradorDeve ser retirado do frigorífico e equilibrado a temperatura ambiente antes do experimento, e o processo deve ser mantido à luz durante todo o processo.

Medição da absorção:Em450 nmMedir a absorção, absorção eLDHA atividade é proporcional e pode ser determinada por comparação cromáticaLDHatividade.

Etapas experimentais e equipamentos necessários:

Passos experimentais:Preparação de fluido de trabalho (1×tampão ensaio、NAD、O WST-8、MelhoradoreLactatomistura uniforme), adicione o líquido de trabalho96Placa de perfuração ou placa de ceramico de vidro, adicionando amostras a serem testadas,37A absorção é medida após um certo tempo de incubação a temperatura constante.

Equipamento necessário:Calibrador enzimático ou espectrofotômetro visível450 nmabsorção local), termostato, máquina de congelamento, centrífuga de baixa temperatura,96Placas de perfuração ou vasos de vidro em traços, pistola e cabeça de pistola ajustáveis, água deionizada, amortiguador (se for uma amostra de tecido).

Observações experimentais‌：

Conservação do Reagente:Os componentes (comotampão ensaio、Lactato、NAD、O WST-8、MelhoradorÉ necessário conservar no gelo para evitar o congelamento repetido.

Observações operacionais:Todo o processo experimental deve ser realizado no gelo para evitar que a luz afete os resultados.É.