Multiple Immunohistomic Coloração

NegociávelAtualização em05/06

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Visão geral

Princípio de coloração imunohimical múltipla: o uso do princípio de ligação específica de antígeno e anticorpo para que o antigeno se ligue ao antígeno alvo no tecido ou na célula; Adicionar o marcador de HRP, que pode se ligar a um anti-especificidade, formando um complexo de "antígeno-um anti-marcador de HRP", adicionando o corante fluorescente de tisamina, na presença de HRP e *, a tisamina é ativada e covalente com os resíduos de proteína perto do antígeno, uma grande quantidade de fluorescência depositada na seção de ligação antígeno-anticorpo, permitindo que o sinal seja amplificado, repetindo as etapas acima várias vezes, cada vez que o uso de um anti diferente e o corante fluorescente de tisamina correspondente, pode ser alcançado para vários alvos

Detalhes do produto

Multiple Immunohistomic ColoraçãoPassos experimentais

Preparação da amostra: Tratamento, incluindo cortes de parafina, cortes congelados ou reptiles celulares, como fixação, reparação de antígenos, bloqueio de peroxidases endógenas, etc.

Uma incubação: gotas adicionadas à diluição de anticorpos para diluir bem uma incubação dentro da caixa úmida de proteção de luz por um certo tempo.

Incubação secundária anti: após a lavagem, adicionar o marcador HRP secundário anti-anti com a genéria correspondente anti-anti, incubar à temperatura ambiente com proteção contra a luz.

Tintura fluorescente TSA: gotas de tintura fluorescente caseamina, lavado após uma reação a temperatura ambiente por algum tempo.

Lavagem de anticorpos: Use métodos como reparação térmica ou lavagem de anticorpos para lavar a rodada anterior de anticorpos para a próxima rodada de marcação.

Marcação repetida: Repita as etapas acima para obter marcação múltipla usando diferentes corantes anti e fluorescentes.

Núcleo e vedação da célula de reconteção: reconteção do núcleo da célula com tintores nucleares como DAPI, gota a gota com vedação do comprimido de extinção antifluorescente.

Fotografia espelhada: observar e coletar imagens sob dispositivos como o microscópio fluorescente.

Multiple Immunohistomic ColoraçãoPrecauções

Seleção e otimização de anticorpos: selecionar anticorpos altamente específicos e comprovados e otimizar a concentração de anticorpos e o tempo de incubação.

Problemas de mascaramento epitópico: Atenção à sequência de coloração dos anticorpos para evitar o fenômeno de mascaramento epitópico, que pode ser resolvido ajustando a sequência dos anticorpos ou usando outros métodos.

Configurações de controle experimental: Configure controles positivos e negativos para garantir a precisão e confiabilidade dos resultados experimentais.

Controle do multiplicador de amplificação do sinal: de acordo com as necessidades experimentais específicas e a intensidade do sinal fluorescente, escolha razoável se adicionar ou não amplificadores TSA para controlar o multiplicador de amplificação do sinal.

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