NCI-H3122 + LUC Células humanas de câncer de pulmão de células não pequenas + LUC

NCI-H3122 + LUC Células humanas de câncer de pulmão de células não pequenas + LUC

Propriedades celulares

Espécie:recursos humanos (Homo sapiens）

Fontes organizacionais:Pulmão (Pulmão）

Doenças:câncer (Adenocarcinoma）

idade:Desconhecido (Desconhecido）

Sexo:Homem (Masculino）

Tipo de célula:células epidérmicas (Epitelial-semelhante）

Características de crescimento:Crescimento da parede (Aderente）

Conteúdo:>1x10^6Número de células

Especificações:T25garrafas ou1mlEmbalagem de tubo de congelamento

Uso: somente para uso científico.

Transporte e conservação

Transporte de gelo seco e recuperação de células sobreviventes

（1）1mlEmbalagem tubo congelador transporte de gelo seco, após recepção-80Depois de transferir o frigorífico para o nitrogênio líquido ou recuperação direta, se o gelo seco for descoberto volátil e limpo, a tampa da garrafa de congelamento cair, quebrar e as células estão contaminadas, entre em contato conosco imediatamente.

（2）T25As garrafas de recuperação de células sobreviventes são enviadas a temperatura normal e operadas de acordo com o tratamento após recepção das células.

Tratamento após a recepção das células

1Depois de receber as células,75%Desinfectar a parede da garrafa com álcoolT25A garrafa é colocada37℃ Posicionamento da caixa de cultivo2-3hSe a garrafa de cultura for danificada, derramamento de líquido e poluição celular, entre em contato conosco imediatamente após tirar uma foto.

2(Por favor, aqui4ou5XConfirmar o estado da célula sob o microscópio e tirar uma foto da célula recém-recebida (10×，20x) cada um2-3Uma fotografia da aparência da garrafa de cultivo é mantida como base para o estado da célula no momento da recepção pós-venda.

3Células: Células em37℃ colocado na caixa de cultivo2-3hObservando o crescimento e a adesão das células sob o microscópio, algumas células adesivas podem cair devido à vibração durante o transporte rápido e se agrupar após a queda. Observando a densidade de crescimento das células60%Abaixo, o meio de irrigação pode ser removido da garrafa (se as células não pegadas precisarem de reciclagem centrífuga, ressuspenda na garrafa original),Adicionar meios dedicados para a nova formulação6-8 mlColoque em uma caixa de cultura celular para continuar a cultivar. Se a densidade das células crescer70%-80%Além disso, as células podem ser processadas. Durante a transmissão, as células que caíram devido à vibração de transporte precisam ser recuperadas por centrifugação.

4Nota: o meio de cultura para transporte (meio de irrigação) não pode mais ser usado para cultivar células, por favor, substitua-o por uma nova formulação de acordo com as condições de cultura celular do manualEspecialO meio de cultivo para cultivar células. Primeira sugestão de transmissão após recepção das célulasT25Cultivar garrafas1：2transmissão.

Preparação de meios de cultivo e condições de congelamento:

1） 1640Meio de Cultura+ 10% FBS + 1% P / SDupla resistência

2） Condições de cultivo: fase gás: ar,95%o dióxido de carbono,5%Temperatura:37graus Celsius, a umidade do compartimento é70%-80%。

3） Liquido congelado:90%O soro,10% de DMSODisponível atualmente.

Segundo. Tratamento celular:

1） Recuperação de células congeladas:

Vai conter1mlTubo de congelamento da suspensão celular37℃ banho de água agitar rapidamente para descongelar, adicionar a conter4-6 mlEspecialO meio de cultura é misturado uniformemente no tubo centrífugo. Em1000 RPMCentrifugação sob condições3-5 minutosElimina o líquido,EspecialO meio de cultura ressuspende as células. Em seguida, adicionar a suspensão celular6-8 mlEspecialO meio de cultura em garrafas (ou pratos)37Cultivo durante a noite. No dia seguinte, o crescimento celular e a densidade celular foram observados sob o microscópio.

2） Transmissão celular: se a densidade celular80%-90%É possível fazer uma cultura de transmissão.

Para a transmissão de células adherentes podem ser consultados os seguintes métodos:

1. Eliminar a limpeza de cultivo, usando a que não contém íons de cálcio e magnésioPBSLavar as células1-2Segunda vez.

2. Inscrever0.25％（W / V(Panprotease)EDTA de 0,53 mMem garrafas (T25garrafas1-2ml，T75garrafas2-3 ml(colocado em37Digestão em caixa de cultivo1-2minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e cair, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura depois de adicionar3-4 mlcontém10% FBSO meio de cultivo para terminar a digestão.

3. Depois de bater suavemente, em1000 RPMCentrifugação sob condições3-5 minutosEliminar o líquido, adicionar1-2mlSopre bem após a cultura. Pressione a suspensão celular.1：2proporção ao novoT25Na garrafa, adicione6-8 mlNovo configurado de acordo com as instruçõesEspecialO meio de cultura para manter a vitalidade do crescimento das células, transmissão posterior de acordo com a situação real1:2~1:5proporção realizada.

3Congelação das células:Recomendação após a recepção das células antes da cultura3Congelar um lote de sementes celulares para uso experimental posterior.

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