Kit de teste do fator de necrose tumoral beta (TNF-beta) em ratos

Especificações:96T/48T

Utilização do produto:Apenas para testes científicos e não para uso clínico

Serviços da empresa:ELISAKit de Reação Teste grátis

Tipo de amostra de teste: soro, plasma, urina, homoplasma de tecido, soro supracelular, líquido de lavagem, fezes, etc.

Biologia de LipoEspécies de fornecimento incluem: ratos, ratos, porcos, coelhos, cães, macacos, ovelhas, vacas, galinhas, patos, gansos, plantas, peixes, kits de ELISA de insetos, etc.

Kit de teste do fator de necrose tumoral beta (TNF-beta) em ratos

Princípio de teste do kit de fator de necrose tumoral beta (TNF-beta) em ratos：
O kit de fator de necrose tumoral beta (TNF-beta) em ratos é um ensaio de imunoassorção ligado a fase sólida (ELISA). Primeiro, a substância a ser testada e os anticorpos marcados pela biotina são aquecidos simultaneamente. Após a lavagem, adicionar a HRP marcada com afinidade. Depois de aquecer e lavar, remova os compostos enzimáticos não ligados e, em seguida, adicione o substrato A, B e os compostos enzimáticos ao mesmo tempo. gerar cores. A intensidade da cor é proporcional à concentração da substância a medir na amostra.

Fator de necrose tumoral beta em ratos (TNF-beta)Conteúdo do kit e sua formulação

Fator de necrose tumoral β (TNF-β) em ratos
1) Água destilada.
2）加样器： 5ul, 10ul, 50ul, 100ul, 200ul, 500ul, 1000ul.
3) Oscilladores e agitadores magnéticos, etc.

Segurança do kit de fator de necrose tumoral beta (TNF-beta) em ratos
1) Evite o contato direto com o líquido terminante e o substrato A, B. Depois de entrar em contacto com esses líquidos, enxague com água o mais rápido possível.
2) Não coma, fume ou use cosméticos durante o experimento.
3) Não absorva qualquer ingrediente da caixa com a boca.

Precauções para a operação do kit de fator de necrose tumoral beta (TNF-beta) em ratos
1) O reagente deve ser armazenado de acordo com as instruções do rótulo e restaurado a temperatura ambiente antes de ser usado. Os produtos padrão após diluição devem ser descartados e não podem ser conservados.
2) As placas não utilizadas no experimento devem ser imediatamente colocadas de volta no saco e seladas para evitar deterioração.
3) Outros reagentes não utilizados devem ser embalados ou cobertos. Não misture diferentes lotes de reagentes. Utilização antes da conservação.
4) Use uma cabeça de aspiração única para evitar a poluição cruzada, quando aspirar o líquido final e o líquido de substância A, B, evite o uso de amostradores com partes metálicas.
5) Configure o líquido de lavagem com um recipiente de plástico limpo. Misture completamente os ingredientes e amostras do kit antes de usar.
6) a placa de marcação enzimática de lavagem deve secar completamente, não coloque o papel de absorção de água diretamente no orifício de reação de marcação enzimática para absorver água.
7) O substrato A deve ser volátil para evitar a abertura da tampa por um longo tempo. O substrato B é sensível à luz para evitar a exposição prolongada à luz. Evite o contato com as mãos, é tóxico. O valor de OD deve ser lido imediatamente após a conclusão do experimento.
8) A ordem de adição do reagente deve ser consistente para garantir o mesmo tempo de crescimento de temperatura em todas as placas de reação.
9) Operação de criação térmica de acordo com o tempo, a quantidade e a ordem indicadas nas instruções.

Coleta, tratamento e conservação de amostras do kit de fator de necrose tumoral beta (TNF-beta) em ratos
1) soro - evitar qualquer estímulo celular durante a operação. Usar tubos de ensaio sem termogênios e endotoxinas. Após a coleta de sangue, o soro e os glóbulos vermelhos foram separados rapidamente e cuidadosamente por centrifugação de 1000 x g durante 10 minutos.
2) Plasma --- EDTA, citrato, hepatina plasma pode ser usado para a detecção. 1000 x g de centrifugação durante 30 minutos para remover as partículas.
3) líquido sobre a célula --- 1000 x g centrifugação durante 10 minutos para remover partículas e polímeros.
4) homogeneização do tecido --- adicionar o tecido à quantidade adequada de água salina fisiológica para triturar. Centrifugar 1000 x g durante 10 minutos e retirar o líquido
5) Conservação - se a amostra não for usada imediatamente, ela deve ser dividida em pequenas partes a -70 ° C para evitar o congelamento repetido. Sempre que possível, não use hematologia ou hiperlipidemia. Se houver grandes quantidades de partículas no soro, centrifuge ou filtre antes da detecção. Não descongelar a 37 ° C ou mais. Deve descongelar-se a temperatura ambiente e assegurar que as amostras sejam descongeladas adequadamente e uniformemente.

Preparação do reagente do kit do fator de necrose tumoral β (TNF-β) em ratos
1) Produtos padrão: a diluição de série de produtos padrão deve ser preparada no momento do experimento e não pode ser armazenada. Oscillar o produto padrão antes de diluir.
2) diluição do tampão de lavagem (50 x): diluir 50 vezes com água destilada.

Etapas de operação do kit de fator de necrose tumoral beta (TNF-beta) em ratos
1) Antes de usar, misture todos os reagentes adequadamente. Não faça com que o líquido produza uma grande quantidade de espuma para evitar a adição de uma grande quantidade de bolhas durante a amostragem, gerando erros na amostragem.
2) Determine o número de placas necessárias com base no número de amostras a serem testadas mais o número de itens padrão. Cada padrão e buraco em branco é recomendado para fazer um buraco composto. Cada amostra é determinada de acordo com o seu próprio número, pode usar o furo composto para fazer o furo composto. A amostra foi diluída com um diluído de amostra 1: 1 e adicionada a 50 ul no buraco de reação.
3) Adicionar 50ul do produto padrão diluído no buraco de reação e adicionar 50ul da amostra a ser testada no buraco de reação. Adicione imediatamente 50ul de anticorpos marcados por biotina. Tape a placa de membrana, oscile suavemente e misture, 37 ° C durante 1 hora.
4) Elimine o líquido dentro do buraco, encha cada buraco com o líquido de lavagem, oscile por 30 segundos, elimine o líquido de lavagem e use papel de absorção de água para secar. Repita esta operação três vezes. Se lavar com uma máquina de lavar louças, o número de lavagens aumenta uma vez.
5) Adicione 80 ul de afinidade-HRP para cada orifício, oscile suavemente e misture a temperatura de 37 ° C durante 30 minutos.
6) Elimine o líquido dentro do buraco, encha cada buraco com o líquido de lavagem, oscile por 30 segundos, elimine o líquido de lavagem e use papel de absorção de água para secar. Repita esta operação três vezes. Se lavar com uma máquina de lavar louças, o número de lavagens aumenta uma vez.
7) Adicione 50ul de substância A e B a cada buraco, oscile suavemente e misture durante 10 minutos a 37 ° C. Evite a luz.
8) Retire a placa enzimática e adicione rapidamente o líquido de terminação de 50ul, o resultado deve ser medido imediatamente após a adição do líquido de terminação.
9) Determine o valor de OD de cada orifício a um comprimento de onda de 450 nm.