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Kit qPCR de sondagem genética Gos9 de origem endógena do arroz sem ginseng

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Visão geral

O kit qPCR (sem ginseng) é usado principalmente para detectar o conteúdo do gene Gos9 endógeno no arroz e produtos de arroz, e pode ser usado em instituições de pesquisa científica, empresas de sementes, laboratórios de teste de alimentos, etc. Utilizado para a identificação de variedades de arroz, análise de pureza de sementes, teste de ingredientes geneticamente modificados de alimentos e outros aspectos. Detectando os níveis de expressão do gene Gos9, também é possível estudar os mecanismos reguladores da expressão genética do arroz em diferentes estágios de crescimento e desenvolvimento, em diferentes condições ambientais.

Detalhes do produto

Kit qPCR de sondagem genética PLD endogênica do arroz (sem ginseng endogênico)



Kit qPCR de sondagem genética PLD endogênica do arroz (sem ginseng endogênico)Produtos e características:
Usado principalmente para detectar o conteúdo do gene Gos9 endógeno no arroz e produtos de arroz, pode ser usado em instituições de pesquisa científica, empresas de sementes, laboratórios de teste de alimentos, etc. Utilizado para a identificação de variedades de arroz, análise de pureza de sementes, teste de ingredientes geneticamente modificados de alimentos e outros aspectos. Detectando os níveis de expressão do gene Gos9, também é possível estudar os mecanismos reguladores da expressão genética do arroz em diferentes estágios de crescimento e desenvolvimento, em diferentes condições ambientais.Tem as seguintes características:

Quando aberto, o usuário só precisa fornecer um modelo de DNA de amostra.

Os primeiros e as sondas são otimizados para alta sensibilidade analítica e podem atingir 100 cópias/reações.

Fornecer controle positivo para facilitar a distinção de amostras falsas negativas.

Alta especificidade, os primeiros são projetados com base em áreas altamente conservadas do DNA do gene PLD endógeno do arroz e não interagem com outros DNA.

Pode ser usado tanto para teste qualitativo quanto para teste quantitativo. Para quantificação, seu intervalo linear não é inferior a 5 séries de quantidade.

Este produto é suficiente para 50 reações de PCR por fluorescência quantitativa por sonda de sistema de 20 μL.

Este produto só pode ser usado para pesquisa científica.

Especificações e ingredientes:

Ingredientes

Número

especificação

Materiais de embalagem

2 x Sonda qPCR MasterMix

Reagentes 1

0,5 ml

0,5 mL tampa de cor original

Diluído de modelo para PCR fluorescente

Reagentes 2.

1 milha

Tampa verde de 1,5 ml

Água ultra-pura

Reagentes 3.

1 milha

Tampa azul de 1,5 ml

Arroz endogenous PLD gene qPCR precursor-sonda mistura líquida

Reagentes 4.

150 μL

Tubo marrom de 0,5 ml

Controle positivo do gene PLD endogênico do arroz qPCR

(1 x 10E7 cópias/μL)

Reagentes 5.

50 μL

0,5 ml tampa amarela

Manual de utilização


Uma.

Nada

Transporte e armazenamento:Transporte a baixa temperatura, conservação de -20 ° C, período de conservação de 12 meses.
Reagentes próprios amostras de DNA.

水稻内源Gos9基因探针法qPCR试剂盒不含内参

Kit qPCR com sonda pUbi para componentes GMO (sem ginseng)Uso:
I. Dilução de amostras de curva padrão(Tome por exemplo as 6 diluições de 10 vezes 10E1-10E6 cópias/μL). Devido às altas concentrações do produto padrão, as seguintes diluições devem ser realizadas em áreas separadas e nunca contaminar a amostra ou outros componentes deste kit). Para aumentar a estabilidade do produto e evitar a propagação de patógenos infecciosos, este produto não fornece amostras vivas como controle positivo, apenas fragmentos de DNA não infeccioso como controle positivo.

Marce 6 tubos centrífugos, 6, 5, 4, 3, 2 e 1, respectivamente.

2. Adicione 45 μL de diluição de modelo PCR fluorescente com a cabeça de pistola de núcleo, preferivelmente com a cabeça de pistola de núcleo, abaixo).

3. Adicione 5 μL de 1 x 10E7 cópia/μL de controle positivo (kit fornecido) no tubo 6 e agite completamente durante 1 minuto para obter uma amostra de curva padrão de 1 x 10E6 cópia/μL. Coloque no gelo.

4. Alterar a cabeça, adicionar 5 μL de 1 x 10E6 cópia/μL de controle positivo (diluído anteriormente) no tubo 5, agitar completamente durante 1 minuto para obter 1 x 10E5 cópia/μL de amostra de curva padrão. Coloque no gelo.

5. Alterar a cabeça, adicionar 5 μL de 1 x 10E5 cópia/μL de controle positivo (diluído anteriormente) no tubo 4, agitar completamente durante 1 minuto para obter uma amostra de curva padrão de 1 x 10E4 cópia/μL. Coloque no gelo.

Repita a operação acima até obter uma amostra de curva padrão de 6 diluições. Coloque no gelo.

Preparação de amostras de DNA

Se houver N amostras, é melhor definir N + 2 extrações, uma das quais é PC (preparação de amostra para controle positivo) e uma é NC (preparação de amostra para controle negativo). 10 μL de diluição número 4 obtida na etapa anterior, juntamente com uma certa quantidade de água, podem ser usados para tornar o volume total o mesmo que o volume inicial requerido para cada preparação.

PC. Use também água como NC.

Purificar o DNA de amostras com métodos de escolha, este kit é compatível com a maioria dos kits de extração de DNA de amostras no mercado. Também é possível comprar liberadores de ácidos nucleicos livres de extração da nossa empresa.

Reação qPCR de sonda (sistema de 20 μL, realizada na sala de preparação da amostra)

Se for feita uma análise quantitativa e apenas uma repetição, marcar N + 9 tubos de PCR, dos quais N + 2.

N + 2 amostras obtidas anteriormente, 1 para controle negativo por PCR (com água como modelo) e 6 para curvas padrão. Se a análise qualitativa for feita e apenas uma repetição for feita, marcar N + 4 tubos de PCR, dos quais N + 2 para N + 2 amostras obtidas anteriormente, 1 para controle negativo de PCR (com água como modelo) e 1 para controle positivo de PCR (diretamente com diluição de controle positivo do tubo 4 da etapa 6 como modelo). As etapas operacionais são descritas abaixo apenas como um exemplo de análise quantitativa.

10. Pressione a tabela abaixo para adicionar os componentes no tubo de marcação(Esta tabela lista apenas uma repetição. O controle positivo é definido após a configuração do tubo de amostra e do controle negativo, e as amostras de controle positivo devem ser adicionadas até que todas as tampas do tubo sejam armazenadas):


Ingredientes

Tubo de amostra

N + 2

PCR negativo

Comparação

Tubo de amostra de curva padrão

(1-6 tubos)

2 x Sonda qPCR MasterMix

cada 10μL

10μL

cada 10μL

Gene PLD endogênico do arroz qPCR

Mistura de pré-sonda

cada 3 μL

3 μL

cada 3 μL

N+2 amostras de DNA a serem testadas

cada 7μL

Não.

Não.

Água ultra-pura

Não.

7μL

Não.

Dilução da amostra da curva padrão obtida no passo 6

(Números 1-6)

Não.

Não.

Cada 7 μL (amostra 1)

Para Tubo 1, Tubo 2.

Como o tubo 2...)

11. Depois de cobrir a tampa, faça a PCR de acordo com os seguintes parâmetros:

processo

temperatura

tempo

Previsível

95℃

5 minutos

Reação PCR

(45 ciclos)

95℃

15 segundos

60℃

1 min (captura de flúor do canal FAM)

Sinal óptico, 3`BHQ1 como base de extinção

Grupo)

IV. Tratamento de dados

Se este kit for usado para testes quantitativos, a curva padrão será desenhada com o valor log da concentração de controle positivo como eixo horizontal e o valor Ct como eixo vertical. Em seguida, o valor log da concentração de DNA da amostra é calculado a partir da curva padrão para o valor Ct da amostra.

Se esta caixa for usada para testes qualitativos e somente for considerada positiva ou negativa, a Ct do controle negativo não deve ter nenhum valor numérico ou o valor de Ct deve ser igual ou superior a 40. Os controles positivos devem ter um aumento logarístico de fluorescência, com uma curva típica de amplificação e valores de Ct devem ser menores de 40. As amostras tratadas são positivas se a Ct for inferior a 40. Se nenhum valor de Ct for maior ou igual a 40, é negativo.
Só para pesquisa científica, não para diagnóstico clínico! Todos os produtos são exclusivamente para uso científico e não devem ser usados ​​para qualquer outro propósito, como o tratamento de pessoas ou animais, nem fornecer produtos ou serviços para qualquer indivíduo. Dependendo das instruções do produto de recepção real, as instruções do site são apenas para referência.