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Endereço
Nova área de Pudong, Xangai
Categorias do produto
Xangai Beibo Biotecnologia Co., Ltd.
Kit de coração TRAP
NegociávelAtualização em05/06
- Modelo
- Natureza do fabricante
- Produtores
- Categoria do produto
- Local de origem
Visão geral
Descrição do produto Baybo BBcellProbe A cromatização da fosfatase ácida antialquitica é baseada no nafanol AS-BI como substrato, a água da fosfatase ácida é liberada na célula para liberar o ácido fosfórico e o nafanol, o nafanol é acoplado ao sal nitrogenado para gerar produtos coloridos, localizados na citoplasma, se o ACP na célula tiver a atividade do ácido alquitico, ele responderá positivamente. A fosfatase ácida resistente ao tartrato (TRAP / TRACP) está presente principalmente em partes como os macrofagos folículos humanos normais e o baço TRAP presente em pacientes com leucemia celular está no folículo celular, não é liberado no sangue, a grande maioria do TRAP no sangue vem de células fracturadas. Assim, medir o TRAP no sangue pode entender o estado funcional das células ósseas quebradas. A fosfatase ácida antialquitica é um bom marcador para a absorção óssea e a atividade das células quebradoras, e a determinação do TRACP ajuda a entender o estado metabólico ósseo em várias condições fisiológicas e patológicas. Macrófagos pulmonares e sangue branco presentes em pessoas normais. .....
Detalhes do produto
Temperatura de armazenamento
2-8 ℃ Proteção contra a luz
Precauções
1. O período de validade é o período de validade de conservação conforme exigido antes da caixa não ser aberta.
2. Por favor, use o reagente o mais rápido possível após o desmantelamento!
2. Por favor, use o reagente o mais rápido possível após o desmantelamento!
Período de validade
3 meses (Nota: o líquido de incubação é dispensado de uma só vez e é válido por uma semana!)
Método de teste
Microscópio
amostra aplicável
1. corte de parafina
2. cortes congelados
3. Aplicações celulares, reptilianos
4. manchas de sangue, etc.
2. cortes congelados
3. Aplicações celulares, reptilianos
4. manchas de sangue, etc.
Preparação do instrumento
1 Microscópio óptico
2. Tinto cilindro
3. Pipeta
4. Relógio de segundos
5. caixa de gelo
2. Tinto cilindro
3. Pipeta
4. Relógio de segundos
5. caixa de gelo
Preparação do Reagente
Água Pura
Preparação de Consumíveis
1. Carregar slides
2. Sucção da cabeça
3. Luvas de uso único
2. Sucção da cabeça
3. Luvas de uso único
Precauções de uso
1. O líquido de incubação TRAP é fácil de falhar, esta técnica é adequada para perfurar a pele com folhas de sangue, depois de secar deve ser tingido oportunamente;
Ao manchar as fatias congeladas, o tempo de exposição das fatias à temperatura ambiente deve ser reduzido.
A amostra deve ser fresca e tratada imediatamente após a coleta, caso contrário, afetará a atividade da enzima.
A fixação do tecido deve ser realizada em um frigorífico de 4 ° C, o tempo não deve exceder 24 horas, caso contrário, a atividade enzimática diminuirá ou desaparecerá.
Geralmente não é recomendado cortar com parafina. Se for necessário cortar com parafina, o tecido é enterrado em parafina, a temperatura não deve ser superior a 56 ° C. A parafina com ponto de fusão de 52 a 54 ° C deve ser usada para impregnação, o tempo de impregnação é curto, caso contrário a atividade enzimática diminuirá ou desaparecerá.
As fatias de parafina não precisam ser fixadas.
Ao manchar as fatias congeladas, o tempo de exposição das fatias à temperatura ambiente deve ser reduzido.
A amostra deve ser fresca e tratada imediatamente após a coleta, caso contrário, afetará a atividade da enzima.
A fixação do tecido deve ser realizada em um frigorífico de 4 ° C, o tempo não deve exceder 24 horas, caso contrário, a atividade enzimática diminuirá ou desaparecerá.
Geralmente não é recomendado cortar com parafina. Se for necessário cortar com parafina, o tecido é enterrado em parafina, a temperatura não deve ser superior a 56 ° C. A parafina com ponto de fusão de 52 a 54 ° C deve ser usada para impregnação, o tempo de impregnação é curto, caso contrário a atividade enzimática diminuirá ou desaparecerá.
As fatias de parafina não precisam ser fixadas.
Uso
(Nota: o líquido de incubação é dispensado de uma só vez e é válido por uma semana!)
Nota: outros líquidos de trabalho, por favor, formulação fresca antes de usar, imediatamente após a formulação, uma vez que é usado, não pode ser colocado.
Tratamento de coloração da amostra:
I. Paintings de sangue e medula óssea
1, Impulsão:
Tome sangue completo ou medula óssea 3ul ou mais sobre o slide, mantenha o slide em ângulo de 30 ° com o slide, colocar na frente das gotas de sangue, mover-se ligeiramente para trás para entrar em contato com as gotas de sangue, as gotas de sangue se espalham ao longo da borda inferior do slide, em seguida, deslizar suavemente ao longo do plano do slide, até que as gotas de sangue terminem a membrana sanguínea. Não seja muito fino para evitar que as células sejam muito pequenas, nem muito grosso para evitar sobreposições demais.
2) Fixação:
Deixe o revestimento secar naturalmente no ar e, em seguida, coloque-o no líquido fixante A nesta caixa durante 2-3 minutos e lavá-lo com água durante 30-60 segundos.
3 – Incubação:
Depois de lavar com água, antes de secar, coloque o substrato no líquido de incubação para evitar a luz durante 60 minutos. O efeito de coloração piora após secar demais.
4 - Reinfecção:
Após a incubação, retire a água e lavá-la durante 1 minuto para re-infectar antes que a lâmina não seja seca. Pode ser reconteído com sumulina por 1-2 minutos ou reconteído com metil verde por 2-3 minutos, ambos podem ser escolhidos.
II. Aplicações celulares e reptilismo celular
1) Fixação:
Fixe o cartucho celular ou o reptil celular no fixante A nesta caixa por 2-3 minutos e lavá-lo com água por 30-60 segundos.
2 – Incubação:
Depois de lavar com água, antes de secar, coloque o substrato no líquido de incubação para evitar a luz durante 60 minutos. O efeito de coloração piora após secar demais.
3 - Reinfecção:
Após a incubação, retire a água e lavá-la durante 1 minuto para re-infectar antes que a lâmina não seja seca. Pode ser reconteído com sumulina por 1-2 minutos ou reconteído com metil verde por 2-3 minutos, ambos podem ser escolhidos.
3. cortes congelados
1, recuperação de calor:
Coloque as fatias congeladas no frigorífico de -20 ° C em um rack para aquecer por 5-10 minutos. Pode ser colocado em uma caixa de incubação de 37 ° C para reaquecimento, ou colocado em uma caixa pequena, a caixa pode ser colocada em uma panela de banho de água de 37 ° C para reaquecimento.
2 – Hidratação:
Tornar a corte quente e mergulhar na água por 1-2 minutos.
3 – Fixação:
Deixe as fatias secar naturalmente no ar, depois coloque-as no líquido fixado nesta caixa durante 2-3 minutos e lavá-las com água durante 30-60 segundos.
4 – Incubação:
Depois de lavar com água, antes de secar, coloque o substrato no líquido de incubação para evitar a luz durante 60 minutos. O efeito de coloração piora após secar demais.
5 – Reinfecção:
Após a incubação, retire a água e lavá-la durante 1 minuto para re-infectar antes que a lâmina não seja seca. Pode ser reconteído com sumulina por 1-2 minutos ou reconteído com metil verde por 2-3 minutos, ambos podem ser escolhidos.
4. corte de parafina
1, desinfecção:
Descerar em ditafenilo por 5-10 minutos. Em seguida, substituir com a destilação de ditafenilo fresco por 5-10 minutos.
2, Imbague:
Mergulhe em etanol sem água por 5 minutos. Use 90% e 70% de etanol por 2 minutos.
3 - Hidratação:
Mergulhe em água destilada por 2 minutos.
4 – Incubação:
Incubar sem luz durante 60 minutos antes de secar no líquido de incubação do substrato. O efeito de coloração piora após secar demais.
5 – Reinfecção:
Após a incubação, retire a água e lavá-la durante 1 minuto para re-infectar antes que a lâmina não seja seca. Pode ser reconteído com sumulina por 1-2 minutos ou reconteído com metil verde por 2-3 minutos, ambos podem ser escolhidos.
Análise dos resultados:
A resposta positiva é de partículas vermelhas vivas ou vermelhas escuras localizadas no plasma.
Nota: outros líquidos de trabalho, por favor, formulação fresca antes de usar, imediatamente após a formulação, uma vez que é usado, não pode ser colocado.
Tratamento de coloração da amostra:
I. Paintings de sangue e medula óssea
1, Impulsão:
Tome sangue completo ou medula óssea 3ul ou mais sobre o slide, mantenha o slide em ângulo de 30 ° com o slide, colocar na frente das gotas de sangue, mover-se ligeiramente para trás para entrar em contato com as gotas de sangue, as gotas de sangue se espalham ao longo da borda inferior do slide, em seguida, deslizar suavemente ao longo do plano do slide, até que as gotas de sangue terminem a membrana sanguínea. Não seja muito fino para evitar que as células sejam muito pequenas, nem muito grosso para evitar sobreposições demais.
2) Fixação:
Deixe o revestimento secar naturalmente no ar e, em seguida, coloque-o no líquido fixante A nesta caixa durante 2-3 minutos e lavá-lo com água durante 30-60 segundos.
3 – Incubação:
Depois de lavar com água, antes de secar, coloque o substrato no líquido de incubação para evitar a luz durante 60 minutos. O efeito de coloração piora após secar demais.
4 - Reinfecção:
Após a incubação, retire a água e lavá-la durante 1 minuto para re-infectar antes que a lâmina não seja seca. Pode ser reconteído com sumulina por 1-2 minutos ou reconteído com metil verde por 2-3 minutos, ambos podem ser escolhidos.
II. Aplicações celulares e reptilismo celular
1) Fixação:
Fixe o cartucho celular ou o reptil celular no fixante A nesta caixa por 2-3 minutos e lavá-lo com água por 30-60 segundos.
2 – Incubação:
Depois de lavar com água, antes de secar, coloque o substrato no líquido de incubação para evitar a luz durante 60 minutos. O efeito de coloração piora após secar demais.
3 - Reinfecção:
Após a incubação, retire a água e lavá-la durante 1 minuto para re-infectar antes que a lâmina não seja seca. Pode ser reconteído com sumulina por 1-2 minutos ou reconteído com metil verde por 2-3 minutos, ambos podem ser escolhidos.
3. cortes congelados
1, recuperação de calor:
Coloque as fatias congeladas no frigorífico de -20 ° C em um rack para aquecer por 5-10 minutos. Pode ser colocado em uma caixa de incubação de 37 ° C para reaquecimento, ou colocado em uma caixa pequena, a caixa pode ser colocada em uma panela de banho de água de 37 ° C para reaquecimento.
2 – Hidratação:
Tornar a corte quente e mergulhar na água por 1-2 minutos.
3 – Fixação:
Deixe as fatias secar naturalmente no ar, depois coloque-as no líquido fixado nesta caixa durante 2-3 minutos e lavá-las com água durante 30-60 segundos.
4 – Incubação:
Depois de lavar com água, antes de secar, coloque o substrato no líquido de incubação para evitar a luz durante 60 minutos. O efeito de coloração piora após secar demais.
5 – Reinfecção:
Após a incubação, retire a água e lavá-la durante 1 minuto para re-infectar antes que a lâmina não seja seca. Pode ser reconteído com sumulina por 1-2 minutos ou reconteído com metil verde por 2-3 minutos, ambos podem ser escolhidos.
4. corte de parafina
1, desinfecção:
Descerar em ditafenilo por 5-10 minutos. Em seguida, substituir com a destilação de ditafenilo fresco por 5-10 minutos.
2, Imbague:
Mergulhe em etanol sem água por 5 minutos. Use 90% e 70% de etanol por 2 minutos.
3 - Hidratação:
Mergulhe em água destilada por 2 minutos.
4 – Incubação:
Incubar sem luz durante 60 minutos antes de secar no líquido de incubação do substrato. O efeito de coloração piora após secar demais.
5 – Reinfecção:
Após a incubação, retire a água e lavá-la durante 1 minuto para re-infectar antes que a lâmina não seja seca. Pode ser reconteído com sumulina por 1-2 minutos ou reconteído com metil verde por 2-3 minutos, ambos podem ser escolhidos.
Análise dos resultados:
A resposta positiva é de partículas vermelhas vivas ou vermelhas escuras localizadas no plasma.
Análise de perguntas frequentes
1 Indução celular fracassada?
A qualidade das citocinas é importante quando as linhagens celulares ou as células BMM originais induzem as células quebradas. Quando a indução não é eficaz, pode ser considerado ajustar as condições de indução, aumentar a concentração de RANKL ou tentar adicionar M-CSF.
Como avaliar as células positivas?
Geralmente não é explicado por mudanças morfológicas, as células RAW são muito morfológicas e muito diversas, e as mudanças morfológicas não explicam o problema. É geralmente considerado que o polinúcleo mais TRAP positivo pode ser chamado de polinúcleo fracturado.
A qualidade das citocinas é importante quando as linhagens celulares ou as células BMM originais induzem as células quebradas. Quando a indução não é eficaz, pode ser considerado ajustar as condições de indução, aumentar a concentração de RANKL ou tentar adicionar M-CSF.
Como avaliar as células positivas?
Geralmente não é explicado por mudanças morfológicas, as células RAW são muito morfológicas e muito diversas, e as mudanças morfológicas não explicam o problema. É geralmente considerado que o polinúcleo mais TRAP positivo pode ser chamado de polinúcleo fracturado.
Referências
1.Guiping Chen et al.
Bergapten suprime a osteoclastogênese induzida pela RANKL e a osteoporose induzida pela ovariectomia através da supressão das vias de sinalização NF-κB e JNK
Comunicações de Pesquisa Bioquímica e Biofísica 2019
2.Wen-Yong Fei et al.
Magnolol previne a perda óssea induzida pela ovariectomia, suprimindo a osteoclastogênese através da inibição das vias do fator nuclear-κB e da proteína quinase ativada pelo mitogênio
Revista Internacional de Medicina Molecular 2019
Bergapten suprime a osteoclastogênese induzida pela RANKL e a osteoporose induzida pela ovariectomia através da supressão das vias de sinalização NF-κB e JNK
Comunicações de Pesquisa Bioquímica e Biofísica 2019
2.Wen-Yong Fei et al.
Magnolol previne a perda óssea induzida pela ovariectomia, suprimindo a osteoclastogênese através da inibição das vias do fator nuclear-κB e da proteína quinase ativada pelo mitogênio
Revista Internacional de Medicina Molecular 2019
