Proteína TSKgel A-5PW

Proteína TSKgel A-5PW

A coluna cromatográfica TSKgel Protein A-5PW foi projetada para a separação rápida e quantificação precisa de vários anticorpos. Captura e quantificação precisa de anticorpos monoclonais a partir do líquido de cultura celular colhido, e cada análise de amostragem pode ser concluída em menos de 2 minutos. A coluna cromatográfica permite mais de 2.000 análises de amostragem sem regeneração ou limpeza.

A coluna cromatográfica TSKgel Protein A-5PW é preenchida com pérolas de polímero metilacrílico hidroxilado de alta entrelaçamento, permitindo o uso de altas velocidades de fluxo na análise cromatográfica, mantendo a eficiência cromatográfica, a largura do pico e a separação. Seu subgrupo recombinante A é um hexómero do domínio C modificado por criptões. Esta ligação reforçada de recombinante A se liga a uma microesfera da matriz TSKgel 5PW por meio de ligação multiponto, proporcionando uma excelente estabilidade em solução de NaOH de 0,1 mol/L.

A coluna cromatográfica TSKgel Protein A-5PW possui uma ampla gama de volumes de amostras superiores que permitem determinar com precisão a eficácia dos anticorpos monoclonais em diferentes estágios do tratamento do líquido de cultura celular. Seus baixos níveis de taxa de extração de proteína A tornam-no ideal para purificação de anticorpos monoclonais em pequena escala para caracterização preliminar.

O TSKgel Protein A-5PW é uma coluna cromatográfica de afinidade (AFC) que introduz um grupo funcional recombinante de proteína A na superfície do preenchimento TSKgel G5000PW de uma matriz polimérica hidrofílica porosa e preenche um tubo PEEK.

Como a proteína A pode se ligar especificamente à região Fc de IgG, a proteína A pode separar IgG por adsorção específica de amostras como serum de cultura celular contendo IgG e impurezas. Além disso, a calibração é feita por meio de concentrações conhecidas de IgG

Curvas que podem quantificar a concentração de IgG em amostras desconhecidas.

O método de síntese de matriz, grupo funcional e ligação de grupo funcional para a coluna cromatográfica TSKgel Protein A-5PW é o mesmo que o enchimento a granel TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F. Assim, esta coluna cromatográfica tem propriedades de seleção de separação semelhantes ao TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F.

Devido ao grande tamanho de partículas e à alta resistência mecânica da matriz, a coluna cromatográfica pode ser usada em condições de alta velocidade de fluxo e também para análises de alto fluxo de IgG. Além disso, devido ao efeito de inflação do enchimento causado por mudanças no solvente é relativamente pequeno, pode ser adicionado na fase de fluxo

Adicionar solventes orgânicos.

Além disso, a coluna cromatográfica possui grupos funcionais químicamente estáveis e resistentes à alcalinidade, de modo que pode ser limpa com solução aquática de NaOH. Ao limpar a coluna cromatográfica com uma solução aquosa de NaOH, injete 0,1 mol/L de solução aquosa de NaOH 0,5 da válvula de amostragem.

até 2 ml.

2-2. Condições padrão de separação

A maioria das IgG é adsorbida pela Proteína A em condições neutras (pH 7,0 a 7,5) e eliminada em condições ácidas (pH 2,5 a 3,5), portanto, a separação de anticorpos com TSKgel Protein A-5PW é geralmente realizada em duas soluções de pH diferentes.

Metodo de eliminação de gradiente escalar.

A fase de fluxo de adsorção e lavagem geralmente usa tampão de ácido fosfórico, mas a fase de fluxo também pode usar tampão de citrato com pH baixo. Após o pré-equilíbrio da coluna cromatográfica com tampão de adsorção (equilíbrio de tampão com mais de 5 vezes o volume da coluna), amostragem

Depois, apenas a IgG é adsorvida ao pilar. Em seguida, substituir a fase de fluxo com lavagem para remover o IgG.

Altas concentrações de sal (por exemplo, 0,15 mol/L NaCl, etc.) podem ser adicionadas na fase de fluxo, mas IgG altamente hidrofóbicas são propensas à adsorção não específica na coluna cromática, o que requer atenção. Além disso, ao analisar IgG altamente hidrofóbico, no plano

A adição de solventes orgânicos solúveis em água, como etanol, ou ácido AN essencial (0,2 mol / L) à balança e à lavagem pode inibir eficazmente a adsorção não específica. No entanto, as circunstâncias acima podem resultar em flutuações da linha de base devido à fase de fluxo de substituição, portanto, antes de amostrar, por favor

Altere a fase de fluxo e faça a confirmação.

Exemplo de fase de fluxo

Exemplo 1

Fase de fluxo A: tampão de fosfato de sódio 20 mmol/L, pH 7.4

Fase de fluxo B: tampão de fosfato de sódio 20 mmol/L, pH 2.5

Exemplo 2

Fase de fluxo A: 20 mmol/L tampão de fosfato de sódio, pH 7,4/etanol = 90/10 (v/v)

Fase de fluxo B: 20 mmol/L tampão de fosfato de sódio, pH 2,5/etanol = 90/10 (v/v)

Exemplo 3

Fase de fluxo A: tampão de fosfato de sódio 20 mmol/L, pH 7.4

Fase de fluxo B: 50 mmol/L tampão de citrato de sódio, pH 2.5

Colunas de cromatografia de afinidade de alto desempenho A coluna de cromatografia TSKgel Protein A-5PW é resistente e pode ser limpa com soluções alcalinas e é adequada para a quantificação rápida e de alta precisão de IgG em líquidos de cultura celular com mais impurezas. Além disso, a quantificação de IgG é ampla e pode ser usada para analisar amostras de baixa concentração em culturas iniciais até amostras de alta concentração.

TSKgel Protein A-5PW Especificações e informações de encomenda

especificações técnicas

projetoParâmetros

Diâmetro do orifício100 nm

Tamanho da partícula20 µm

Estabilidade do pH2.5 - 12

Limitação de resistência1.000 kDa

DistribuiçãoProteína recombinante A (hexamérico do domínio C)

Densidade de base0,9 - 1,0 g/L Gel

Informações de encomenda

Número do produto (P/N)descriçãodimensão

0023483TSKgel Protein A-5PW coluna cromatográficaDiâmetro interno de 4,6 mm x comprimento de 3,5 cm

Proteína TSKgel A-5PW

Nantong Haiyue Química Co., Ltd.