iQue Screener PLUS

A série iQue Screener da Inlicyt é o principal produto da Inlicyt, analisando células em suspensão e microesferas com o princípio de fluxo, é um filtro de alto conteúdo que pode analisar placas de 96 buracos e 384 buracos, o tipo HD pode analisar placas de 1536 buracos, com velocidade de detecção e software de análise abrangente e abrangente. A série iQue Screener está disponível em três modelos: iQue Screener, iQueScreener HD e iQue Screene.

A verdadeira solução --Células suspensas/Filtração de alto fluxo de microesferas
A triagem de alto conteúdo facilita o desenvolvimento de medicamentos fornecendo dados ricos, tornando-se um processo habitual no processo de pesquisa e desenvolvimento de medicamentos. No entanto, a triagem de alto conteúdo está limitada a células de parede e não pode atingir mais áreas importantes de pesquisa, e a InliCyt lançou o sistema de triagem iQue Screener para analisar células em suspensão e microesferas, fornecendo dados experimentais rápidos de alto conteúdo para os experimentos de triagem de hoje.

• Aumentar a eficiência do desenvolvimento de drogas de pequenas moléculas em experimentos de triagem fenotípica através da triagem funcional de alto fluxo de células em suspensão;
• Melhores informações sobre híbridos são obtidas a partir de estudos de desenvolvimento de anticorpos através da obtenção simultânea de dados sobre ligações antígenas e reações cruzadas, e os alvos de triagem permanecem em seus estados de configuração natural.
• Garantir que mais previsões de toxicidade in vitro possam ser obtidas através de experimentos totalmente automatizados e multi-endpoint que analisam as propriedades de saúde de milhares de células independentes por segundo.

Soluções integradas

Uma solução de triagem que integra instrumentos, software e kits permite que os pesquisadores analisem células em suspensão com a velocidade e eficiência da triagem.
iQue^TMScreenerComo funciona
iQue^TMO sistema de triagem é uma plataforma de triagem baseada em citométria de fluxo de alto rendimento que envia um fluxo contínuo de amostras para o detector, que coleta múltiplas leituras de células individuais. Este método único de amostragem transporta células ou outros conteúdos de placas microporosas para citometros de fluxo de forma contínua e com intervalo de ar para garantir um rastreamento preciso e minimizar a poluição cruzada. Os resultados finais do zui levam apenas alguns minutos, em vez de horas, e podem formar resultados experimentais baseados em placas microporosas em um mapa térmico fácil de interpretar.


iQue^TMScreenerCaracterísticas
Maior eficiência experimental

• Filtre sua biblioteca em dias, em vez de meses
• Volumes de amostragem de até 1 µL, reduzindo o custo do reagente
• Uma placa de 96 buracos em 3 minutos e uma placa de 384 buracos em 12 minutos
• Pode ser integrado com braços robóticos e outras unidades de trabalho automáticas
• Compatível com células, microesferas e suas misturas

Mais Relações Fisiológicas

• Pode analisar misturas de células diferentes para ler dados de células individuais
• Pode filtrar células em suspensão e objetos alvo de configuração natural
• Coleta múltiplas leituras com quatro canais de fluorescência
• Detecção de tamanho e tamanho de partículas de objetos alvo não marcados

Resultados experimentais mais estáveis

• 6 níveis de teste para resultados experimentais sensíveis e confiáveis
• 10.000 células independentes para obter melhores estatísticas dentro de cada buraco

Mais fácil de usar

• Suporte completo ao fluxo de trabalho
• Análise de dinâmica em tempo real
• Gerar relatórios instantâneos
• Kits específicos para aplicações plug-and-play

Ultra-alto fluxo, seu poderoso auxiliar
Aplicações
Desenvolvimento de anticorpos (Descoberta de anticorpos）

• Triagem de hibridomas (Hybridoma Screening)
• Determinação da reatividade cruzada das espécies
• Avaliação da produtividade das linhas celulares secretoras de anticorpos
• Triagem de uma biblioteca de IgG da linha germinal humana

Experimento de toxicidade in vitro (Toxicologia in vitro）

• Quantificação da indução de micronúcleos
• Detecção de eventos apoptóticos

Triagem Fenotípica (Phenotypic Screening)）

• Triagem de compostos que induzem a diferenciação de células progenitoras mielóides
• Triagem de expressão de GFP em linhas celulares múltiplas (GFP expression screening in multiple cell lines)
  

Desenvolvimento de anticorpos
O sistema de triagem do InliCyt, combinado com o kit MultiCyt, pode detectar vários pontos finais simultaneamente, facilitando a identificação e descrição de anticorpos de alto fluxo em uma biblioteca clonada. Além disso, a capacidade de aplicar células em suspensão para análise permite que as substâncias alvo sejam triadas sob sua configuração natural, permitindo obter melhores informações sobre híbridos.
Triagem de híbridos
A combinação do sistema de triagem InliCyt e do kit de triagem MultiCyt Hybridoma permite otimizar todo o processo experimental. Este método experimental de mistura e detecção elimina muitas das etapas existentes na triagem inicial para avaliar simultaneamente as propriedades de ligação e reação cruzada do antígeno.

As células-alvo (não marcadas) e as células-controle (marcadas por calcium yellow green) são misturadas e distribuídas em placas microporosas. Os anticorpos testados são adicionados ao banco de tumores híbridos e incubados com anticorpos de detecção com fluorescência vermelha. Em seguida, a placa microporosa foi analisada com o iQue para detectar a ligação de anticorpos e células alvo na suspensão de híbridos à população celular de controle. A ligação com a célula de controle mostrou ligação reativa e não específica, fornecendo controle interno para cada experimento em cada buraco.

Experimentos com células não tratadas permitem que a triagem de anticorpos seja realizada em epitopos configurados, o que não é possível em ELISA e outros experimentos de purificação de proteínas, porque os antígenos são muitas vezes desdobrados e desativados durante a purificação.
Determinação da reatividade cruzada entre espécies
As múltiplas funções do sistema de triagem InliCyt permitem integrar a atividade intergenética dos anticorpos no processo de triagem desenvolvido. O kit MultiCyt Cell Encoder Kit permite que cinco linhas celulares sejam detectadas simultaneamente por orifício. O experimento facilita a identificação de clones altamente adequados que podem reagir cruzadamente com antígenos alvo de várias linhagens, que são candidatos mais fortes para estudos pré-clínicos.

Linhas celulares progenitoras e células geneticamente modificadas que expressam ratos, ratos, macacos e receptores humanos foram marcadas e misturadas em uma amostra. Entre eles, as linhas celulares progenitoras não transfectadas serviram como um controle de ligação negativa para cada amostra. A amostra foi adicionada a uma placa microporosa de 96 poços para o experimento de ligação de anticorpos e, em seguida, os anticorpos de detecção de triagem inicial e os anticorpos de detecção de triagem segunda foram adicionados. Após o experimento, as linhagens celulares de cada amostra foram confirmadas e avaliadas individualmente para gerar curvas de afinidade de ligação. O experimento foi realizado em quatro placas de microporos de 96 poços, obtendo 12 anticorpos em quatro condições experimentais diferentes, com curvas de oito doses, todos os experimentos concluídos em 1 hora.
Avaliar a eficiência da produção de linhas celulares secretas de anticorpos
A multifuncionalidade do sistema de triagem InliCyt combinada com o kit de contagem e captura de IgG Multi-Cyt aumenta as chances de identificar com sucesso linhagens celulares de alta produtividade. Em um único experimento, os níveis de anticorpos de cada célula foram obtidos ao detectar simultaneamente a quantidade de anticorpos secretos, o número de células e a atividade celular.

Os anticorpos secretos na amostra se ligam às microesferas capturadas e são detectados por reagentes de detecção marcados com fluorescência. Adicione um corante que marca específicamente as células inativas para determinar a relação entre as células ativas e as células inativas. Para analisar as placas microporosas, cada amostra registrou três leituras simultaneamente: o nível de anticorpos secretos, o número total de células e a porcentagem de células inativas. Isso permite calcular facilmente os níveis de anticorpos secretos por cada célula.
Triagem de células reprodutivas humanasIgGBiblioteca
O sistema de triagem InliCyt permite o desenvolvimento de métodos de triagem adequados para a expressão de antígenos na superfície celular e para a detecção de múltiplos endpoints. A Fabrus Inc. (San Diego, Califórnia) desenvolveu uma biblioteca Fab de células reprodutivas humanas e realizou uma triagem direta de cerca de 10.000 IgG para antígenos alvo na superfície das células de mamíferos. Ele é realizado usando um sistema de triagem HTFC, permitindo que o IgG alvo possa ser triado em ambientes naturais na superfície da membrana da célula lipídica.

As células são curtamente co-transfectadas com GFP e antígeno-alvo e, em seguida, cada grupo, que expressa um dos três antígenos-alvo diferentes, é marcado com uma certa quantidade de cálcio yellow grosin como corante que codifica as células. As células marcadas transfectadas são fisicamente misturadas em amostras individuais, divididas em placas microporosas para a triagem da biblioteca de IgG para essas amostras. Os sinais do GFP são usados ​​para confirmar se as células expressam antígenos e os corantes codificadores celulares permitem que três células experimentem simultaneamente para identificar e analisar cada alvo. As células GFP negativas atuam como um controle interno negativo que não expressa antígeno alvo. A ligação de IgG às células foi testada por fluorescência e cada grupo manchado foi avaliado.
Experimento de toxicidade in vitro
O sistema de triagem do IntlliCyt analisa o desempenho de saúde de milhares de células na solução em 1 segundo, fornecendo um caminho inicial de triagem para toxicidade genética para o desenvolvimento de medicamentos usando o fluxo de trabalho totalmente automatizado e simplificado do kit MultiCyt.
Quantificação induzida por micronúcleos
Experimentos in vitro com micronúcleos em sistemas de triagem InliCyt, com kits in vitro MicroFlow Kit da Litron (Rochester, Nova Iorque), podem detectar de forma confiável alterações nos micronúcleos das células em suspensão e das células adjacentes causadas por compostos genéticamente tóxicos. Quando a placa de microporo 384 combina a análise automatizada, os experimentos que originalmente levaram 16 horas para ser concluídos agora podem ser concluídos em apenas 30 minutos, permitindo que os experimentos induzidos por micronúcleos alcancem um alto fluxo de níveis de triagem.
Detecção de eventos de apoptose
Os sistemas, software e kits de aplicação do InliCyt foram otimizados e confirmados para identificar e caracterizar pontos finais de apoptose múltipla. Indicadores como Caspase 3, Annexina V, depolarização mitocondrial, atividade celular e número de células são monitorados simultaneamente ou em combinações diferentes para obter uma melhor correlação e um mapa mais completo do processo de apoptose entre os vários endpoints. Misturas celulares complexas também podem ser monitoradas para obter diferentes eficiências diferenciais.

Filtração de fenotipos
Triagem de compostos que induzem a diferenciação de células progenitoras da medula óssea
O sistema de triagem InliCyt filtra compostos biológicos que superam o estagnamento da diferenciação das células progenitoras da medula óssea e identifica facilmente compostos que estimulam a diferenciação das células tronco, eliminando os compostos que mostram citotoxicidade.

As linhagens celulares são derivadas de ratos geneticamente modificados que expressam GFP sob o controle de promotores: células diferenciadas expressam GFP (GFP+) e células não diferenciadas não expressam GFP (GFP-). Ao mesmo tempo, 350.000 compostos foram selecionados para atividade celular, número de células e fluorescência verde. Medindo a dispersão frontal, a dispersão lateral e o número de células de cada buraco, os compostos tóxicos podem ser identificados sem corantes ativos e ao mesmo tempo a GFP +. Os mapas de calor de placa podem estudar simultaneamente os compostos que induzem a diferenciação (representados em placa GFP+), a citotoxicidade (representada em perda de células) e as proporções que contêm vários parâmetros (criados para definir critérios de triagem).
Linhas celulares múltiplasGFPFiltração de expressões
Compatível com muitos modelos conhecidos de GFP, o sistema de triagem do InliCyt permite a análise fenotípica de grupos de alto fluxo em células suspensas e adesivas. As células que expressam GFP podem ser identificadas e quantificadas em grupos celulares temporáriamente transfectados.

A simplificação do processo de triagem fenotípica do grupo permite que múltiplos endpoints sejam analisados de forma contínua para obter mais dados (por exemplo, sinais de GFP de células vivas) ou analisados em paralelo como um único endpoint (percentual de sobrevivência celular e percentual de expressão celular).

Para cada amostra da placa microporosa, vários dados podem gerar informações mais biológicamente relevantes para avaliação de dados. Experimento triplicado com o reagente de transfeção de lipofectamina (LF2K) em células HepG2.