A Agilent dá-lhe uma resposta "aproximada ao padrão": cromatografia líquida bidimensional inversa em linha de corte central (RP x RP 2D-LC) com base na plataforma Agilent 1260 Infinity III, implementando pela primeira vez a vitamina D em um produto de cápsulas suaves de vitamina D₃A pré-vitamina D e cinco impurezas-chave de uma única amostra, separação completa, detecção quantitativa, permitindo que os problemas analíticos de "conteúdo extremamente baixo", "estrutura extremamente semelhante", "muito fácil de mascarar pela matriz" sejam resolvidos simultaneamente.

vitamina D₃Facilmente convertido em pré-vitamina D sob condições de luz e calor₃Vitamina D trans₃isoméricos equivalentes ao esterol e ao fotoesterol. Essas impurezas diferem muito pequenamente da estrutura dos componentes principais e as características de absorção ultravioleta se sobrepõem muito; O conteúdo das cápsulas suaves é frequentemente transportado por substratos como óleo de soja, óleo de milho, óleo de oliva e óleo de fígado de peixe, com altas concentrações de triglicerídeos causando fortes interferências de fundo. Atualmente, o farmacêutico estrangeiro ou a versão 25 do farmacêutico chinês para a detecção de substâncias relevantes em preparações complexas de VD usa métodos de preparação off-line, seja a preparação em fase real ou em fase inversa, ou devido a muitas etapas de pré-processamento da amostra e a taxa de recuperação flutuando, ou devido à separação insuficiente devido à confluência da matriz, o que, em última análise, faz com que exista sempre uma "barreira" insuperável entre a "detecção" e a "quantificação precisa".

A ideia central da fase líquida bidimensional em linha de corte de um único centro é completar a "purificação" e a "separação" no mesmo sistema em ordem de pico:

A Figura 3 é um espectrograma 1D e 2D do produto padrão misturado, e a Figura 4 é um espectrograma de amostras recém-fabricadas de cápsulas suaves de vitamina D e amostras de preparação acelerada de 6 meses. O uso do método de cromatografia líquida bidimensional de corte central pode remover eficazmente a interferência dos componentes da matriz e realizar a análise de separação dos componentes principais e dos cinco componentes das impurezas alvo; Amostras de teste de estabilidade acelerada por contraste, impureza visível D (trans-VD)₃O método permite a análise das seis principais substâncias relacionadas com a vitamina D3, além de VD pré-VD, VD trans e esterol rápido prescritos na versão 25 do Farmacópio Chinês, com a adição de isoesterol e fotoesterol mencionados na Farmacópio Europeia do EP, fornecendo suporte técnico confiável para a melhoria dos padrões de qualidade e otimização do processo de produção de preparações de vitamina D3.

A análise de substâncias relacionadas com cápsulas suaves de vitamina D é a ponta do iceberg do programa de aplicações de fase líquida 2D da Agilent. A Agilent já estendeu o método de fase líquida bidimensional para diferentes áreas: