No processo de amostragem de micróbios, a poluição cruzada pode ser causada por resíduos de equipamentos, operações de pessoas, micróbios ambientais ou poluição mútua entre amostras, o que requer a implementação de medidas estritas de prevenção da poluição em todo o processo. Aqui estão as orientações operacionais padronizadas e os pontos técnicos para os sub-cenários:
Esterilização de equipamentos e consumíveis antes da amostragem
Especificações de esterilização de hardware
Dispositivos reutilizáveis:
Cabeça de amostragem de metal (por exemplo, amostrador de impacto): esterilização a vapor de alta pressão a 121 ° C por 20 minutos (GB / T38512-2020), ou queima com 70% de etanol + chama (adequado para tratamento de emergência no local).
Componentes de plástico (por exemplo, tubos de bomba de amostragem): mergulhe com 0,1% de ácido peróxido acético por 30 minutos, depois enxague 3 vezes com água estéril, depois de secar com exposição ultravioleta (254nm, ≥30 minutos).
Consumíveis descartáveis:
Os pratos de petri, sacos de amostragem e outros produtos de esterilização por radiação (exposição a cobalto-60, dose ≥ 25kGy) devem ser selecionados para verificar a integridade da embalagem antes do desmantelamento (norma ISO 11607-1).
Verificação do Efeito da Sterilização
Monitoramento biológico após cada esterilização: colocar uma barra de esporos de Bacillus adiposis termófilos ATCC7953, cultivo após a esterilização (56 ° C, 48 horas), o número de colônias deve ser 0 (GB8599-2021).
Sistema operacional de prevenção da poluição no local de amostragem
1. Diretrizes de operação estéril do pessoal
Requisitos de proteção de nível 3:
Ambiente comum: Use roupa de ensaio descartável + luvas médicas (por exemplo, luvas de nitrilo) e limpe a superfície da luva com etanol de 75% antes de amostrar.
Ambientes de alto risco (por exemplo, amostras clínicas): é necessário usar roupa de isolamento estéril + óculos de proteção + luvas de dupla camada e trocar as luvas externas uma vez por amostra.
Especificações de ação:
Durante a amostragem, evite atravessar o braço acima da abertura da amostra, mantenha a cabeça da amostra ≥ 30 cm do corpo e a direção da respiração está em ângulo de 90 ° com a abertura da amostra.
É proibido arranjar o cabelo ou tocar o rosto na área de amostragem e, se necessário, substituir as luvas ou desinfetar as mãos.
Partição espacial e controle do fluxo de ar
Divisão de amostragem:
Defina uma área de operação estéril de 50 cm x 50 cm, pulverize a mesa com 75% de etanol para formar uma cinta de desinfecção e coloque o amostrador no centro da área.
Cenários de alta limpeza, como salas limpas de nível ISO 5, precisam ser operados dentro de uma mesa de fluxo laminar (velocidade do vento 0,36-0,54 m/s) ou dentro de um armário de biossegurança (nível BSC-II).
Controle de interferência do fluxo de ar:
Feche as portas e janelas antes da amostragem, pare o sistema de ar condicionado durante 10 minutos (para evitar que o fluxo de ar carregue micróbios estrangeiros) e controle de movimentos de pessoas a 1 metro de distância.
Medidas de isolamento no processo de coleta de amostras
1. Programa anti-cruzamento de amostragem em lotes
Desinfectação intervalada:
Após cada amostragem concluída, limpe a caixa do amostrador, a abertura da amostragem e a mesa de operação com etanol a 75% para a próxima coleta de amostras após 5 minutos.
Se os tipos de amostras são diferentes (por exemplo, amostras ambientais e clínicas), é necessário substituir o conjunto completo de cabeças de amostragem e tubulações para evitar a confusão de micróbios residuais.
Tecnologia de isolamento de amostras especiais
Tratamento de amostras de alta concentração:
No tratamento de amostras de alta carga, como águas residuais, fezes e outros, utilize um amostrador com filtro de pressão negativa, como o MilliporeEZ-Pak, que sela o elemento de filtro imediatamente após a amostragem para evitar a propagação de aerossóis.
Amostragem de bactérias patogênicas:
Usando uma cabeça de amostragem de segurança biológica (por exemplo, um amostrador fechado com filtro HEPA), coloque a amostragem em um tanque de metal à prova de fugas (papel absorvente com camada interna + solução de hipoclorato de sódio a 0,5%).