Recentemente, em um livro, sempre escovado para os experimentadores sobre a cultura anaeróbica "post de sangue lágrimas": ou o vazamento de gás do tanque de cultura, uma semana de experimentos em vão; Ou o custo da caixa de luvas é alto demais, falado pelo chefe; O estado bacteriano é bom e ruim, os dados são sempre instáveis ...
Não se apresse! Este resumo detalhado da técnica de cultivo anaeróbico é para resolver suas preocupações. nósDeixará de lado o filtro do fabricanteAnálise imparcial de vários métodos mainstream do clássico à vanguardaPara ajudá-lo a descobrir suas vantagens e desvantagens e encontrar o "atalho" adequado ao seu tema.
(1) Tecnologia de cultivo tradicional
Existem muitos métodos de cultivo anaeróbico:
Métodos FísicosIncluindo o método de bloqueio do ar, o método de ebulição, o método de vácuo, o método de substituição do ar, o método de injeção de gás ou o método de transferência;
Métodos químicosIncluindo o método de ácido fónico focal, o método de veludo de ferro, o método de pó de seguro, etc.;
Métodos biológicosIncluindo a simbiose com a oxigenação;
Método de misturaInclui o método de tanque (saco) anaeróbico, o método de caixa de luvas anaeróbicas ou o método de sala anaeróbica, o método de veludo de ferro de substituição de ar, o método de paládio de substituição de ar, etc.
Abaixo, vamos descrever em detalhes alguns dos métodos mais comuns.
Os principais princípios do Gas-Pak são:O oxigênio em recipientes fechados é consumido por reações químicas e o dióxido de carbono é geradoPara criar um ambiente apropriado para o crescimento anaeróbico, é"Tanque anaeróbico especial + saco de produção de gás + catalisador incorporado"um conjunto de programas padronizados.
Vantagens:
1. Operação relativamente fácilSem necessidade de equipamentos complexos, o material pronto pode ser colocado em tanques anaeróbicos;
2. Adequado para as necessidades de experimentos em pequena e média escala- É.
Desvantagens:
A Lei do Gas-PakO saco de gás é descartável.É necessário substituir após a utilização.Custos mais elevados para uso a longo prazo;
2. O efeito catalítico diminui após o uso de um certo número de vezes.É necessário substituir regularmente;
Se houver negligência durante a operação(Por exemplo)O saco de gás não foi colocado no tanque anaeróbico após o corte, a tampa do tanque não foi fechada rapidamente após a adição de água, etc.)Isso pode causar falhas no ambiente anaeróbico.
II. Método de ácido fónico
O método de ácido fónico focalizado utiliza reações químicas para criar um ambiente anaeróbico.Quando reage com o álcali, consome oxigênio.Isso cria um ambiente anaeróbico em um espaço relativamente fechado.
Vantagens:Custo baixo e operação relativamente simplesSem necessidade de equipamentos complexos,Amplamente utilizado em estudos iniciais de cultura anaeróbica- É.
Desvantagens:
1. Durante a reaçãoImpuridades como o NO que podem ser geradasprejudicial ao crescimento de algumas bactérias;
Ao mesmo tempo que absorve oxigênio,Também absorve dióxido de carbono, que é necessário para o crescimento de certas bactérias anaeróbicas.Isso pode fazer com que algumas bactérias anaeróbicas não cresçam bem;
3. Requisitos de controle mais elevados para as condições experimentais de temperatura e umidade da reaçãoSe as condições não forem controladas adequadamente, afetará o efeito de desoxigenação;
4. Os indicadores não são suficientemente sensíveisÉ difícil determinar com precisão se o ambiente anaeróbico atende aos requisitos.
Método de saco de gás anaeróbico
(三菱瓦斯化学株式会社 AnaeroPack 系列)
O princípio do método de saco de produção de gás anaeróbico é colocar o saco de produção de gás junto com a placa plana no espaço selado,Componentes químicos no saco de produção de gás reagem com água para gerar hidrogênio e dióxido de carbonoO catalisador de paládio faz com que o hidrogênio se junte ao oxigênio residual para gerar água.Reduzir a concentração de oxigênio no tanque a menos de 1%Criar um ambiente anóxico para o crescimento das bactérias anaeróbicas.
Vantagens:
1. Fácil de operar, sem equipamentos complexos,Simples combinações com "saco de gás + espaço de vedação flexível";
2. Desoxigenação rápidaNormalmente:30-60 minutosO oxigênio interno pode ser absorvido, favorecendo o rápido crescimento das bactérias anaeróbicas.
Desvantagens:
1. saco de produção de gás pertence a bens de consumo descartáveis, o custo de uso único é alto,Para as necessidades de cultivo anaeróbico em grande escala, o uso é maior e o custo aumenta significativamente;
2. requisitos de vedação elevados, tampa do tanque anaeróbico se não apertado ou anel de vedação envelhecimento,O vazamento de oxigênio faz com que a cultura falhe;
Não é possível ajustar a composição do gás em tempo real.Se as bactérias anaeróbicas têm requisitos especiais para a concentração de dióxido de carbono, é difícil adaptar com precisão- É.
Luvas anaeróbicas sãoGeração de água por meio de uma mistura de gás no corpo da caixa de vedação e a utilização de um catalisador de paládio para catalisar continuamente as reações de hidrogênio e oxigênioPortanto, mantém de forma ativa e contínua um ambiente anóxico estável dentro da caixa. principalmente atravésAs seguintes três partes trabalham em conjunto:
Sistema de desoxigenação circular (núcleo)
Sistema dentro da caixaEntrada na mistura de gases(N₂, H2, CO2 em proporção).H2 com o O₂ residual no gás da caixa, na reação superficial do catalisador de paládio para gerar H2O, Desta forma, o oxigênio é consumido.
Este processo de desoxificação circularContinuar,Assegure-se de que quaisquer traços de oxigênio infiltrados através da cabine de transmissão ou das fendas de operação das luvas sejam removidos imediatamente- É.
2. Câmara de substituição de gás (câmara de transmissão)
Isto entra e sai da caixa."Fechamento de gás"É uma pequena cabine fechada com duas portas dentro e fora.
Entrar no processo de artigos:
Abra a porta externa, coloque os itens e feche a porta externa.
2. Iniciar o programa "Substituição"dentro da cabine acontecerá.Vácuo de várias vezes → ciclo de enchimento de gás misturadoexcluir todo o ar (oxigênio) da cabine.
3. Quando o gás dentro da cabine coincide com o gás dentro da caixapara abrir a porta interna e mover os itens para a caixa de trabalho principal.
3. vedação caixa e interface luva
O pessoal é operado por meio de luvas vedadas fixadas na caixa para tratar amostras e experimentos dentro da caixa, isolando o ar externo.
Vantagens:
1. Fornece condições anaeróbicas muito estáveisA concentração de oxigênio pode ser reduzida a níveis extremamente baixos;
Várias operações experimentais podem ser realizadas dentro da caixa,Equilibrar a forma de cultura líquida sólida, adequado para a pesquisa de cultivo em massa de bactérias anaeróbicas;
Não é necessário abrir frequentemente a porta da caixa, evitando eficazmente a interferência e a poluição do ar externo;
4. Caixa de cultivo integrada/sistema de controle de temperatura em algumas caixas de luvasControle preciso da temperatura para facilitar a cultura e a observação em tempo real.
Desvantagens:
1.Equipamento caroA manutenção e a manutenção também exigem custos elevados;
O equipamento funciona a longo prazo,Consumo de gás elevado e custos operacionais elevados;
3. Ocupação de espaço grandePrecisa de um local especial
4. Etapas operacionais complexasÉ necessário observar o funcionamento do equipamento em qualquer lugar, caso contrário, erros operacionais podem ocorrer e afetar os resultados experimentais.
Método de cultura anaeróbica
O método de cultura anaeróbica é aprovadoBomba de vácuo operada manualmente para extrair ar dentro de recipientes fechadosinjetar manualmente gases anóxicos como nitrogênio e dióxido de carbono,Repita o processo de extração de oxigênio 2-3 vezesFinalmente, um ambiente anaeróbico.
Vantagens:
Alta eficiência de substituição de gásrápidoReduzir a concentração de oxigênio para níveis mais baixos;
2. Proporção de Composição de Gás RegulávelAdaptar-se às diferentes necessidades anaeróbicas;
Produtos de reação sem reagentes químicos,Evite a inibição adicional do crescimento da cepa- É.
Desvantagens:
1. É necessário equipar separadamente uma bomba de vácuo, uma garrafa de gás de alta pressão, uma válvula de redução de pressão e outros equipamentos completos,Alto custo de insumos iniciais e ocupação de espaço experimental;
Dependendo totalmente da operação manual,A pressão e o tempo de bombeamento/injeção são controlados pela experiênciaA precisão da proporção de gás é pobre, e as diferenças operacionais causam flutuações nos resultados da cultura;
Falta de monitoramento em tempo real,Não é possível determinar intuitivamente se a concentração de oxigênio no tanque e a proporção de gás atingem os padrõesRequer verificação adicional por biomedicadores, demorado e complicado.
prevalente em culturas anaeróbicas tradicionais.Os principais pontos de dor, como "operação pesada", "consumo de gás elevado" e "controle ambiental difícil"Exatamente.Sistema inteligente de cultivo anaeróbico/micro-oxigênio da série HD-ANA chave destinada a quebrar. O sistemaO processo operacional e a precisão do controle são otimizados com base no princípio de substituição de extração de gás do método de extração de gás tradicionalConseguir resolver esses desafios de longa data que preocupam os laboratórios.
(2) "Super potência" do sistema de cultura de micro-oxigênio anaeróbico inteligente da série HD-AN

Série HD-AN Sistema inteligente de cultura anaeróbica/microoxigênica
1, simples de operar, um clique anaeróbico
Sistema de micro oxigênio anaeróbico inteligente da série HD-ANEquipado com sensores de alta precisão e sistema de controle automático de oxigênio, de acordo com as necessidades de diferentes espécies,Define vários padrões de cultivo anaeróbico, microoxigênio, flexo e outros- É.
Geração de um cliquesem necessidade de intervenção humana;
Geração rápida de ambientes de cultivo, reduzindo drasticamente o tempo de espera:
Custo baixo, adaptação múltipla
1. equipamento disponível, sem outros consumíveis;
2. Consumo de gás muito baixo:
3. Uma rica opção de tanquesAdaptação integral a todos os tipos de veículos de cultivo -8 tanques de cultivo disponíveis:
Modelos adequados para 6, 12, 24, 36 e 60 pratos de Petri convencionais
Tanques adaptados para pratos de petri duplos para flexo
Tanques de cultivo para placas enzimáticas, placas de 96 buracos e outros veículos específicos para a identificação microbiana
Tanques para Shigella com 10 sacos
4. EquipamentoModo de agulhaÉ contra.Pequeno recipiente selado(por exemplo, tubos de ensaio, garrafas de cilindro, tubos de proliferação, etc.) projetado exclusivamente para o ambiente anaeróbico, especialmente para abordar os métodos tradicionais ao lidar com amostras de pequena capacidadePontos de dor de "fechamento difícil, desoxigenação deficiente, operação pesada"- É.
Monitoramento em tempo real, garantia do processo
Configuração do sistemaSistema de monitoramento em tempo real de concentração de oxigênio sem fioUtilizado na cultura de micróbios anaeróbicos e microoxigênicos, células, etc.Monitoramento em tempo real de oxigênio, dióxido de carbono, temperatura, umidade, etc.Garantir que o ambiente de cultivo atenda aos requisitos experimentais.
Alarme automático para máquinas além da faixa de concentraçãoPara ajudar o pessoal experimental a detectar a mudança de estado do equipamento em tempo útil e evitar o risco de cultivo devido a erros de operação ou falhas não tratadas em tempo útil, para garantir todo o processo de cultivo.
Série HD-AO Sistema de monitoramento em tempo real de concentração de oxigênio sem fio