O efeito da amostragem de amostradores de microbios de ar é afetado por vários fatores e requer um controle integrado de vários aspectos, como o desempenho do instrumento, as especificações operacionais, as condições ambientais e o tratamento de amostras. Aqui estão os principais fatores e análises:
A propriedade do instrumento
Precisão do fluxo de amostragem
Efeito: fluxos elevados ou baixos podem causar desvios de volume de amostragem que afetam diretamente o cálculo da concentração microbiana (por exemplo, unidade de formação de colônia CFU / m³).
Exemplo: Se o fluxo nominal é de 28,3 L/min, mas o fluxo real é baixo, pode haver vazamentos de micróbios em ambientes de baixa concentração.
Contramedidas: Calibre o fluxo regularmente com um medidor de fluxo de membrana de sabão para garantir que o erro ≤ ± 5%.
Projeto da cabeça de amostragem e diámetro
Princípio: o tamanho do orifício da cabeça de amostragem determina a faixa de tamanho das partículas que podem ser capturadas pelos micróbios (por exemplo, o amostrador de impacto depende do impacto inercial, quanto menor o orifício, menor o tamanho das partículas capturadas).
Risco: O obstruído ou o desenho inadequado do orifício pode levar a uma redução da eficiência da deposição de micróbios de partículas grandes ou a fuga de partículas pequenas com o fluxo de ar.
Manutenção: Limpe a cabeça de amostragem após cada amostragem para evitar que partículas residuais afetem a amostragem posterior.
Mídio de recolha (meio/membrana de filtragem)
Escolha do tipo: os diferentes micróbios precisam corresponder a um meio específico (por exemplo, a agar nutricional para bactérias e a agar de maltagem para fungos), e falhas no meio ou desvios de composição podem levar a vazamentos.
Controle de umidade: excesso de secagem do meio de cultura reduz a taxa de sobrevivência dos micróbios, excesso de umidade pode levar à propagação de micróbios e afetar a contagem de colônias.
Condições de armazenamento: o meio de cultura precisa ser refrigerado (2 ~ 8 ° C) para evitar a deterioração.
Normas operacionais e fatores humanos
Altura e posição da amostragem
Diferenças ambientais: 0,5 a 1,5 metros do solo é o cinturão respiratório do corpo humano, para a altura de amostragem regular; No entanto, as salas limpas devem ser amostradas acima do plano de trabalho de acordo com padrões como a ISO 14644.
Evite interferências: Mantenha-se longe de portas e janelas, aberturas de ventilação ou áreas em que as pessoas andam com frequência para evitar que o fluxo de ar cause amostras desiguais.
Tempo e frequência de amostragem
Controle do tempo: o tempo excessivo de amostragem única pode levar à secagem do meio ou ao crescimento excessivo de micróbios (especialmente em ambientes de alta concentração) e deve ser ajustado de acordo com a concentração estimada (por exemplo, baixas concentrações podem ser prolongadas até 30 minutos e altas concentrações reduzidas até 10 minutos).
Repetibilidade: é necessário coletar ≥ 3 amostras paralelas na mesma área para reduzir erros acidentais.
Operação estéril
Risco de poluição: Não desinfetar a superfície do instrumento (por exemplo, cabeça de amostragem, placa de cultivo) antes da amostragem ou entrar em contato com as mãos na área de amostragem durante a operação pode introduzir micróbios estrangeiros.
Processo de especificação: limpe a cabeça de amostra com 75% de álcool, use luvas estériles e substitua rapidamente o meio para evitar a exposição prolongada.
III. Condições ambientais
Temperatura e umidade
Temperatura: alta temperatura (> 30 ° C) pode acelerar a secagem do meio, baixa temperatura (< 10 ° C) inibirá a atividade microbiana, recomenda-se o controle da temperatura ambiente de amostragem em 15 ~ 25 ° C.
Umidade: alta umidade (> 80% RH) pode causar a propagação da colônia, baixa umidade (< 30% RH) desativar os micróbios, a umidade ideal é de 40% ~ 60% RH.
Corrente e pressão
Efeito turbulento: fluxos de ar fortes (por exemplo, ventiladores, saídas de ar condicionado) podem alterar a distribuição dos micróbios, resultando em amostragem desigual; Ambientes de pressão negativa, como armários de biossegurança, precisam ajustar o fluxo de amostragem para compensar a diferença de pressão do ar.
Correção da pressão atmosférica: em áreas de alta altitude, o volume real da amostragem deve ser convertido de acordo com a pressão atmosférica (fórmula: volume real = volume nominal × pressão atmosférica local / pressão atmosférica padrão).
Poluição de fundo
Limpeza antes da amostragem: se o ambiente acabar de ser desinfetado (por exemplo, exposição a raios ultravioletas, fumigação química), espere pelo menos 30 minutos para evitar resíduos de desinfetante que inibam o crescimento de micróbios.
Poluição cruzada: quando vários amostradores são usados simultaneamente, é necessário manter uma distância de ≥ 1 metro para evitar que o fluxo de ar de amostragem interfira um com o outro.
Transporte e processamento de amostras
Condições de transporte
Tempo: a amostra deve ser enviada dentro de 2 horas após a amostragem, se o atraso é necessário para refrigeração (2 ~ 8 ° C), mas as amostras de fungos devem ser conservadas a temperatura ambiente (para evitar a inibição do crescimento por baixa temperatura).
Proteção contra choques: Evite vibrações fortes durante o transporte, evitando que a colisão do meio com a cabeça de amostragem cause deslocamento da colônia.
Condições de cultivo
Temperatura e tempo: as bactérias geralmente são cultivadas por 35 a 37 ° C por 48 horas, e os fungos são cultivados por 25 a 28 ° C por 5 a 7 dias, e a falta de tempo pode levar à formação incompleta das colônias.
Ambiente de oxigênio / anaeróbico: alguns micróbios exigem ambientes de gás específicos (por exemplo, caixas de cultivo de CO2) e as condições não satisfeitas podem resultar em vazamentos.
V. Outros fatores
Propriedades microbianas
Distribuição de tamanho de partículas: os micróbios do ar são presentes na forma de aerossóis (tamanho de partículas 0,1 ~ 10 μm), diferentes amostradores para diferentes tamanhos de partículas de captura de eficiência diferente (por exemplo, o amostrador de impacto do furo de setagem de seis graus pode separar micróbios de tamanho de partículas diferentes).
Capacidade de sobrevivência: certos micróbios (por exemplo, vírus, bactérios) requerem tratamento especial (por exemplo, inativação imediata após a amostragem ou uso de meios nutricionalmente enriquecidos).
Ciclo de calibração e manutenção
Verificação periódica: Calibração completa do instrumento (fluxo, eficiência da cabeça de amostragem, desempenho do meio de cultura) pelo menos a cada seis meses e verificação da vedação da via de ar após uso prolongado.
O controle sistemático desses fatores pode melhorar significativamente a precisão e a confiabilidade da amostragem de micróbios do ar e fornecer suporte de dados eficazes para monitoramento ambiental, como hospitais, fábricas de alimentos, laboratórios.